一种检测DNA甲基化酶的电化学发光传感器及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种检测DNA甲基化酶的电化学发光传感器及其制备方法和应用，该传感器由NH2‑

【技术实现步骤摘要】
一种检测DNA甲基化酶的电化学发光传感器及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于生物医学检测领域，具体涉及一种检测DNA甲基化酶的电化学发光传感器及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]DNA甲基化酶(MTase)广泛存在于生物有机体中，可以催化甲基化反应，以S
‑
腺苷
‑
L
‑
蛋氨酸(SAM)作为甲基供体转移特定DNA中的胞嘧啶或腺嘌呤碱基。从原核生物到真核生物，许多主要生理过程都参与甲基转移酶的调节。在人类中，DNA MTase在基因表达、基因组维护和亲本印记中发挥着重要作用，其过度表达可能与各种癌症的发生和发展密切相关。在细菌物种中，DNA MTase参与细菌毒力和运动性的调节，是宿主细菌定殖导致疾病的关键因素。因此，DNA MTase可作为早期临床诊断的有效生物标志物和抗微生物药物靶点。最近，报道了许多检测DNA MTase活性的方法，包括比色法、荧光法、电化学法和光电化学法。然而，由于检测探针的不稳定性和检测程序的复杂性，高灵敏度的DNA MTase定量检测仍然具有挑战性本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测DNA甲基化酶(MTase)的电化学发光传感器，其特征在于，由NH2‑
UIO66@WO3‑
x
/Nafion修饰基底电极，回文探针被Dam MTase甲基化和DpnI剪切后得到dsDNA，共价结合到修饰后的电极上，在电极上进行TdT介导的支状扩增反应捕获并结合Ru(phen)3Cl2形成电化学发光传感器。2.根据权利要求1所述的检测DNA甲基化酶(MTase)的电化学发光传感器，其特征在于，所述NH2‑
UIO66@WO3‑
x
由NH2‑
UIO66与WO3‑
x
量子点制备，制备过程包括如下步骤：(1)通过超声剥离法制备水溶性良好的WO3‑
x
量子点；(2)将2
‑
氨基对苯二甲酸与ZrOCl2·
8H2O溶解在DMF中，在搅拌状态下滴加CH3COOH，将混合物加热反应，结束后将反应物离心取沉淀，洗涤沉淀，将沉淀干燥得到NH2‑
UIO66；(3)将NH2‑
UIO66与WO3‑
x
量子点在水溶液中偶联得到NH2‑
UIO66@WO3‑
x
。3.根据权利要求1所述的检测DNA甲基化酶(MTase)的电化学发光传感器，其特征在于，所述回文探针的序列优选为5
’‑
COOH
‑
TTT TTC GTG GAT CCA CG
‑
P
‑3’
。4.一种权利要求1所述的检测DNA甲基化酶(MTase)的电化学发光传感器的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)基底材料固定：将NH2‑
UIO66@WO3‑
x
/Nafion混合溶液滴涂在电极表面并干燥过夜；(2)锚定识别分子：将甲基化和剪切后的回文探针溶液滴涂在步骤(1)得到的电极表面并进行孵育；(3)信号扩增过程：将TdT、dATP与Poly
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【专利技术属性】
技术研发人员：沈艳飞，尹斐，张袁健，
申请(专利权)人：东南大学，
类型：发明
国别省市：