SoSTPS1在作为倍半萜合酶中的应用制造技术

本发明专利技术公开了SoSTPS1在作为倍半萜合酶中的应用。本发明专利技术公开的SoSTPS1来源于紫丁香，为如下A1)、A2)或A3)：A1)氨基酸序列是SEQ ID No.1的蛋白质；A2)将序列表中SEQ ID No.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有倍半萜合酶活性的蛋白质；A3)来源于紫丁香且与A1)所述蛋白质具有98％以上同一性且具有倍半萜合酶活性的蛋白质。实验证明，本发明专利技术的SoSTPS1具有倍半萜合酶活性，可以将法尼基焦磷酸或其盐催化生成佛术烯，本发明专利技术的SoSTPS1及其编码基因具有很好的应用前景。好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
Lindl.)的蛋白质，其名称为SoSTPS1，SoSTPS1为如下A1)、A2)、A3)或A4)：
[0007]A1)氨基酸序列是SEQ ID No.1的蛋白质；
[0008]A2)将序列表中SEQ ID No.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有倍半萜合酶活性的蛋白质；
[0009]A3)来源于紫丁香且与A1)所述蛋白质具有98％以上同一性且具有倍半萜合酶活性的蛋白质；
[0010]A4)在A1)或A2)或A3)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。
[0011]为了使A1)中的蛋白质便于纯化，可在由序列表中SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如下表所示的标签。
[0012]表：标签的序列
[0013]标签残基序列Poly
‑
Arg5
‑
6(通常为5个)RRRRRPoly
‑
His2
‑
10(通常为6个)HHHHHHFLAG8DYKDDDDKStrep
‑
tag II8WSHPQFEKc
‑
myc10EQKLISEEDL
[0014]上述A2)中的蛋白质，为与SEQ ID No.1所示蛋白质的氨基酸序列具有75％或75％以上同一性且具有相同功能的蛋白质。所述具有75％或75％以上同一性为具有75％、具有80％、具有85％、具有90％、具有95％、具有96％、具有97％、具有98％或具有99％的同一性。r/>[0015]上述A2)中的蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。
[0016]上述A2)中的蛋白质的编码基因可通过将SEQ ID No.2所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变，和/或在其5
′
端和/或3
′
端连上上表所示的标签的编码序列得到。其中，SEQ ID No.2所示的DNA分子编码SEQ ID No.1所示的蛋白质。
[0017]本专利技术还提供了与SoSTPS1相关的生物材料，所述生物材料为下述B1)至B12)中的任一种：
[0018]B1)编码SoSTPS1的核酸分子；
[0019]B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；
[0020]B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体；
[0021]B4)含有B2)所述表达盒的重组载体；
[0022]B5)含有B1)所述核酸分子的重组微生物；
[0023]B6)含有B2)所述表达盒的重组微生物；
[0024]B7)含有B3)所述重组载体的重组微生物；
[0025]B8)含有B4)所述重组载体的重组微生物；
[0026]B9)含有B1)所述核酸分子的转基因植物细胞系；
[0027]B10)含有B2)所述表达盒的转基因植物细胞系；
[0028]B11)含有B3)所述重组载体的转基因植物细胞系；
[0029]B12)含有B4)所述重组载体的转基因植物细胞系。
[0030]上述生物材料中，所述核酸分子可为如下1)或2)或3)或4)：
[0031]1)编码序列是序列表中SEQ ID No.2的DNA分子；
[0032]2)序列表中SEQ ID No.2所示的DNA分子；
[0033]3)与1)或2)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且编码SoSTPS1的DNA分子；
[0034]4)在严格条件下与1)或2)或3)限定的核苷酸序列杂交，且编码SoSTPS1的DNA分子。
[0035]其中，所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如mRNA或hnRNA等。
[0036]本领域普通技术人员可以很容易地采用已知的方法，例如定向进化和点突变的方法，对本专利技术的编码SoSTPS1蛋白质的核苷酸序列进行突变。那些经过人工修饰的，具有与本专利技术分离得到的SoSTPS1蛋白质的核苷酸序列75％或者更高同一性的核苷酸，只要编码SoSTPS1蛋白质且具有SoSTPS1蛋白质功能，均是衍生于本专利技术的核苷酸序列并且等同于本专利技术的序列。
[0037]这里使用的术语“同一性”指与天然核酸序列的序列相似性。“同一性”包括与本专利技术的编码SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质的核苷酸序列具有75％或更高，或85％或更高，或90％或更高，或95％或更高同一性的核苷酸序列。同一性可以用肉眼或计算机软件进行评价。使用计算机软件，两个或多个序列之间的同一性可以用百分比(％)表示，其可以用来评价相关序列之间的同一性。
[0038]上述生物材料中，所述严格条件可为如下：50℃，在7％十二烷基硫酸钠(SDS)、0.5MNaPO4和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在50℃，2
×
SSC，0.1％ SDS中漂洗；还可为：50℃，在7％SDS、0.5M NaPO4和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在50℃，1
×
SSC，0.1％ SDS中漂洗；还可为：50℃，在7％SDS、0.5M NaPO4和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在50℃，0.5
×
SSC，0.1％ SDS中漂洗；还可为：50℃，在7％SDS、0.5M NaPO4和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在50℃，0.1
×
SSC，0.1％ SDS中漂洗；还可为：50℃，在7％SDS、0.5M NaPO4和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在65℃，0.1
×
SSC，0.1％ SDS中漂洗；也可为：在6
×
SSC，0.5％ SDS的溶液中，在65℃下杂交,然后用2
×
SSC,0.1％ SDS和1
×
SSC,0.1％SDS各洗膜一次；也可为：2
×
SSC，0.1％ SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次5min，又于0.5
×
SSC，0.1％ SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次15min；也可为：0.1
×
SSPE(或0.1
×
SSC)、0.1％SDS的溶液中，65℃条件下杂交并洗膜。
[0039]上述75％或75％以上同一性，可为80％、85％、90％或95％以上的同一性。
[0040]上述生物材料中，B2)所述的含有编码SoSTPS1蛋白质的核酸分子的表达盒(SoSTPS1基因表达盒)，是指能够在宿主细胞中表达SoSTPS1蛋白质的DNA，该DNA不但可包括启动SoSTPS1基因转录的启动子，还可包括终止SoSTPS1基因转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括增强子序列。
[0041]可用现有的表达载体构建含有所述SoSTPS1基因表达盒的重组载体。
[00本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.蛋白质，为如下A1)、A2)、A3)或A4)：A1)氨基酸序列是SEQ ID No.1的蛋白质；A2)将序列表中SEQ ID No.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有倍半萜合酶活性的蛋白质；A3)来源于紫丁香且与A1)所述蛋白质具有98％以上同一性且具有倍半萜合酶活性的蛋白质；A4)在A1)或A2)或A3)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。2.与权利要求1所述蛋白质相关的生物材料，为下述B1)至B12)中的任一种：B1)编码权利要求1所述蛋白质的核酸分子；B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体；B4)含有B2)所述表达盒的重组载体；B5)含有B1)所述核酸分子的重组微生物；B6)含有B2)所述表达盒的重组微生物；B7)含有B3)所述重组载体的重组微生物；B8)含有B4)所述重组载体的重组微生物；B9)含有B1)所述核酸分子的转基因植物细胞系；B10)含有B2)所述表达盒的转基因植物细胞系；B11)含有B3)所述重组载体的转基因植物细胞系；B12)含有B4)所述重组载体的转基因植物细胞系。3.根据权利要求2所述的生物材料，其特征在于：所述核酸分子为如下1)或2)或3)或4)：1)编码序列是序列表中SEQ ID No.2的DNA分子；2)序列表中SEQ ID No.2所示的DNA分子；3)与1)或2)限定的核苷酸序列具有...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄璐琦，郑汉，邰巴达拉胡，虞慕瑶，拉喜那木吉拉，刘琪，
申请(专利权)人：内蒙古民族大学，
类型：发明
国别省市：