一种玉米须葡聚糖及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种玉米须葡聚糖，结构式为[

【技术实现步骤摘要】
一种玉米须葡聚糖及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及药物领域，具体涉及一种玉米须葡聚糖及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]目前，临床对糖尿病的治疗除注射胰岛素外，主要是口服降血糖药物，其中一部分是利用化学合成降血糖药物，但是具有开发难度大、易产生不良反应的缺点，另外则是从天然产物中提取降血糖活性成分。近年来，来源于植物的天然多糖由于安全性高且药理活性众多，逐渐成为国内外生物大分子研究领域的热点。
[0003]玉米须(corn silk)为禾本科植物玉蜀黍(玉米，Zea mays L.)的花柱和柱头。载于各版药典，药典记载其有利尿消肿，清肝利胆的功效。玉米须聚糖是玉米须的重要成分构成之一，通常被认为具有高半乳糖醛酸(HG)和鼠李糖乳糖醛酸(RGI和RGII)。
[0004]目前报道的玉米须聚糖骨架类型为(1
→
6)
‑
α
‑
D
‑
葡萄糖
‑
(1
→
3)
‑
α
‑
L
‑
阿拉伯糖，(1
→
4)
‑
β
‑
D
‑
半乳糖和(1
→
3,5)
‑
β
‑
D
‑
甘露糖，以β
‑
D
‑
木糖和α
‑
L
‑
鼠李糖为末端单元。如何进一步从玉米须中提取更具有针对性的多糖成分以及如何对新的多糖成分进行性能改进，对降血糖药物和功能食品的开发与研究具有重要的意义。

技术实现思路

[0005]本专利技术旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题之一，为此，本专利技术提供了一种玉米须葡聚糖及其制备方法和应用。
[0006]根据本专利技术的一个方面，提供了一种玉米须葡聚糖，结构式如下：[
→
4)
‑
β
‑
D
‑
Glcp
‑
(1
→
]n
，其中n为6
‑
60，分子量范围1
‑
9.8kDa。
[0007]根据本专利技术的另一个方面，提供了一种制备以上所述玉米须葡聚糖的方法，包括：提取玉米须中的有效成分，获得提取液；将所述提取液经浓度为30
‑
90％的乙醇沉淀，获得玉米须粗聚糖；将溶解后的所述玉米须粗聚糖依次经生物膜透析、离子交换树脂柱和HPLC
‑
ELSD分离纯化，获得所述玉米须葡聚糖。
[0008]优选地，提取玉米须中的有效成分，包括：经沸水提取所述玉米须后过滤，获得滤液；60℃减压浓缩所述滤液，获得浓缩液；向所述浓缩液中加入氯仿和正丁醇的混合溶液，离心，获得上清液；50℃减压浓缩所述上清液，获得所述提取液。
[0009]根据本专利技术的再一个方面，提供了一种制备葡聚糖复合物的方法，包括：将A溶液与B溶液按照特定比例混匀；所述A溶液含有如以上所述的玉米须葡聚糖；所述B溶液含有玉米黄素。
[0010]优选地，所述玉米须葡聚糖通过以下步骤制备：提取玉米须中的有效成分，获得提取液；将所述提取液经浓度为30％或50％的乙醇沉淀，获得玉米须粗聚糖；将溶解后的所述玉米须粗聚糖依次经生物膜透析、离子交换树脂柱和HPLC
‑
ELSD分离纯化，获得所述玉米须葡聚糖。
[0011]优选地，所述特定比例为1:2
‑
10，所述A溶液中所述玉米须葡聚糖的浓度为2.5
‑
5mg/ml，所述B溶液中所述玉米黄素的浓度为2mg/ml。
[0012]优选地，将所述A溶液与所述B溶液按照特定比例混匀后，所述葡聚糖复合物的终浓度为100μg/ml或200μg/ml。
[0013]优选地，所述A溶液与所述B溶液的溶剂均为DMSO纯水溶液。
[0014]优选地，所述DMSO纯水溶液的浓度为5％。
[0015]根据本专利技术的又一个方面，提供了一种以上所述方法制备的葡聚糖复合物在制备降血糖药物或功能食品中的应用。
[0016]具体而言，制备玉米须葡聚糖的方法包括：取玉米须新鲜或干燥药材，进行粉碎后，以去离子水回流提取，过滤后浓缩水提液并用Sevage方法(氯仿：正丁醇4:1)除蛋白，共三次，得到的浓缩液，离心去除滤渣，即得玉米须粗聚糖(CSGC)水溶液。所得水溶液用乙醇依次调节到30％，50％，70％，90％乙醇浓度，静置，离心得到玉米须分级聚糖沉淀物(CSGC30，CSGC50，CSGC70和CSGC90)，沉淀物依次加适量去离子水复溶，分别冷冻干燥，后经总糖(根据2020版药典规定采用苯酚
‑
硫酸显色法测定糖含量)/总蛋白(根据2020版药典规定采用BCA法测定样品中蛋白含量)含量测定，确定聚糖粗提物不含蛋白及核酸类成分为纯粗聚糖。粗聚糖利用离子交换树脂柱(DEAE52，水)，生物膜透析(MWCO:100000
‑
1000Da)及凝胶柱(Sephadex G
‑
75，Sephacryl S
‑
200)层析，结合HPLC
‑
ELSD检测合并分离纯化得到所要系列均一葡聚糖。
[0017]本专利技术相对于现有技术，具有以下有益效果。
[0018]本专利技术从玉米须中分离出了玉米须葡聚糖[
→
4)
‑
β
‑
D
‑
Glcp
‑
(1
→
]n
，其中n为6
‑
60，分子量范围1
‑
9.8kDa。该葡聚糖与玉米黄素复合形成的葡聚糖复合物，在小鼠胰岛细胞中通过稳定胰岛素并提高其活力，产生了比单独使用玉米黄素强2
‑
5倍的降血糖活性，对研究新型降血糖药物或者功能性食品具有重要意义。
附图说明
[0019]此处所说明的附图用来提供对本专利技术的进一步理解，构成本申请的一部分，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。在附图中:
[0020]图1示出了CSGs纯品HPLC图谱；
[0021]图2示出了CSGs纯品PMP
‑
HPLC图谱；
[0022]图3示出了CSG
‑
1纯品IR图谱；
[0023]图4示出了CSG
‑
1纯品UV图谱；
[0024]图5示出了CSG
‑
1纯品NMR图谱；
[0025]图6示出了CSGs纯品与玉米黄素自组装ITC图谱；以及
[0026]图7示出了CSGs与玉米黄素形成的复合物的降血糖活性结果。
具体实施方式
[0027]以下列举的实施例是为了让本领域的技术人本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种玉米须葡聚糖，其特征在于，结构式如下：[
→
4)
‑
β
‑
D
‑
Glcp
‑
(1
→
]
n
其中n为6
‑
60，分子量范围1
‑
9.8kDa。2.一种制备如权利要求1所述的玉米须葡聚糖的方法，其特征在于，包括：提取玉米须中的有效成分，获得提取液；将所述提取液经浓度为30
‑
90％的乙醇沉淀，获得玉米须粗聚糖；将溶解后的所述玉米须粗聚糖依次经生物膜透析、离子交换树脂柱和HPLC
‑
ELSD分离纯化，获得所述玉米须葡聚糖。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，提取玉米须中的有效成分，包括：经沸水提取所述玉米须后过滤，获得滤液；60℃减压浓缩所述滤液，获得浓缩液；向所述浓缩液中加入氯仿和正丁醇的混合溶液，离心，获得上清液；50℃减压浓缩所述上清液，获得所述提取液。4.一种制备葡聚糖复合物的方法，其特征在于，包括：将A溶液与B溶液按照特定比...

【专利技术属性】
技术研发人员：张伟，姜志宏，杨柳，王彩云，
申请(专利权)人：澳门科技大学，
类型：发明
国别省市：