一种快速检测蛋白O-GlcNAc修饰的试剂盒及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种快速检测蛋白O

【技术实现步骤摘要】
一种快速检测蛋白O
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GlcNAc修饰的试剂盒及应用


[0001]本专利技术属于生物
，尤其涉及快速检测蛋白O
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GlcNAc修饰的试剂盒及应用。

技术介绍

[0002]氧连接的β
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N
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乙酰葡萄糖胺修饰(O
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GlcNAc修饰)是一种发生在蛋白丝氨酸、苏氨酸残基羟基上的一种动态、可逆的翻译后修饰。该修饰由乙酰葡萄糖胺转移酶OGT和乙酰葡萄糖胺水解酶OGA催化完成，分别催化乙酰葡萄糖胺的添加与移除。O
‑
GlcNAc修饰主要发生在真核生物细胞的细胞浆和细胞核蛋白上，目前已知有几千种蛋白发生O
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GlcNAc修饰。这种修饰通过影响蛋白稳定性，酶活性、蛋白细胞内定位、蛋白
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蛋白作用及蛋白与其他生物大分子之间的作用而调节多种信号转导过程，与肿瘤、二型糖尿病、神经退行性疾病等许多疾病的发生、发展相关。了解蛋白O
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GlcNAc修饰变化，尤其特定蛋白O
‑<br/>GlcNAc本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种快速检测蛋白O
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GlcNAc修饰的试剂盒，其特征在于包括如下组分：A.与链霉亲和素蛋白融合表达的糖苷酶突变体，所述与链霉亲和素蛋白融合表达的糖苷酶突变体简称为SA
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cpOGA(D298N)，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；B.阳性对照：O
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GlcNAc修饰的MBP
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sOGT蛋白，所述MBP
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sOGT蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示；所述O
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GlcNAc为氧连接的β
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N
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乙酰葡萄糖胺的简称；C.阴性对照：MBP
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sOGT蛋白；D.生物素修饰的辣根过氧化物酶。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述SA
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cpOGA(D298N)是用下述方法制成：将SA
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cpOGA(D298N)基因构建到pET28a中得到重组质粒pET28a
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SA
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cpOGA(D298N)，导入大肠杆菌BL21(DE3)菌株，得到重组菌1；诱导表达，纯化，得到SA
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cpOGA(D298N)；所述SA
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cpOGA(D298N)基因的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述O
‑
GlcNAc修饰的MBP
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sOGT蛋白是用下述方法制成：将sOGT基因构建到pMAL
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c2x载体中得pMAL
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c2x
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sOGT重组质粒，将pMAL
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c2x<...

【专利技术属性】
技术研发人员：张连文，李玲，杨明，黎先感，
申请(专利权)人：南开大学，
类型：发明
国别省市：