一种醋酸菌的快速扩培工艺制造技术

本申请提供一种醋酸菌的快速扩培工艺，涉及菌种培养技术领域。该快速扩培工艺包括：将经实验室培养的醋酸菌菌种转移至种子扩培罐培养时，向液体培养基中添加发酵果酒进行果酒液体培养基的摇瓶培养。通过添加果酒作为底物培养，可让醋酸菌提前适应扩培底物的切换，适应实验室培养至车间线上扩培罐培养的环境切换，大大减少了因扩培底物以及生长环境的同时变化，致使菌种适应期延长甚至扩培失败情况的发生，缩短了车间线上菌种扩培的延滞期，提高了扩培的成功率，使得醋酸菌在车间线上的扩培阶段能快速生长繁殖，提高了果醋工艺化过程中的生产性能。的生产性能。的生产性能。

【技术实现步骤摘要】
一种醋酸菌的快速扩培工艺


[0001]本申请涉及菌种培养
，尤其涉及一种醋酸菌的快速扩培工艺。

技术介绍

[0002]菌种是发酵工业化生产的核心，而在果醋的工业化生产中，需要使用大量的醋酸菌来进行发酵，这就需要将醋酸菌菌种逐级扩大培养，以提供充足的菌源用于生产制备果醋。果醋生产所用的醋酸菌一般使用固态斜面法进行保藏，此种保藏方法的保存期短，需定期接种至新斜面以继续传代，而频繁的传代会使醋酸菌退化，这样制成的果醋风味稳定性就很难得到保证，生产进程也会受到影响。另一方面，醋酸菌扩培过程的控制与菌种传代活性也有着直接的关联，同时也会影响后续发酵的生产性能。
[0003]一般来说，在将醋酸菌菌种逐级扩大培养时，醋酸菌斜面菌种接种至液体培养基，经摇瓶扩大培养后，再转接至车间线上的扩培罐进行逐级扩培的过程中，由于生长环境条件的变化，醋酸菌在线上扩培罐中的适应期较长，甚至扩培失败的几率也高。现有的专利中提到：采用酒醋对扩培罐进行蒸汽酸蒸，可缩短种子进入新环境后的延滞期，但此种方式存在一定缺陷，酒醋中的糖类物质经过高温会焦糖化而附着罐壁，能耗高且设备清洗成本也会相应提高，并且无法评估焦糖化反应所产生的物质对醋酸菌活性和果醋成品风味的影响。
[0004]因此，急需开发一种醋酸菌的扩大培养工艺，更好地满足果醋工业化生产需求。

技术实现思路

[0005]为克服现有技术中的不足，本申请的目的在于提供一种醋酸菌的快速扩培工艺，通过在实验室的液体培养基中添加发酵果酒作为底物进行摇瓶培养，可让醋酸菌提前适应扩培底物的切换，大大缩短了车间线上生产菌种的延滞期以及提高了扩培的成功率，使醋酸菌在车间线上的扩培阶段能快速生长繁殖，提高了生产性能。
[0006]为实现以上目的，本申请的技术方案如下：
[0007]本申请提供的醋酸菌的快速扩培工艺，包括：
[0008]将经实验室培养的醋酸菌菌种转移至种子扩培罐培养时，向液体培养基中添加发酵果酒进行果酒液体培养基摇瓶培养。
[0009]可选地，所述快速扩培工艺满足以下条件中的至少一个：
[0010]a.所述液体培养基包括：糖源10g/L
‑
35g/L、酵母提取粉10g/L
‑
35g/L和无水乙醇20g/L
‑
45g/L；
[0011]b.所述液体培养基的pH为5.5
‑
6.0；
[0012]c.所述发酵果酒的糖度为7.5
°
Bx
‑
9.0
°
Bx，酒度为7.0％vol
‑
8.5％vol；
[0013]d.所述发酵果酒的添加量为100g/L
‑
150g/L；
[0014]e.所述果酒液体培养基的糖度3.9
°
Bx
‑
4.7
°
Bx，酒度为3.0％vol
‑
5.0％vol；
[0015]f.所述果酒液体培养基摇瓶培养时，还包括：使用摇床提供溶氧，所述摇床的转速
为180rpm
‑
250rpm；
[0016]g.所述果酒液体培养基摇瓶培养的温度为25℃
‑
28℃；
[0017]h.所述种子扩培罐的扩培底物中包括所述发酵果酒；
[0018]i.所述种子扩培罐的扩培底物的糖度为4.5
°
Bx
‑
5.5
°
Bx，酒度为4.0％vol
‑
5.5％vol。
[0019]可选地，所述种子扩培罐培养之后，还包括：进行一级扩培罐培养和二级扩培罐培养；
[0020]所述一级扩培罐和所述二级扩培罐的扩培底物中各自独立地包括车间原酒，所述车间原酒中的残余糖含量低于所述发酵果酒的残余糖含量。
[0021]进一步优选地，所述快速扩培工艺还满足以下条件中的至少一个：
[0022]j.进行所述种子扩培罐培养之前，包括：将所述种子扩培罐、所述一级扩培罐和所述二级扩培罐进行罐体空消，之后加入无菌原醋至少浸泡12h，排空后再压入所述扩培底物；
[0023]k.所述种子扩培罐培养的温度为25℃
‑
30℃，风量为0.08vvm
‑
0.15vvm；
[0024]l.所述车间原酒的糖度为6.0
°
Bx
‑
8.0
°
Bx，酒度为8.0％vol
‑
10.0％vol；
[0025]m.所述一级扩培罐的扩培底物中的糖度为3.2
°
Bx
‑
4.5
°
Bx，酒度为4.0％vol
‑
5.5％vol；
[0026]n.所述一级扩培罐培养的温度为25℃
‑
30℃，风量为0.08vvm
‑
0.15vvm；
[0027]o.所述二级扩培罐的扩培底物中的糖度为3.2
°
Bx
‑
4.5
°
Bx，酒度为5.0％vol
‑
6.5％vol；
[0028]p.所述二级扩培罐培养的温度为30℃
‑
38℃，风量为0.08vvm
‑
0.15vvm。
[0029]优选地，所述快速扩培工艺还包括：
[0030]依次经过所述果酒液体培养基摇瓶培养、所述种子扩培罐培养、所述一级扩培罐培养之后，得到第0代醋酸菌菌液，将一部分的所述第0代醋酸菌菌液转移至所述种子扩培罐中进行传代培养，得到第1代醋酸菌菌液，另一部分转移至所述二级扩培罐培养；
[0031]所述第1代醋酸菌菌液依次经过所述种子扩培罐的所述传代培养和所述一级扩培罐培养之后，一部分菌液再次转移至所述种子扩培罐中进行回接传代培养，得到第2代醋酸菌菌液，另一部分菌液转移至所述二级扩培罐培养；
[0032]循环进行所述回接传代培养，得到第3
‑
15代醋酸菌菌液。
[0033]进一步优选地，进行所述传代培养和所述回接传代培养时，还包括：
[0034]所述种子扩培罐、所述一级扩培罐和所述二级扩培罐中的扩培底物中各自独立地包括所述车间原酒；
[0035]所述种子扩培罐、所述一级扩培罐中的温度为25℃
‑
30℃，所述二级扩培罐中的温度为30℃
‑
38℃。
[0036]进一步优选地，所述快速扩培工艺还包括：
[0037]选取所述一级扩培罐培养后的第2
‑
5代醋酸菌菌液，放置在0℃
‑
4℃下进行保存，之后控制在20天之内升温活化，并重新投入所述种子扩培罐中进行扩大培养。
[0038]可选地，所述经果酒液体培养基摇瓶培养之前，还包括：在固体斜面培养基中进行培养本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种醋酸菌的快速扩培工艺，其特征在于，包括：将经实验室培养的醋酸菌菌种转移至种子扩培罐培养时，向液体培养基中添加发酵果酒进行果酒液体培养基摇瓶培养。2.如权利要求1所述的快速扩培工艺，其特征在于，满足以下条件中的至少一个：a.所述液体培养基包括：糖源10g/L
‑
35g/L、酵母提取粉10g/L
‑
35g/L和无水乙醇20g/L
‑
45g/L；b.所述液体培养基的pH为5.5
‑
6.0；c.所述发酵果酒的糖度为7.5
°
Bx
‑
9.0
°
Bx，酒度为7.0％vol
‑
8.5％vol；d.所述发酵果酒的添加量为100g/L
‑
150g/L；e.所述果酒液体培养基的糖度3.9
°
Bx
‑
4.7
°
Bx，酒度为3.0％vol
‑
5.0％vol；f.所述果酒液体培养基摇瓶培养时，还包括：使用摇床提供溶氧，所述摇床的转速为180rpm
‑
250rpm；g.所述果酒液体培养基摇瓶培养的温度为25℃
‑
28℃；h.所述种子扩培罐的扩培底物中包括所述发酵果酒；i.所述种子扩培罐的扩培底物的糖度为4.5
°
Bx
‑
5.5
°
Bx，酒度为4.0％vol
‑
5.5％vol。3.如权利要求1所述的快速扩培工艺，其特征在于，所述种子扩培罐培养之后，还包括：进行一级扩培罐培养和二级扩培罐培养；所述一级扩培罐和所述二级扩培罐的扩培底物中各自独立地包括车间原酒，所述车间原酒中的残余糖含量低于所述发酵果酒的残余糖含量。4.如权利要求3所述的快速扩培工艺，其特征在于，还满足以下条件中的至少一个：j.进行所述种子扩培罐培养之前，包括：将所述种子扩培罐、所述一级扩培罐和所述二级扩培罐进行罐体空消，之后加入无菌原醋至少浸泡12h，排空后再压入所述扩培底物；k.所述种子扩培罐培养的温度为25℃
‑
30℃，风量为0.08vvm
‑
0.15vvm；l.所述车间原酒的糖度为6.0
°
Bx
‑
8.0
°
Bx，酒度为8.0％vol
‑
10.0％vol；m.所述一级扩培罐的扩培底物中的糖度为3.2
°
Bx
‑
4.5
°
Bx，酒度为4.0％vol
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：李炜炤，徐晓怡，熊贤平，刘瑞结，
申请(专利权)人：天地壹号饮料股份有限公司，
类型：发明
国别省市：