一种血浆外泌体核酸释放方法以及NGS建库方法技术

本发明专利技术公开了一种血浆外泌体核酸释放方法以及NGS建库方法。所述外泌体核酸释放方法为：将提取的外泌体悬浮于水中，得到的外泌体重悬液进行涡旋震荡和震荡孵育，其中涡旋震荡的速度≥500rpm。所述涡旋震荡时间为2min以上；所述震荡孵育温度为23

【技术实现步骤摘要】
一种血浆外泌体核酸释放方法以及NGS建库方法


[0001]本专利技术属于生物医学
，具体涉及一种血浆外泌体核酸释放方法以及NGS建库方法。

技术介绍

[0002]外泌体(exosome)是一种30
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150nm大小、极低密度的细胞外纳米级囊状结构，由细胞经过“内吞
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融合
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外排”等一系列调控过程而形成。外泌体在被发现后的很长一段时间内都没有引起研究者的注意，直到纳米分析技术的引进，以及2013年诺贝尔生物医学奖的公布，这个直径只有几十纳米的颗粒受到了前所未有的重视。
[0003]据研究报道，外泌体中含有的内容物如DNA、RNA、蛋白质和信号复合物在受体细胞基因和蛋白表达调控中有重要作用。如血浆外泌体中的miRNA(exosomal miRNA)具有独特的介导细胞间通讯的功能，能特异性抑制靶细胞中的靶基因表达，因此与游离miRNA相比，血浆exosomal
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miRNA水平的变化更加能代表恶性肿瘤的生物学功能的变化。另外，肿瘤细胞衍生外泌体通过传递的miRNA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种血浆外泌体核酸释放方法，该方法为：将提取的外泌体悬浮于水中，得到的外泌体重悬液进行涡旋震荡和震荡孵育，其中涡旋震荡的速度≥500rpm。2.如权利要求1所述的血浆外泌体核酸释放方法，其特征在于，所述外泌体的提取方法为：在血浆样本中加入外泌体捕获磁珠，离心沉淀，然后采用洗涤液进行洗涤，得到所述外泌体。3.如权利要求2所述的血浆外泌体核酸释放方法，其特征在于：3～10mL血浆样本提取的外泌体悬浮于水中制备100uL外泌体重悬液进行涡旋震荡。4.如权利要求1所述的血浆外泌体核酸释放方法，其特征在于：所述外泌体重悬液还包括防腐剂。5.如权利要求4所述的血浆外泌体核酸释放方法，其特征在于：所述防腐剂为叠氮化钠或Proclin。6.如权利要求1所述的血浆外泌体核酸释放方法，其特征在于：所述涡旋震荡时间为2min以上；所述震荡孵育温度为23
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80℃、孵育时间为5min以上。7.如权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：马跃，唐华，蔡瑶，赵小玉，张亚楠，
申请(专利权)人：上海思路迪生物医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：