PaDP蛋白和其突变体在普瑞巴林手性中间体酶法合成中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域。本发明专利技术提供了一种PaDP蛋白，其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示。本发明专利技术提供的经过氨基酸位点的组合突变获得了一个活力和热稳定性提高的突变体，同时经过大肠杆菌杂酸途径的敲除进一步提高了蛋白的表达量。经过高密度发酵后的全细胞催化可以实现24h内酶解150g/L底物3

【技术实现步骤摘要】
PaDP蛋白和其突变体在普瑞巴林手性中间体酶法合成中的应用


[0001]本专利技术属于生物


技术介绍

[0002]普瑞巴林(pregabalin，PGB)是一种新型γ
‑
氨基丁酸(γ
‑
aminobutyric acid，GABA)受体激动剂，具有良好的抗焦虑和治疗神经痛的效果，广泛应用于癫痫以及外周神经痛等方面的治疗。普瑞巴林是一种手性药物，不同构型的药理活性差异很大，S
‑
型异构体的药理活性是R
‑
型异构体的10倍，因此光学纯的S
‑
普瑞巴林可有效增强药物疗效、减少不良反应的发生及避免潜在的健康危害。获得高光学纯度的S
‑
普瑞巴林是目前合成的关键。
[0003]利用生物法实现了环亚胺到R
‑
单酰胺的专一转化，最终获得高光学纯度的S
‑
普瑞巴林。获得高光学纯度的(R)
‑
(
‑
)
‑3‑
(氨甲酰甲基)
‑5‑
甲基本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.PaDP蛋白，其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示。2.PaDP
‑
AHT突变体，其是将权利要求1所述PaDP蛋白的3个氨基酸残基突变成L64AF66HC319T后获得。3.PaDP
‑
AHT1突变体，其是是在权利要求2所述PaDP
‑
AHT突变体的386位氨基酸残基由V突变成A后获得。4.PaDP
‑
AHT2突变体，其特征在于，其是在权利要求3所述PaDP
‑
AHT1上进行R412N叠加突变后获得。5.PaDP
‑
AHT3突变体，其特征在于，其是在权利要求4所述PaDP
‑
AHT2上C端融合短肽18A后获得。6.权利要求1所述PaDP蛋白在全细胞催化将3
‑
异丁基戊二酰亚胺催化成(R)
‑
(
‑
)
‑3‑
(氨甲酰甲基)
‑5‑
甲基己酸中的应用。7.权利要求2所述PaDP
‑
AHT突变体在普瑞巴林手性中间体酶法合成中的应用，其特征在于，所述普瑞巴...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘菲霞，于波，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：