一种自动化粪便核酸甲基化磁珠法纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种自动化粪便核酸甲基化磁珠法纯化方法包括以下步骤：(1)、向20ul粪便核酸提取液中加入130ul核酸转化试剂；(2)、再混匀短暂离心后置于普通PCR仪进行转化，得到转化产物；(3)、将150ul转化产物加入自动化纯化仪深孔板的孔位2的内部；(4)、再将加入样本的深孔板放置在自动化核酸提取仪底座相应正确位置；(5)、将八联磁棒套插入自动核酸提取仪磁棒套架卡槽内部；(6)、按照相应设置核酸提取程序，并进行运行。本发明专利技术与现有技术相比优点在于：本发明专利技术的纯化方法由吸附柱钝化法转变为磁珠钝化法，大大减少了过滤膜与收集管的耗材损耗；实现了自动化钝化，操作方便，也减少了仪器空间和人力成本，大大提高了核酸回收率。大大提高了核酸回收率。

【技术实现步骤摘要】
一种自动化粪便核酸甲基化磁珠法纯化方法


[0001]本专利技术属于生物技术
，尤其涉及一种自动化粪便核酸甲基化磁珠法纯化方法。

技术介绍

[0002]甲基化是指从活性甲基化合物(如S
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腺苷基甲硫氨酸)上将甲基催化转移到其他化合物的过程，最常见的甲基化修饰有DNA甲基化和组蛋白甲基化，本专利技术涉及的是DNA甲基化；
[0003]DNA在高温下变性成为单链，暴露出碱基，转化剂中的亚硫酸氢根离子，可以使变性后的DNA中未甲基化的胞嘧啶磺化和水解脱氨基，生成尿嘧啶磺酸盐，后续通过脱磺酸基，最终转化成尿嘧啶，甲基化的DNA中的胞嘧啶C被选择性地添加甲基，形成5
‑
甲基胞嘧啶，因此不能被转化而保持不变；转化结束后需进行核酸纯化再进行下一步qPCR扩增；
[0004]现阶段，市面粪便核酸甲基化转化产物采用吸附柱纯化法，易造成核酸损失且吸附柱纯化法需使用离心机，难以实现自动化，不便于实际使用，因此，亟需一种自动化粪便核酸甲基化磁珠法纯化方法来解决以上问题。

技术实现思路
<br/>[0005]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种自动化粪便核酸甲基化磁珠法纯化方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)、向20ul粪便核酸提取液中加入130ul核酸转化试剂；(2)、再混匀短暂离心后置于普通PCR仪进行转化，得到转化产物；(3)、将150ul转化产物加入自动化纯化仪深孔板的孔位2的内部；(4)、再将加入样本的深孔板放置在自动化核酸提取仪底座相应正确位置；(5)、将八联磁棒套插入自动核酸提取仪磁棒套架卡槽内部；(6)、按照相应设置核酸提取程序，并进行运行；(7)、程序运行完毕，取下深孔板，将纯化好的核酸转移至干净的离心管中，并在
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20℃温度下保存备用。2.如权利要求1所述的一种自动化粪便核酸甲基化磁珠法纯化方法，其特征在于：所述步骤(1)中核酸转化试剂为3M亚硫酸氢钠。3.如权利要求1所述的一种自动化粪便核酸甲基化磁珠法纯化方法，其特征在于：所述步骤(2)中普通PCR仪温度设置...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔文慧，
申请(专利权)人：青岛万物新生生物医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：