一种同时检测4种烟草土传病原菌的多重PCR引物组、试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种同时检测4种烟草土传病原菌的多重PCR引物组。属于基因检测技术领域。该引物组可独立对待测目的基因进行PCR扩增，实现了烟草青枯病、烟草空胫病、烟草黑胫病、烟草根腐病的同时检测，且该引物组特异性强、灵敏度高、可靠性强、实用性好。本发明专利技术还提供了包括上述引物组的检测试剂盒及使用方法。采用该检测试剂盒对病原菌进行检测，操作简便快速3.5h内即可完成对4种烟草土传病原菌检测，效率高、成本低，适合大批量样品多病害检测，对烟草土传病害的发生、流行监控具有重要意义。流行监控具有重要意义。流行监控具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一种同时检测4种烟草土传病原菌的多重PCR引物组、试剂盒及检测方法


[0001]本专利技术涉及基因检测
，更具体的说是涉及一种同时检测4种烟草土传病原菌的多重PCR引物组、试剂盒及检测方法。

技术介绍

[0002]烟草是我国经济作物之一，市场规模庞大，随着烟草行业的发展和烟草种植面积的扩大，烟草病原菌，如烟草青枯病菌、空胫病菌菌、黑胫病菌以及根腐病菌等土传病原菌的侵害，对烟草的产量与品质产生了严重影响，严重制约着我国烟草产业的发展。
[0003]烟草青枯病、烟草空胫病、烟草黑胫病、烟草根腐病分别由青枯劳尔氏菌、软腐果胶杆菌、烟草疫霉和尖孢镰刀菌引起，以上4种土传性病害，发病早期隐蔽性强，待症状显现时已至发病末期，难以防治，并且这些病害易发生复合侵染，症状极其相似，增加了病害诊断和防治的难度。
[0004]现阶段，随着分子生物学的发展，PCR技术被广泛应用于植物病原菌检测方面，但现有技术针对烟草青枯病、烟草空胫病、烟草黑胫病、烟草根腐病，仅存在单一病原菌PCR检测方法，要想检测多种病原菌，需要进行多次PCR，成本高，效率低，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时检测4种烟草土传病原菌的多重PCR引物组，其特征在于：由烟草青枯病菌引物RsRipNTF3、RsRipNTR3，空胫病菌引物PccTF4、PccTR4，黑胫病菌引物PpRhTF1、PpRhTR1和根腐病菌引物FoP450TF1、FoP450TR1组成，各引物序列如下：RsRipNTF3：5
’‑
GCCGCTCACATCGTCAAGGT
‑3’
SEQ ID NO.1，RsRipNTR3：5
’‑
CGCYGCCAATGAACGACATATC
‑3’
SEQ ID NO.2；PccTF4：5
’‑
CTGGCACTCATTGAAGCACTG
‑3’
SEQ ID NO.3，PccTR4：5
’‑
CTACAGGCTCGGCGATAATCT
‑3’
SEQ ID NO.4；PpRhTF1：5
’‑
GTCGATTATCGCGTTCGAAGTCA
‑3’
SEQ ID NO.5，PpRhTR1：5
’‑
AACCCATCGCTGCCCACAA
‑3’
SEQ ID NO.6；FoP450TF1：5
’‑
TCTAGATGAACAGGGCTGACGC
‑3’
SEQ ID NO.7，FoP450TR1：5
’‑
GTCAGCACTCTTCTATGCCTATAGC
‑3’
SEQ ID NO.8。2.一种同时检测4种烟草土传病原菌的多重PCR检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述多重PCR引物组。3.一种同时检测4种烟草土传病原菌的多重PCR检测试剂盒，其特征在于，包括2
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【专利技术属性】
技术研发人员：王荣波，徐辰生，叶劲松，林伟，刘裴清，林勇，宋江雨，靳婷，翁启勇，
申请(专利权)人：福建省烟草公司南平市公司厦门昶科生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：