一种用于Masson三色染色的红色染液、试剂组合和方法技术

本发明专利技术公开了一种用于Masson三色染色的红色染液、试剂组合和方法，属于组织化学技术领域。所述红色染液中包括0.4％～1.0％的比布列西猩红、0.4％～1.0％的诱惑红和1％～2％的乙酸，溶剂为水，进一步还包括0.05％～0.15％的橙黄G钠盐；所述试剂组合包括所述红色染液，还包括蓝色染液，所述蓝色染液包括2％的苯胺蓝、1％～2％的乙酸，溶剂为水，进一步还包括0.005％～0.03％的固绿、0.0025％～0.015％的亮绿或0.005％～0.03％的溴甲酚绿钠盐。所述试剂组合还包括苏木素染液、红色分化剂和蓝色分化剂。本发明专利技术提供的改进的用于Masson三色染色的红色染液增加了对肌纤维染色的亲和力，使之与肌纤维的染色更牢固，经磷钼酸分化后仍能保持鲜艳的红色。同时，改良的蓝色染液对胶原纤维的染色更明艳，使肌纤维与胶原纤维的色调对比更明显、更易分辨。更易分辨。更易分辨。

【技术实现步骤摘要】
一种用于Masson三色染色的红色染液、试剂组合和方法


[0001]本专利技术涉及组织化学领域，具体地，涉及一种用于Masson三色染色的红色染液、试剂组合和方法。

技术介绍

[0002]Masson染色法常用于胶原纤维和肌纤维的鉴别染色，是病理组织制片的重要方法之一。机体在慢性炎症、机化和瘢痕形成中，随病理过程的发展可出现胶原纤维。在早期HE染色切片中这些纤维往往和纤维蛋白很难鉴别，但通过Masson染色可证实。
[0003]目前Masson染色法主要使用丽春红和酸性品红复配对肌纤维进行染色，进一步可添加比布列西猩红；使用苯胺蓝对胶原纤维进行染色。例如，中国专利技术专利CN110926911A公开了一种马松染色试剂盒及其染色方法，所述马松染色试剂盒包括丽春红酸性品红染液和苯胺蓝染液，所述丽春红酸性品红染液的制备方法为：将4g丽春红、2g酸性品红溶于495mL蒸馏水中，再加入5mL冰醋酸，获得丽春红酸性品红染液；所述苯胺蓝染液的制备方法为：将10g苯胺蓝溶于490mL蒸馏水中，得到溶液B，再向溶液B中加入10mL冰醋酸，获得苯胺蓝染液。再如，胥维勇等人公开了一种改良的Masson三色染色法，染液为：l％丽春红2R水溶液30mL，1％酸性品红液20mL，l％比布列西猩红水溶液50mL，冰醋酸1mL(胥维勇，杨群，范小莉；介绍一种改良Masson三色染色法[J]；诊断病理学杂志；2005年01期)。
[0004]然而，由于丽春红、酸性品红对肌纤维的染色不够牢固，通过分化或清洗容易脱色，导致常规Masson三色染色对肌纤维、细胞质等染色的红色偏暗偏浅，组织结构的色彩对比度不够鲜亮明显或不容易辨析，复染蓝色之后红色容易被覆盖，变得更暗、呈蓝紫色，甚至无法辨别。

技术实现思路

[0005]为了解决上述技术问题中的至少一个，本专利技术旨在提供一种染色鲜亮且更牢固，组织结构色彩对比度鲜明、容易辨析的Masson三色染液组合，为了达到该目的，本专利技术采用的技术方案如下：
[0006]本专利技术第一方面提供一种用于Masson三色染色的红色染液，包括质量体积分数为0.4％～1.0％的比布列西猩红、质量体积分数0.4％～1.0％的诱惑红和体积分数为1％～2％的乙酸，溶剂为水。
[0007]在本专利技术中，使用比布列西猩红、诱惑红代替丽春红和酸性品红，所述比布列西猩红和诱惑红是分子量大小在400
‑
600的偶氮染料，其对肌纤维的染色作用比丽春红和酸性品红更牢固，使组织着色的红色更鲜艳，与蓝色对比更加鲜明。
[0008]在本专利技术的一些实施方案中，所述红色染液中还包括质量体积分数为0.05％～0.15％的橙黄G钠盐。所述橙黄G钠盐是一种分子量大小在400
‑
600的橘黄色偶氮染料，可以调节红色染料对肌纤维染色过深的情况，利用橙黄G钠盐对红色进行调色，能够防止红色染液与蓝色染液在组织上的叠加染色过深或过暗，使肌纤维的红染与胶原纤维的蓝色对比更
明显。
[0009]本专利技术第二方面提供一种用于Masson三色染色的试剂组合，包括本专利技术第一方面任一所述的红色染液，还包括蓝色染液，所述蓝色染液包括质量体积分数为2％的苯胺蓝和体积分数为1％～2％的乙酸，溶剂为水。
[0010]在本专利技术的一些实施方案中，所述蓝色染液还包括质量体积分数为0.005％～0.03％的固绿、质量体积分数为0.0025％～0.015％的亮绿或质量体积分数为0.005％～0.03％的溴甲酚绿钠盐。利用固绿或亮绿或溴甲酚绿钠盐对苯胺蓝染液进行调色，能够防止蓝色染液对胶原纤维染色过深。
[0011]进一步地，所述试剂组合还包括苏木素染液、红色分化剂和/或蓝色分化剂。
[0012]在本专利技术的一些实施方案中，所述苏木素染液为Weigert铁苏木素染液，所述Weigert铁苏木素染液由Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液按1:2～2:1比例混合而成，
[0013]所述Weigert铁苏木素A液中包括质量体积分数为0.5％～2.0％的苏木精，体积分数为10％～20％的乙二醇，溶剂为95％乙醇；
[0014]所述Weigert铁苏木素B液中包括质量分数为0.36％～0.38％的HCl，质量体积分数为1.0％～1.5％的FeCl3，溶剂为水。
[0015]在本专利技术的一些具体实施方案中，
[0016]50mL Weigert铁苏木素A液的配制方法为：称取0.5g苏木精，加入7mL乙二醇，再加入43mL 95％乙醇，混匀。
[0017]50mL Weigert铁苏木素B液的配制方法为：浓盐酸0.5mL，溶解于50mL纯化水，加入0.58g无水三氯化铁，混匀。其中，所述浓盐酸的质量分数为36％～38％。
[0018]在本专利技术的一些优选实施方案中，所述Weigert铁苏木素染液由Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液按1:1比例混合而成。
[0019]在本专利技术的一些实施方案中，所述红色分化剂为磷钨磷钼酸溶液，所述磷钨磷钼酸溶液中包括质量体积分数为2.0％～3.0％的磷钨酸和质量体积分数为2.0％～3.0％的磷钼酸，溶剂为水。
[0020]在本专利技术的一些具体实施方案中，100mL所述磷钨磷钼酸溶液的配制方法为：称取2.5g磷钨酸、2.5g磷钼酸，加入100mL水溶解。
[0021]在本专利技术的一些实施方案中，所述蓝色分化剂为乙酸溶液，所述乙酸溶液中包括体积分数为0.5％～2％的乙酸，溶剂为水。
[0022]在本专利技术的一些具体实施方案中，500mL所述乙酸溶液的配制方法为：5mL乙酸，加入500mL纯化水中，混匀。
[0023]本专利技术第三方面提供本专利技术第二方面任一所述的一种用于Masson三色染色的试剂组合在制备用于组织三色染色的试剂盒中的应用。
[0024]所述三色染色是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。三色染色与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而，苯胺蓝的分子量很大，因此三色染色后肌纤维、胞质呈红色，胶原纤维呈蓝色，细胞核呈紫褐色或蓝褐色，三色染色法主要用于区分胶原纤维和肌纤维，使组织机构易于辨析。
[0025]在本专利技术中，所述组织为包括胶原纤维和/或肌纤维的组织。将上述改进的Masson三色染色液用于胶原纤维、肌纤维染色，能够判断分析心、肾、肝等器官的纤维组织形态和纤维化病变等。
[0026]在本专利技术的一些实施方案中，所述组织选自包括宫颈组织、结肠组织、肾组织、肝组织的组中的至少一种。
[0027]本专利技术第三方面提供本专利技术第二方面所述的包括红色染液、蓝色染液、苏木素染液、红色分化剂和蓝色分化剂的试剂组合对组织进行三色染色的方法，包括以下步骤：
[0028]S1，将载有组织样本的切片进行加热烤片，再进行脱蜡水化；
[0029]S2，利用苏本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于Masson三色染色的红色染液，其特征在于，包括质量体积分数为0.4％～1.0％的比布列西猩红、质量体积分数0.4％～1.0％的诱惑红和体积分数为1％～2％的乙酸，溶剂为水。2.根据权利要求1所述的一种用于Masson三色染色的红色染液，其特征在于，还包括质量体积分数为0.05％～0.15％的橙黄G钠盐。3.一种用于Masson三色染色的试剂组合，其特征在于，包括权利要求1或2所述的红色染液，还包括蓝色染液，所述蓝色染液包括质量体积分数为2％的苯胺蓝和体积分数为1％～2％的乙酸，溶剂为水。4.根据权利要求3所述的一种用于Masson三色染色的试剂组合，其特征在于，所述蓝色染液还包括质量体积分数为0.005％～0.03％的固绿、质量体积分数为0.0025％～0.015％的亮绿或质量体积分数为0.005％～0.03％的溴甲酚绿钠盐。5.根据权利要求4所述的一种用于Masson三色染色的试剂组合，其特征在于，还包括苏木素染液、红色分化剂和/或蓝色分化剂。6.根据权利要求5所述的一种用于Masson三色染色的试剂组合，其特征在于，所述苏木素染液为Weigert铁苏木素染液，所述Weigert铁苏木素染液由Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液按1:2～2:1比例混合而成，所述Weigert铁苏木素A液中包括质量体积分数为0.5％～2.0％的苏木精，体积分数为10％～20％的乙二醇，溶剂为95％乙醇；...

【专利技术属性】
技术研发人员：陶娜娜，章月凯，殷梵均，吴烨超，李梦馨，
申请(专利权)人：图凌杭州生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：