一种用于AFP阴性肝癌诊断的生物标志物及检测试剂盒制造技术

本发明专利技术属于医药生物技术领域，具体公开了一种用于AFP阴性肝癌诊断的生物标志物及检测试剂盒。将所述生物标志物组合构建的模型为PRE(PRE=AFP阴性HCC,3TAAbs)=1/[1+exp(3.323

【技术实现步骤摘要】
一种用于AFP阴性肝癌诊断的生物标志物及检测试剂盒


[0001]本专利技术属于医药生物
，具体公开了一种用于AFP阴性肝癌诊断的生物标志物及检测试剂盒。

技术介绍

[0002]肝癌早期诊断后给予及时有效治疗是降低其死亡率的主要措施。目前我国推荐肝癌高危人群每6个月进行血清AFP与肝脏超声检查来实现肝癌早期筛查，然后对筛查异常者应用动态增强CT和多模态MRI扫描进行明确诊断。大量研究已证实约40％的肝癌患者AFP水平并没有升高，这些AFP阴性肝癌患者往往肿瘤体积较小或处于早期阶段，临床症状不明显，病变部位的影像学特征类似良性结节，从而也不易被超声等影像学技术探测到，导致AFP阴性肝癌患者在早期筛查过程中被漏诊或误诊的概率较大。研究发现肝癌患者血清中AFP的浓度越低其预后越好，因此AFP阴性肝癌的精确有效诊断是提高肝癌早诊率、5年生存率、以及降低肝癌死亡率的重要措施，也是亟需突破的瓶颈问题。
[0003]血清学标志物因其相对无创、客观、经济实用等优点备受关注，寻找可弥补AFP的血清学标志物是肝癌诊断的热点。目前许多研究表明，癌症患者的血清中含有自身抗体，可与一组独特的自体细胞抗原发生反应，称为肿瘤相关抗原(TAA)。与自身免疫性疾病中出现的自身抗体不同，TAA自身抗体已在多种肿瘤中检测到。一些自身抗体存在肿瘤临床诊断的数月至数年之前，此外，TAA自身抗体作为免疫诊断标志物可能具有更大的优势，它们经免疫反应的放大作用比TAA本身量更多、持续时间更长，更容易检测。因此，TAA自身抗体在癌症的早期诊断中具有很大的潜力。所以，有必要基于AFP阴性肝癌筛选其相关的标志物，并与现有标志物AFP联合诊断肝癌，提高肝癌的早诊率。

技术实现思路

[0004]针对现有技术中存在的问题和不足，本专利技术的目的旨在提供一种用于AFP阴性肝癌诊断的生物标志物及检测试剂盒。
[0005]为实现专利技术目的，本专利技术采用的技术方案如下：
[0006]本专利技术第一方面提供了用于检测诊断AFP阴性肝癌的生物标志物的试剂在制备用于AFP阴性肝癌诊断的产品中的应用；所述生物标志物为抗肿瘤相关抗原EGFR自身抗体、抗肿瘤相关抗原PHF6自身抗体、抗肿瘤相关抗原PTEN自身抗体中的至少一种。抗肿瘤相关抗原EGFR自身抗体、抗肿瘤相关抗原PHF6自身抗体、抗肿瘤相关抗原PTEN自身抗体在AFP阴性肝癌患者血清中的表达水平均高于正常人，且差异具有统计学意义。
[0007]根据上述的应用，优选地，抗肿瘤相关抗原EGFR自身抗体、抗肿瘤相关抗原PHF6自身抗体、抗肿瘤相关抗原PTEN自身抗体均为受试者血清、血浆、组织间隙液或尿液中相应的抗肿瘤相关抗原自身抗体。
[0008]根据上述的应用，优选地，抗肿瘤相关抗原EGFR自身抗体、抗肿瘤相关抗原PHF6自身抗体、抗肿瘤相关抗原PTEN自身抗体为受试者接受肿瘤治疗之前血清、血浆、组织间隙液
或尿液中的抗肿瘤相关抗原自身抗体。更加优选地，所述肿瘤治疗为化疗、放疗或肿瘤手术切除。
[0009]根据上述的应用，优选地，所述受试者为哺乳动物，更加优选地，所述受试者为灵长类哺乳动物，最优选地，所述受试者为人。
[0010]根据上述的应用，优选地，所述试剂为通过酶联免疫吸附、蛋白质芯片、免疫印迹或微流控免疫检测样本中所述生物标志物的试剂。
[0011]根据上述的应用，优选地，所述样本为血清、血浆、组织间隙液或尿液。所述产品为蛋白质芯片、试剂盒或制剂。
[0012]根据上述的应用，优选地，所述生物标志物为抗肿瘤相关抗原EGFR自身抗体、抗肿瘤相关抗原PHF6自身抗体、抗肿瘤相关抗原PTEN自身抗体的组合；所述产品进行AFP阴性肝癌诊断时，预测肝癌的概率计算公式为：PRE＝1/[1+exp(3.323
‑
5.873
×
EGFR+7.415
×
PHF6
‑
12.453
×
PTEN)]，其中PRE表示预测AFP阴性肝癌的概率，EGFR表示抗肿瘤相关抗原EGFR自身抗体的表达量，PHF6表示抗肿瘤相关抗原PHF6自身抗体的表达量，PTEN表示抗肿瘤相关抗原PTEN自身抗体的表达量；exp表示以自然常数e为底的指数函数。
[0013]根据上述的应用，优选地，所述试剂为检测所述生物标志物的抗原或抗体。更为优选地，所述试剂为检测所述生物标志物的抗原，所述抗原为EGFR蛋白、PHF6蛋白、PTEN蛋白中的至少一种。
[0014]本专利技术第二方面提供了用于检测检测诊断肝癌的生物标志物的试剂在制备用于肝癌诊断的产品中的应用；所述生物标志物为抗肿瘤相关抗原EGFR自身抗体、抗肿瘤相关抗原PHF6自身抗体、抗肿瘤相关抗原PTEN自身抗体、AFP蛋白的组合。
[0015]根据上述的应用，优选地，所述试剂为通过酶联免疫吸附、蛋白质芯片、免疫印迹或微流控免疫检测样本中所述生物标志物的试剂。
[0016]根据上述的应用，优选地，所述样本为血清、血浆、组织间隙液或尿液。所述产品为蛋白质芯片、试剂盒或制剂。
[0017]根据上述的应用，优选地，所述生物标志物为抗肿瘤相关抗原EGFR自身抗体、抗肿瘤相关抗原PHF6自身抗体、抗肿瘤相关抗原PTEN自身抗体、AFP蛋白的组合；所述产品进行肝癌诊断时，预测肝癌的概率计算公式为：P＝1/[1+exp(2.487
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0.256
×
AFP
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5.003
×
PRE]，其中P表示预测肝癌的概率，AFP表示血清中甲胎蛋白的浓度，PRE表示预测AFP阴性肝癌的概率且PRE＝1/[1+exp(3.323
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5.873
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EGFR+7.415
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PHF6
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12.453
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PTEN)]，EGFR表示抗肿瘤相关抗原EGFR自身抗体的表达量，PHF6表示抗肿瘤相关抗原PHF6自身抗体的表达量，PTEN表示抗肿瘤相关抗原PTEN自身抗体的表达量。
[0018]本专利技术第三方面提供了一种用于肝癌诊断的试剂盒，所述试剂盒包含用于检测生物标志物的试剂，所述生物标志物为抗肿瘤相关抗原EGFR自身抗体、抗肿瘤相关抗原PHF6自身抗体、抗肿瘤相关抗原PTEN自身抗体中的至少一种；或所述生物标志物为抗肿瘤相关抗原EGFR自身抗体、抗肿瘤相关抗原PHF6自身抗体、抗肿瘤相关抗原PTEN自身抗体、AFP蛋白的组合。
[0019]根据上述的试剂盒，优选地，所述试剂盒通过酶联免疫吸附、蛋白质芯片、免疫印迹或微流控免疫检测样本中的所述生物标志物。
[0020]根据上述的试剂盒，优选地，所述生物标志物为抗肿瘤相关抗原EGFR自身抗体、抗
肿瘤相关抗原PHF6自身抗体、抗肿瘤相关抗原PTEN自身抗体的组合时，所述试剂盒预测肝癌的概率计算公式为PRE＝1/[1+exp(3.323
‑
5.873...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于检测诊断AFP阴性肝癌的生物标志物的试剂在制备用于AFP阴性肝癌诊断的产品中的应用；所述生物标志物为抗肿瘤相关抗原EGFR自身抗体、抗肿瘤相关抗原PHF6自身抗体、抗肿瘤相关抗原PTEN自身抗体中的至少一种。2.用于检测诊断肝癌的生物标志物的试剂在制备用于肝癌诊断的产品中的应用；所述生物标志物为抗肿瘤相关抗原EGFR自身抗体、抗肿瘤相关抗原PHF6自身抗体、抗肿瘤相关抗原PTEN自身抗体、AFP蛋白的组合。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述试剂为通过酶联免疫吸附、蛋白质芯片、免疫印迹或微流控免疫检测样本中所述生物标志物的试剂。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述样本为血清、血浆、组织间隙液或尿液；所述产品为蛋白质芯片、试剂盒或制剂。5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述试剂为检测所述生物标志物的抗原或抗体。6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物标志物为抗肿瘤相关抗原EGFR自身抗体、抗肿瘤相关抗原PHF6自身抗体、抗肿瘤相关抗原PTEN自身抗体的组合；所述产品进行AFP阴性肝癌诊断时，预测AFP阴性肝癌的概率计算公式为：PRE＝1/[1+exp(3.323
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EGFR+7.415
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PHF6
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PTEN)]，其中PRE表示预测AFP阴性肝癌的概率，EGFR表示抗肿瘤相关抗原EGFR自身抗体的表达量，PHF6表示抗肿瘤相关抗原PHF6自身抗体的表达量，PTEN表示抗肿瘤相关抗原PTEN自身抗体的表达量。7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述生物标志物为抗肿瘤相关抗原EGFR自身抗体、抗肿瘤相关抗原PHF6自身抗体、抗肿瘤相关抗原PTEN自身抗体、AFP蛋白的组合；所述产品进行肝癌诊断时，预测肝癌的概率计算公式为：P＝1/[1+exp(2.487
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PRE]，其中P表示预测肝癌的概率，AFP表示血清中甲胎蛋白的浓度，PRE表示预测AFP阴性肝癌的概率且PRE＝1/[1+exp(3.323
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【专利技术属性】
技术研发人员：王科妍，方志豪，王鹏，叶华，代丽萍，杨小昂，杜仁乐，史健翔，杨君霞，完迪迪，李青，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：