一种β-烟酰胺单核苷酸的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种β

【技术实现步骤摘要】
一种
β
‑
烟酰胺单核苷酸的制备方法


[0001]本专利技术涉及核苷酸合成领域，具体涉及一种β
‑
烟酰胺单核苷酸的制备方法。

技术介绍

[0002]β
‑
烟酰胺单核苷酸，又称作NMN，是自然存在的生物活性核苷。由于烟酰胺属于维生素B3，因而NMN属于维生素B族衍生物范畴，广泛参与人体多项生化反应，与免疫、代谢息息相关。NMN是NAD+(Nicotinamide adenine dinucleotide)的前体，其功能也主要通过NAD+体现。随着年龄的增长，NMN和NAD+水平均呈下降趋势，而NAD+代谢产物NAM呈上升趋势。衰老过程中NAD+的下降被认为是导致疾病和残疾的主要原因，如听力和视力丧失，认知和运动功能障碍，免疫缺陷，自身免疫炎症反应失调导致的关节炎、代谢障碍和心血管疾病。因此，补充NMN能够提高体内NAD+含量，从而延缓、改善、防止衰老等，或改善年龄诱导的代谢紊乱、老年疾病等，具有重要意义。
[0003]目前，β
‑
烟酰胺单核苷酸主要的合成方法是，使用四乙酰核糖和烟酰胺或烟酸乙酯作为起始物料，经缩合、脱乙酰保护基、磷酸化和氨解等工艺步骤最终得到β
‑
烟酰胺单核苷酸。但是上述合成β
‑
烟酰胺单核苷酸的反应过程反应流程长，反应时间长，反应效率低，导致存在副反应较多、产品收率低、杂质含量高的缺陷。

技术实现思路

[0004]针对现有技术中存在的问题，本专利技术的目的是提供一种β
‑
烟酰胺单核苷酸的制备方法。
[0005]本专利技术的目的采用以下技术方案来实现：
[0006]一种β
‑
烟酰胺单核苷酸的制备方法，包括如下步骤：
[0007]步骤(1)，称取烟酰胺和四乙酰核糖混合在三氯甲烷内，充分溶解后，加入催化剂进行反应，得到烟酰胺三乙酰核苷的溶液；
[0008]步骤(2)，在烟酰胺三乙酰核苷的溶液内加入有机碱，在搅拌条件下脱乙酰，之后调节反应液的pH为5
‑
6，减压除去溶剂后，得到烟酰胺核苷盐；
[0009]步骤(3)，将烟酰胺核苷盐混合在磷酸三丁酯内，充分溶解后，滴加三氯氧磷，在冰水浴条件下搅拌反应，反应结束后，通入氨气进行氨解，然后经过萃取、提纯和干燥处理后，得到β
‑
烟酰胺单核苷酸。
[0010]优选地，所述步骤(1)中，烟酰胺和四乙酰核糖的摩尔比为1:1.2
‑
1.6。
[0011]优选地，所述步骤(1)中，反应过程是在水浴4
‑
50℃的条件下回流搅拌反应1.5
‑
2.5h。
[0012]优选地，所述步骤(1)中，三氯甲烷的加入量是烟酰胺和四乙酰核糖质量总和的5
‑
6倍。
[0013]优选地，所述步骤(1)中，催化剂为TMSH
‑
PyrPOCs，催化剂加入量是烟酰胺质量的1％
‑
5％。
[0014]优选地，所述TMSH
‑
PyrPOCs根据原料的不同包括TMSCl
‑
PyrPOCs、TMSBr
‑
PyrPOCs、TMSI
‑
PyrPOCs。
[0015]优选地，所述步骤(2)中，有机碱为乙醇钠溶液，浓度是0.1
‑
0.3g/mL。
[0016]优选地，所述步骤(2)中，反应条件为冰水浴，搅拌反应1
‑
2h。
[0017]优选地，所述步骤(3)中，烟酰胺核苷盐和三氯氧磷的摩尔比是1:1.5
‑
2.5，磷酸三丁酯的加入量是烟酰胺核苷盐和三氯氧磷的质量总和的5
‑
6倍。
[0018]优选地，所述步骤(3)中，冰水浴搅拌反应的时间是5
‑
10h。
[0019]优选地，所述步骤(3)中，氨气的通入流量是0.1
‑
0.3L/min，通入时间是1
‑
2h。
[0020]优选地，所述步骤(3)中，萃取是先将反应液倒入蒸馏水内搅拌，然后加入乙酸乙酯继续搅拌，静置分层后除去油相层；提纯是将水相层使用树脂交换法除盐提纯；干燥是真空干燥或冷冻干燥。
[0021]优选地，所述催化剂的制备方法包括：
[0022]S1、称取2,4,6
‑
三羟基
‑
1,3,5
‑
苯三甲醛与氯仿混合在烧瓶内，搅拌均匀后，加入无水硫酸镁作为催化剂，充分混合搅拌，形成第一反应液；
[0023]S2、称取4,6
‑
嘧啶二胺与氯仿混合在烧杯内，充分混合搅拌，形成第二反应液；
[0024]S3、将第二反应液逐滴地加入至不断搅拌的第一反应液内，同时将卤代硅烷TMSH加入其中，滴加完成后，将烧瓶密封，在室内避光阴凉处放置3
‑
5天，烧瓶的内壁生长出大量的晶体，即得到第三反应液；
[0025]S4、将反应瓶摇晃至内壁的晶体脱落，滤出晶体并使用氯仿冲洗至少三次，干燥后，即得到TMSH
‑
PyrPOCs。
[0026]优选地，所述S1的2,4,6
‑
三羟基
‑
1,3,5
‑
苯三甲醛与氯仿的质量体积比是1g：(10
‑
20)mL。
[0027]优选地，所述S1的无水硫酸镁的加入量是2,4,6
‑
三羟基
‑
1,3,5
‑
苯三甲醛质量的2％
‑
6％。
[0028]优选地，所述S2的4,6
‑
嘧啶二胺与氯仿的质量体积比是1g：(15
‑
25)mL。
[0029]优选地，所述S3的第二反应液与第一反应液的体积比是1.25
‑
1.5:1。
[0030]优选地，所述S3的卤代硅烷TMSH包括三甲基氯硅烷TMSCl、三甲基溴硅烷TMSBr、三甲基碘硅烷TMSI中的至少一种。
[0031]优选地，所述S3的卤代硅烷TMSH与所述S1的2,4,6
‑
三羟基
‑
1,3,5
‑
苯三甲醛的摩尔比是1:1
‑
2。
[0032]优选地，所述S4的干燥是在60℃的真空箱内干燥处理。
[0033]本专利技术的有益效果为：
[0034]1、现有合成β
‑
烟酰胺单核苷酸的过程中，都会需要将烟酰胺和四乙酰核糖进行缩合反应生成烟酰胺三乙酰核苷，而该步骤需要催化剂的催化反应，而常用的催化剂有TMSCl、TMSBr、TMSI等卤代硅烷催化剂，该类催化剂的热稳定性较差，所以常常需要在较低的温度下催化反应，因此会出现催化反应过长、反应效率本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种β
‑
烟酰胺单核苷酸的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤(1)，称取烟酰胺和四乙酰核糖混合在三氯甲烷内，充分溶解后，加入催化剂进行反应，得到烟酰胺三乙酰核苷的溶液；步骤(2)，在烟酰胺三乙酰核苷的溶液内加入有机碱，在搅拌条件下脱乙酰，之后调节反应液的pH为5
‑
6，减压除去溶剂后，得到烟酰胺核苷盐；步骤(3)，将烟酰胺核苷盐混合在磷酸三丁酯内，充分溶解后，滴加三氯氧磷，在冰水浴条件下搅拌反应，反应结束后，通入氨气进行氨解，然后经过萃取、提纯和干燥处理后，得到β
‑
烟酰胺单核苷酸。2.根据权利要求1所述的一种β
‑
烟酰胺单核苷酸的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，烟酰胺和四乙酰核糖的摩尔比为1:1.2
‑
1.6；三氯甲烷的加入量是烟酰胺和四乙酰核糖质量总和的5
‑
6倍。3.根据权利要求1所述的一种β
‑
烟酰胺单核苷酸的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，反应过程是在水浴4
‑
50℃的条件下回流搅拌反应1.5
‑
2.5h。4.根据权利要求1所述的一种β
‑
烟酰胺单核苷酸的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，催化剂为TMSH
‑
PyrPOCs，催化剂加入量是烟酰胺质量的1％
‑
5％。5.根据权利要求1所述的一种β
‑
烟酰胺单核苷酸的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，有机碱为乙醇钠溶液，浓度是0.1
‑
0.3g/mL；反应条件为冰水浴，搅拌反应1
‑
2h。6.根据权利要求1所述的一种β
‑
烟酰胺单核苷酸的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中，烟酰胺核苷盐和三氯氧磷的...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱方明，
申请(专利权)人：慈如美制药上海有限公司，
类型：发明
国别省市：