治疗呼吸道分泌过多的组合物和方法技术

本发明专利技术一般涉及治疗肺部疾病的领域。更具体地，本发明专利技术涉及通过施用表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）信号途径抑制剂和白细胞介素－１３（ＩＬ－１３）信号途径抑制剂组合来治疗呼吸道分泌过多，及其组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术受政府支持，在NHLBI资助的POl HL29594下完成。政府在 本专利技术中具有某些权利。专利
本专利技术一般涉及用于治疗呼吸道疾病的组合物和方法。背景呼吸道分泌过多是呼吸道疾病的特征，包括慢性阻塞性肺疾病 (COPD)、嚢性纤维化和哮喘。在患分泌过多的个体中，粘液堆积在呼 吸道中并引起呼吸道阻塞。沿所述呼吸道上皮排列的呼吸道粘膜下腺和杯 形细胞分泌粘液一一由水、碳7K化合物、蛋白质和脂质组成的粘性的、粘 弹性凝胶。在健康个体中，粘液是吸入的外源颗粒和病原体的第一道防御 屏障。粘液捕获这些颗粒和病原体并促进对它们的清除，同时也预防组织 脱水。含有许多杯形细胞的小呼吸道及外周呼吸道和那些不能通过咳嗽清 除的尤其易受粘液堆积和粘液逐渐阻塞。大量个体患有呼吸道分泌过多疾 病，因为它和许多呼吸道疾病相关，包括COPD、嚢性纤维化和哮喘及呼 吸系统感染，包括病毒性支气管炎和细支气管炎。在美国，大约1.42亿人 已被诊断患有COPD。嚢性纤维化影响超过30，000美国人并且哞喘影响1.7 亿美国人。皮质类固醇、抗胆碱能药、抗生素疗法、支气管舒张剂(例如曱基黄嘌呤)、 具有强p2肾上腺素能刺激性质的拟交感神经药、气溶胶送递"粘液溶解" 剂(例如水、高渗盐溶液)和口服施用祛痰剂(例如愈创甘油醚)。尤其关于嚢性纤维化，最近的方法已施用DNA酶来减少富含DNA的粘液或痰 的粘度，以更容易地从呼吸道中清除所述粘液(Shak等人，Proc. Natl. Acad, 87:9188-9192， 1990; Hubbard等人，N. Engl. J. Med" 326:812， 1991)。除 了药疗法，由拍击法、振动疗法和引流法组成的胸部理疗也用于从呼吸道 中清除粘液。作为最后的依靠手段，肺移植对那些患有严重肺疾病的人可 以是个选择。许多上面描述的药疗法具有严重的副作用。例如，吸入的皮 质类固醇能引起真菌性口炎(口部酵母感染)、咳嗽、或嘶哑并且全身的 皮质类固醇具有甚至更严重的副作用，如性发育延迟、月经周期改变、体 重增加及血糖增加(糖尿病)。曱基黄嘌呤的副作用包括严重的恶心、震 颤、肌肉颤搐、抽搐和心脏跳动不规则。例如在图28中显示的是病毒诱导的依赖EGFR和IL-13的途径控制 上皮宿主和重塑的图解。受体二聚化和受体酪氨酸激酶磷酸化作用激活 EGFR导致三条途径的激活(1)募集Ral，随后激活c-Src导致Statl 和Stat3的激活；(2)募集Shc/Grb2，接着激活Sos、 Ras和c-Raf导致 MEK1/2激活ERK1/2;和(3 )募集Gabl,接着激活PI3K导致产生磷脂 酰肌醇-3，4，5-磷酸(PI-3，4，5-P3 ),激活PDK1/2并然后激活Akt，该Akt 使促凋亡因子(例如，Bad)失活。IL-13信号转导也能激活ERK1/2和 PI3K及Stat6， ERK1/2、 PI3K和Stat6中的每一个促进基因(CLCA和 MUC )上调，促使纤毛转分化为杯形细胞。IL-13信号转导激活依赖IRS1/2 的至ERK1/2和Stat6的级联，ERK1/2和Stat6中的每一个促进基因(CLCA 和MUC)的上调，促使纤毛转分化为杯形细胞。在生理条件下，这些途 径可(与Statl的依赖IFN的激活结合)导致免受病毒感染，但是如果在 敏感的遗传背景下存在持续激活，该相同的途径可导致纤毛细胞增生和杯 形细胞组织转化。合理使用特异性抑制剂，例如EGFR和IL-13受体阻断 剂，可完全恢复正常的上皮结构。已表明在大鼠中，上皮生长因子受体(EGFR)系统被其配体激活导 致在呼吸道上皮细胞中黏蛋白合成及杯形细胞组织转化(Takeyama等人， Proc. Natl. Acad. Sci.， 96:3081-3086， 1999 )。此外，已表明健康个体的呼吸道中EGFR的表达稀少，但是所述受体在哞喘个体中表达(Burgel和 Nadel， Thorax, 59:992-996， 2004 )。刺激呼吸道上皮中EGFR表达的因子 或途径为肿瘤坏死因子a (TNFa )途径(Takeyama等人，Proc. Natl. Acad. Sci.， 96:3081-3086， 1999) 。 Nadel等人在美国专利号6,270,747中公开通过 施用EGFR拮抗物来治疗分泌过多。白细胞介素-13 (IL-13)信号途径与呼吸道重塑和分泌过多密切相关。 发现IL-13的诱斜受体(sIL-13Ra2-Fc )在小鼠中抑制变应原诱导的杯形 细胞的形成(Wills-Karp等人，Science, 282:2258-2261 )。已表明IL-13直 接驱动呼吸道上皮细胞中黏蛋白基因的表达，该呼吸道上皮细胞在生理条 件并在体内培养(Laoukili等人，J. Clin. Invest, 108:1817-1824， 2001 ; Kondo等人，Am. J. Respir. Cell Mol. Biol" 27:536-541 ， 2002 )。也已经报 道IL-13刺激TGFa从人类呼吸上皮细胞膜上释放，该TGFa结合到EGFR 上并激活EGFR (Booth等人，Am. J. Respir. Cell Mol. Biol" 25: 739-743， 2001 ) 。 IL-13向大鼠肺的气管内滴注通过复杂的机制引起杯形细胞的组 织转化并增加l^蛋白产生，IL-13通过所述机制诱导产生IL-8，导致嗜中 性粒细胞募集(Shim等人，Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol.， 280: L134-L140, 2001)。专利技术概述本专利技术的多个方面提供用于呼吸道分泌过多的改进治疗。呼吸道分泌 过多的发病原理涉及EFGR和IL-13信号途径，两者都在杯形细胞形成中 起作用。因此，通过抑制EFGR和IL-13信号途径，所述呼吸道上皮可更 接近它最初的结构。简单而言，因此，本专利技术涉及治疗个体呼吸道分泌过多的方法，所述方法包括施用EGFR信号途径的抑制剂和IL-13信号途径的抑制剂。本专利技术还涉及治疗呼吸道分泌过多的组合物，该组合物包含EGFR信号途径的抑制剂和IL-13信号途径的抑制剂和药学上可接受的载体。 其他目的和特征将在下文中部分地明确并部分地指出。附图简述附图说明图1A、 1B、 1C、 1D、 1E和1F为C57BL/6J小鼠呼吸道切片的代表 性显微照片，其中用SeV或等量UV灭活的SeV (SeV-UV)接种后21天 获得所述C57BL/6J小鼠切片，然后进行EGFR和磷酸-EGFR ( p-EGFR) 免疫染色并用50倍抗原过剩竟争。标尺-20jim。在实施例1中进一步描 述方法学。图2A、 2B、 2C、 2D、 2E、 2F、 2G、 2H和21为小鼠呼吸道切片的代 表性显微照片，该切片在用SeV接种后21天获得，然后进行EGFR、卩 微管蛋白、CCSP和MUC5AC单独和组合的免疫荧光染色。用抗CY3的 抗体(红色荧光)检测主要的抗EGFR抗体结合，用抗FITC的抗体(绿 色荧光)检测其他。标尺-20jim。在实施例1中进一步描述方法学。图3A、 3B、 3C和3D为本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于治疗呼吸道分泌过多的组合物，其包含ＥＧＦＲ信号途径的抑制剂、ＩＬ－１３信号途径的抑制剂和药学上可接受的载体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：MJ霍尔茨曼，
申请(专利权)人：华盛顿大学，
类型：发明
国别省市：US[美国]