抗犬细小病毒VP2蛋白抗体及其制备方法和用途技术

本发明专利技术属于免疫学领域和分子病毒学的技术领域，公开了一种抗犬细小病毒VP2蛋白抗体及其制备方法和用途。一种抗犬细小病毒VP2蛋白抗体及或抗原结合片段包括：重链可变区CDR1～3的氨基酸序列如SEQ ID NO:1～3所示、轻链可变区CDR1～3的氨基酸序列如SEQ ID NO:4～6所示的第一抗体或其抗原结合片段，重链可变区CDR1～3的氨基酸序列如SEQ ID NO:7～9所示、轻链可变区CDR1～3的氨基酸序列如SEQ ID NO:10～12所示的第二抗体或其抗原结合片段。本发明专利技术提供的抗体或其抗原结合片段中，第一抗体、第二抗体与犬细小病毒VP2蛋白均具有强结合能力，两种抗体配合使用能够不受其他病毒及药物的干扰，特异性识别犬细小病毒的主流变异株，使用其作为犬细小病毒的检测物质，可实现对于犬细小病毒高准确度且高效的检测。犬细小病毒高准确度且高效的检测。犬细小病毒高准确度且高效的检测。

【技术实现步骤摘要】
抗犬细小病毒VP2蛋白抗体及其制备方法和用途


[0001]本专利技术属于免疫学领域和分子病毒学的
，尤其涉及一种抗犬细小病毒VP2蛋白抗体及其制备方法和用途。

技术介绍

[0002]犬细小病毒病，又称为犬传染性出血性肠炎，是由犬细小病毒(CPV)感染引起的急性传染病，犬只感染CPV后会出现出血性肠炎、心肌炎、白细胞减少以及脱水等症状，尤其是幼犬的肠胃道感染症状尤为严重。CPV病毒的传染性强、病死率高，对犬只的健康造成了严重影响，给宠物饲养行业造成了巨大的经济损失。
[0003]CPV属于细小病毒科细小病毒属，是一种单股负链DNA病毒，在电镜下呈圆形或六边形，无囊膜包被，结构紧凑，对于外界物理环境的刺激具有很强的抵抗能力。CPV基因组全长约为5200bp，包括两个开放阅读框(ORF)，第一个ORF编码NS1和NS2两种非结构蛋白、第二个ORF编码VP1和VP2两种结构蛋白。其中，VP2蛋白是犬细小病毒衣壳中最丰富的结构蛋白，也是犬细小病毒最主要的抗原决定簇，决定了病毒的组织嗜性和宿主范围，能够诱导机体产生中和抗体。
[0004]目前，临床上最常使用胶体金试纸法对CPV进行检测，该方法仅需将采集的样品稀释后滴加至试纸上等待结构即可，具有操作简便和结果显现快的优点。但是，受到所使用到的抗CPV抗体的特异性和灵敏度影响，市面上的CPV胶体金试纸出现假阳性的概率、CPV潜伏初期无法检出阳性的概率以及对CPV变异株无法检出阳性的概率高，具有较大的局限性。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是为了实现对犬细小病毒的高灵敏度和高特异性的快速检测，提供了一种抗犬细小病毒VP2蛋白抗体及其制备方法和用途。
[0006]第一方面，本专利技术提供的抗犬细小病毒VP2蛋白抗体或其抗原结合片段采用以下的技术方案：一种抗犬细小病毒VP2蛋白抗体或其抗原结合片段，其特征在于：包括第一抗体或其抗原结合片段和第二抗体或其抗原结合片段；
[0007]所述第一抗体或其抗原结合片段中，重链可变区CDR1～3的氨基酸序列如SEQ ID NO:1～3所示或者是与SEQ ID NO:1～3所示序列具有至少90％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，轻链可变区CDR1～3的氨基酸序列如SEQ ID NO:4～6所示或者是与SEQ ID NO:4～6所示序列具有至少90％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列；
[0008]所述第二抗体或其抗原结合片段中，重链可变区CDR1～3的氨基酸序列如SEQ ID NO:7～9所示或者是与SEQ ID NO7～9所示序列具有至少90％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，轻链可变区CDR1～3的氨基酸序列如SEQ ID NO:10～12所示或者是与SEQ ID NO:10～12所示序列具有至少90％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列。
[0009]在一些具体的实施方式中，所述第一抗体或其抗原结合片段中，重链可变区氨基
酸序列如SEQ ID NO:13所示或者是与SEQ ID NO:13所示序列具有至少90％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:14所示或者是与SEQ ID NO:14所示序列具有至少90％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列。
[0010]在一些具体的实施方式中，所述第二抗体或其抗原结合片段中，重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:15所示或者是与SEQ ID NO:15所示序列具有至少90％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示或者是与SEQ ID NO:16所示序列具有至少90％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列。
[0011]在一些具体的实施方式中，所述第一抗体或其抗原结合片段中，重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:17所示或者是与SEQ ID NO:17所示序列具有至少70％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，轻链恒定区的重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:18所示或者是与SEQ ID NO:18所示序列具有至少70％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列。
[0012]在一些具体的实施方式中，所述第二抗体或其抗原结合片段中，重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:19所示或者是与SEQ ID NO:19所示序列具有至少70％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，轻链恒定区的重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:20所示或者是与SEQ ID NO:20所示序列具有至少70％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列。
[0013]在一些具体的实施方式中，所述第一抗体或其抗原结合片段选自Fab片段、Fab
’
片段、F(ab
’
)2片段、Fv片段、ScFv片段、dAb片段、双抗体、人源化抗体、嵌合抗体、单克隆抗体和多克隆抗体中的一种或多种。
[0014]在一些具体的实施方式中，所述第二抗体或其抗原结合片段选自Fab片段、Fab
’
片段、F(ab
’
)2片段、Fv片段、ScFv片段、dAb片段、双抗体、人源化抗体、嵌合抗体、单克隆抗体和多克隆抗体中的一种或多种。
[0015]第二方面，本专利技术提供的核酸分子采用以下的技术方案：
[0016]一种核酸分子，所述核酸分子编码上述的抗犬细小病毒VP2蛋白抗体或其抗原结合片段。
[0017]在一些具体的实施方式中，所述核酸分子包括核苷酸序列如SEQ ID NO:21～24所示的片段，或者是与SEQ ID NO:21～24所示序列完全互补或在中度至高度严格条件下杂交的片段。
[0018]第三方面，本专利技术提供的细胞采用以下的技术方案：一种细胞，所述细胞分泌上述的抗犬细小病毒VP2蛋白抗体或其抗原结合片段。
[0019]第四方面，本专利技术提供的制备上述抗犬细小病毒VP2蛋白抗体或其抗原结合片段的方法采用以下的技术方案：一种制备抗犬细小病毒VP2蛋白抗体及或抗原结合片段的方法，将上述细胞在适合所述抗犬细小病毒VP2蛋白抗体或其抗原结合片段表达的培养条件下进行表达。
[0020]第五方面，本专利技术提供的试剂盒采用以下的技术方案：一种试剂盒，包括上述抗犬细小病毒VP2蛋白抗体或其抗原结合片段、上述核酸分子和/或上述细胞。
[0021]第六方面，本专利技术提供了上述抗犬细小病毒VP2蛋白抗体或其抗原结合片段和/或上述试剂盒在犬细小病毒非诊断目的检测中的应用。
NO:18所示或者是与SEQ ID NO:18所述序列具有至少70％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，变体序列与SEQ ID NO:13所示序列的同源性可以是70％、75％、78％、80％、84％、88％、90％、95％、100％或它们中间的任意值。
[0032]本专利技术中，第二抗体或其抗原结合片段中决定与犬细小病毒VP2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗犬细小病毒VP2蛋白抗体及或抗原结合片段，其特征在于：包括第一抗体或其抗原结合片段和第二抗体或其抗原结合片段；所述第一抗体或其抗原结合片段中，重链可变区CDR1～3的氨基酸序列如SEQ ID NO:1～3所示或者是与SEQ ID NO:1～3所示序列具有至少90％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，轻链可变区CDR1～3的氨基酸序列如SEQ ID NO:4～6所示或者是与SEQ ID NO:4～6所示序列具有至少90％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列；所述第二抗体或其抗原结合片段中，重链可变区CDR1～3的氨基酸序列如SEQ ID NO:7～9所示或者是与SEQ ID NO7～9所示序列具有至少90％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，轻链可变区CDR1～3的氨基酸序列如SEQ ID NO:10～12所示或者是与SEQ ID NO:10～12所示序列具有至少90％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列。2.根据权利要求1所述的抗犬细小病毒VP2蛋白抗体或其抗原结合片段，其特征在于：所述第一抗体或其抗原结合片段中，重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:13所示或者是与SEQ ID NO:13所示序列具有至少90％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:14所示或者是与SEQ ID NO:14所示序列具有至少90％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列；任选的，所述第二抗体或其抗原结合片段中，重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:15所示或者是与SEQ ID NO:15所示序列具有至少90％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示或者是与SEQ ID NO:16所示序列具有至少90％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列。3.根据权利要求1所述的抗犬细小病毒VP2蛋白抗体或其抗原结合片段，其特征在于：所述第一抗体或其抗原结合片段中，重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:17所示或者是与SEQ ID NO:17所示序列具有至少70％同源性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，轻链恒定区的重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:18所示或者是与SEQ ...

【专利技术属性】
技术研发人员：张涛，林奕婷，邹柳，周国栋，张松，盛布恩，
申请(专利权)人：领地动物诊疗科技厦门有限公司，
类型：发明
国别省市：