DSC2作为肥厚性心肌病生物标志物的应用制造技术

本发明专利技术公开了DSC2作为肥厚性心肌病生物标志物的应用，属于生物医学领域。特别地，DSC2作为肥厚性心肌病生物标志物在制备诊断肥厚性心肌病的产品的应用，产品包括试剂盒、芯片或试纸条，通过检测受试者的血清样品中DSC2表达含量进行肥厚性心肌病的早期诊断或确定肥厚性心肌病的严重程度。本发明专利技术依据高血压或主动脉瓣狭窄病人血清中的DSC2表达变化情况评估患者心肌肥厚程度及预后，DSC2作为肥厚性心肌病生物标志物特异性和灵敏度高，检测迅速，只需抽取病人的微量外周静脉血即可检测，对实验条件和检测方式要求也不高，具有重要的临床价值。价值。价值。

【技术实现步骤摘要】
DSC2作为肥厚性心肌病生物标志物的应用


[0001]本专利技术属于生物医学领域，具体涉及DSC2作为肥厚性心肌病生物标志物的应用。

技术介绍

[0002]压力超负荷导致的心肌肥厚发生在约7％
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19％的普通成年人群和超过35％的高血压患者或67％的无症状严重主动脉瓣狭窄患者中，心肌肥厚若长期得不到有效控制，会导致心脏、肾脏、大血管等组织器官受到严重损害。心肌肥厚增加不良心血管后果的风险，包括心律失常、心力衰竭或死亡，表明进行性心肌肥厚可能是压力超负荷(如高血压或主动脉狭窄)患者适应不良过程的高频率生物标志物。现有技术中，虽然对心肌肥厚有深入的研究，但其发病机制尚未完全阐明，常用的心脏超声检查评估患者心肌肥厚的严重程度存在一定的设备限制。
[0003]因此，寻找心肌肥厚合适的生物标志物，通过血清学检查评估患者心肌肥厚和心功能，从而针对性的给予药物治疗来改善或逆转心肌肥厚具有重要的意义。

技术实现思路

[0004]针对现有技术中的不足，本专利技术的目的是提供桥粒胶蛋白2(DSC2)作为肥厚性心肌病生物标志物的应用。
[0005]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0006]本专利技术提供DSC2作为肥厚性心肌病生物标志物在制备诊断肥厚性心肌病的产品的应用。
[0007]本专利技术还提供检测DSC2表达含量的试剂在制备诊断肥厚性心肌病的产品中的应用。
[0008]作为优选，所述产品包括试剂盒、芯片或试纸条。
[0009]作为优选，通过所述产品检测受试者的血清样品中DSC2表达含量进行肥厚性心肌病的早期诊断或确定肥厚性心肌病的严重程度。
[0010]作为优选，所述受试者为由高血压或主动脉瓣狭窄引起的压力负荷性心肌病患者。
[0011]与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
[0012]本专利技术通过检测临床高血压和主动脉瓣狭窄病人血清中的DSC2表达，依据其表达变化情况评估患者心肌肥厚程度及预后，DSC2作为肥厚性心肌病生物标志物特异性和灵敏度高，检测迅速，只需抽取病人的微量外周静脉血即可检测，对实验条件和检测方式要求也不高，具有重要的临床价值。
附图说明
[0013]图1为实施例中主动脉瓣狭窄患者和对照患者血清中DSC2水平；Ctrl代表对照患者；AS代表主动脉瓣狭窄患者。
[0014]图2为实施例中经导管主动脉瓣置入术和外科主动脉瓣置换术明显缓解主动脉瓣跨瓣压的患者术前术后血清的DSC2含量；Before代表术前；After代表术后；TAVR代表经导管主动脉瓣置入术；SAVR代表外科主动脉瓣置换术。
[0015]图3为实施例中高血压患者和对照患者血清中DSC2水平；Ctrl代表对照患者；HY代表高血压患者；左图为高血压患者和对照患者血清中DSC2水平；右图受试者操作曲线(ROC)，其中界值为6.867。
[0016]图4为实施例中高血压患者DSC2水平与超声心动图心肌肥厚相关指标的关系；IVS代表室间隔厚度(mm)；LVPW代表左室后壁厚度(mm)。
[0017]图5为实施例中原发性和继发性肥厚性心肌病患者心肌组织中DSC2表达升高；Ctrl代表对照患者；Primary HCM代表原发性肥厚性心肌病患者；Secondary HCM代表继发性肥厚性心肌病患者。
[0018]图6为实施例中主动脉缩窄(TAC)建立心肌肥厚模型后小鼠DSC2水平的结果。
具体实施方式
[0019]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本专利技术实施例的附图，对本专利技术实施例的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于所描述的本专利技术的实施例，本领域普通技术人员在无需创造性劳动的前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0020]以下实施例中收集复旦大学附属中山医院的主动脉瓣狭窄患者和对照患者血清样本，所有纳入研究的志愿者在血清样本采集前均签署知情同意书。在相同条件下收集研究对象的血液标本，采集后静置60分钟后直接取血清，储存于
‑
80℃冰箱保存备用。
[0021]实施例1
[0022]抽取高血压和主动脉瓣狭窄等压力超负荷诱导心肌肥厚患者的外周静脉血，离心分离血清，通过ELISA方式检测主动脉瓣狭窄患者和健康对照DSC2蛋白在血清中的表达情况，用酶标仪检测吸光度，测定每个病人的DSC2外周血表达，根据正常人的正态分布情况分析心肌肥厚病人DSC2表达升高的程度，步骤如下：
[0023]通过ELISA检测主动脉瓣狭窄患者和健康对照血清外周血DSC2的表达水平(ELISA试剂盒：英国Biorbyt公司Cat#：orb550508)，使用血清分离管获取病人外周血清，并对血清进行如下检测：
[0024]1、每孔加入100μL标准品或血清样品，37℃90min。
[0025]2、吸掉每个孔的液体，向每个孔中加入100μL Detection Reagent A的工作溶液，37℃45h。
[0026]3、洗板3次，每次3分钟。
[0027]4、向每个孔中加入100μL Detection Reagent B的工作溶液，37℃45h。
[0028]5、洗板5次，每次3分钟。
[0029]6、向每个孔中加入90μL的Substrate Solution，37℃15
‑
25min，避光。
[0030]7、向每个孔加入50μL的Stop Solution，在450nm下测定的OD值，结果如图1所示。
[0031]实施例2
[0032]本实施例对主动脉瓣狭窄患者进行经导管主动脉瓣置换术(TAVR)或者外科主动
脉瓣置换术(SAVR)术前术后分别取血清，通过ELISA测定DSC2含量，结果如图2所示。
[0033]实施例3
[0034]本实施例对高血压患者和健康对照血清样本进行ELISA检测DSC2含量，结果如图3所示，其中界值为6.867，AUC：0.814，95％CI：0.731
‑
0.951。
[0035]实施例4
[0036]本实施例验证高血压患者和健康对照血清中DSC2水平与心超心肌肥厚指标的相关性，结果如图4所示。
[0037]实施例5
[0038]本实施例通过Western Blot检测肥厚性心脏病患者和健康对照的心脏组织的DSC2的表达水平，具体操作如下：
[0039]取适量心脏组织，加入RIPA裂解液后使用组织研磨仪研磨组织，经过BCA法测定血清蛋白并配平后，制备蛋白样品。将蛋白样品加入PAGE凝胶中并加适当电压电泳，使用合适大小的PVDF膜，于甲醇中激活后，依次将海绵垫、厚滤纸、凝胶、PVDF膜、滤纸、海绵垫置于转膜液中，并在冰浴下200mA恒流转膜1h。结束后，将含有蛋白质的PVDF膜置于10％脱脂牛奶中，摇床上封闭本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.DSC2作为肥厚性心肌病生物标志物在制备诊断肥厚性心肌病的产品的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品通过检测受试者的血清样品中DSC2表达含量进行肥厚性心肌病的早期诊断或确定肥厚性心肌病的严重程度。3.检测DSC2表达含量的试剂在制备诊断肥厚性心肌病的产品中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述产品包括试剂盒、芯片或试纸条。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：龚惠，戴宇翔，葛均波，邹云增，潘乐，李军，金可嘉，李剑萱，邹妍，林金钟，
申请(专利权)人：复旦大学附属中山医院，
类型：发明
国别省市：