LncRNASNHG16作为初发2型糖尿病诊断标志物的应用制造技术

本发明专利技术实施例公开了一种LncRNA SNHG16作为初发2型糖尿病诊断标志物的应用，涉及医学生物检测技术领域。本发明专利技术提供的初发2型糖尿病的诊断引物由上游引物SEQ ID NO:12和下游引物SEQ ID NO:13组成。本发明专利技术提供的LncRNA SNHG16作为2型糖尿病诊断标志物，特异性好，敏感性高，为诊断2型糖尿病的诊断提供了新的临床手段，有助于2型糖尿病的监测，避免进一步的无效治疗，具有良好的转化医学前景。具有良好的转化医学前景。具有良好的转化医学前景。

【技术实现步骤摘要】
LncRNA SNHG16作为初发2型糖尿病诊断标志物的应用


[0001]本专利技术实施例涉及医学生物检测
，具体涉及一种LncRNA SNHG16作为初发2型糖尿病诊断标志物的应用。

技术介绍

[0002]糖尿病是一种常见的慢性代谢性疾病，已影响到世界上大约50亿人。在中国，影响2型糖尿病患者的危险因素主要包括：环境因素、遗传因素和表观遗传修饰。虽然目前糖尿病的治疗方法有很多，但对2型糖尿病的控制仍不理想。因此，对于2型糖尿病管理及探究其发病机制，并找寻潜在治疗靶点显得尤为重要。
[0003]LncRNAs作为基因组中调节基因研究的新领域，在细胞生物活动的各个环节发挥复杂的生物学功能。LncRNAs的生物学功能和调控机制将比miRNA更加复杂，其调控网络将更加精确和灵活。这也使得LncRNA更适合作为临床诊断的生物标志物。

技术实现思路

[0004]为此，本专利技术实施例提供一种LncRNA SNHG16作为初发2型糖尿病诊断标志物的应用。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术实施例提供如下技术方案：
[0006]根据本专利技术实施例的第一方面，提供一种初发2型糖尿病的诊断引物，所述诊断引物由上游引物SEQ ID NO:12和下游引物SEQ ID NO:13组成。
[0007]根据本专利技术实施例的第二方面，提供一种初发2型糖尿病的诊断试剂盒，包括如上所述的诊断引物。
[0008]进一步地，所述诊断试剂盒还包括作为阳性对照的LncRNA标志物，所述LncRNA标志物为LncRNA SNHG16，LncRNA小核仁RNA宿主基因16(small nucleolarRNAHost Gene 16，SNHG16)，位于人类17号染色体上，是LncRNA家族中的重要一员(序列如SEQ ID NO:1所示)。
[0009]进一步地，所述诊断试剂盒检测LncRNA SNHG16的表达量。
[0010]进一步地，所述诊断试剂盒的检测样本为组织标本或血液样本，如血浆、血清或血小板。
[0011]根据本专利技术实施例的第三方面，提供如上所述的诊断引物或LncRNA SNHG16在制备初发2型糖尿病的诊断产品中的应用。
[0012]进一步地，所述诊断产品为探针、基因芯片、试剂或试剂盒。
[0013]本专利技术实施例具有如下优点：
[0014]本专利技术提供的LncRNA SNHG16作为2型糖尿病诊断标志物，特异性好，敏感性高，为诊断2型糖尿病的诊断提供了新的临床手段，有助于2型糖尿病的监测，避免进一步的无效治疗，具有良好的转化医学前景。
附图说明
[0015]为了更清楚地说明本专利技术的实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。显而易见地，下面描述中的附图仅仅是示例性的，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图引伸获得其它的实施附图。
[0016]图1为本专利技术提供的LncRNA SNHG16在LncRNA芯片中表达水平图。
[0017]图2为本专利技术提供的HG和LPS诱导的THP
‑
1细胞中LncRNA SNHG16和炎症因子表达图。
[0018]图3为本专利技术提供的HG和LPS诱导的THP
‑
1细胞中Si
‑
SNHG16后LncRNA SNHG16和炎症因子表达图。
[0019]图4为本专利技术提供的LncRNA SNHG16亚细胞定位预测图。
[0020]图5为本专利技术提供的LncRNA SNHG16与miR
‑
212
‑
3P竞争性结合图，其中，(a)SNHG16和miR
‑
212
‑
3p预测结合位点；(b)SNHG16突变位点示意图；(c)qRT
‑
PCR：HG和LPS状态下miR
‑
212
‑
3p上调，miR
‑
212
‑
3p mimic后炎症因子下调；(d)双荧光素酶基因报告实验。
[0021]图6为本专利技术提供的SNHG16通过竞争性结合miR
‑
212
‑
3p调节P65的表达图；其中，(a)qRT
‑
PCR：HG和LPS状态NF
‑
κB表达上调，si
‑
SNHG16后NF
‑
κB表达下调；(b，d)免疫荧光：HG和LPS状态下P
‑
P65表达高，HG+miR
‑
212
‑
3p mimic和HG+si
‑
SNHG16后P
‑
P65表达减低，HG+si
‑
SNHG16+miR
‑
212
‑
3p inhibitor逆转了P
‑
P65表达减低这一反应；(c)WB：HG状态下P65和P
‑
P65表达上调，si
‑
SNHG16后P65和P
‑
P65表达下调。
[0022]图7为本专利技术提供的糖尿病小鼠和正常小鼠的模型的基本情况图；其中，(a)糖尿病小鼠si
‑
SNHG16血糖降低；(b)糖尿病小鼠组进水明显多于正常组小鼠；(c)糖尿病小鼠组体重减轻；(d)si
‑
SNHG16后小鼠肌酐表达量减低。
[0023]图8为本专利技术提供的肾组织中SNHG16和炎症因子表达量图。
[0024]图9为本专利技术提供的HE染色、Masson染色、PAS染色和免疫组织化学荧光染色图。
[0025]图10为本专利技术提供的LncRNA SNHG16在糖尿病病人和正常人外周血单个核细胞中的表达情况图；其中，(a)糖尿病患者和正常人SNHG16表达情况，(b)ROC曲线图。
[0026]图11为本专利技术提供的LncRNA SNHG16作用机制图。
具体实施方式
[0027]以下由特定的具体实施例说明本专利技术的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本专利技术的其他优点及功效，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0028]实施例1实验方法
[0029]一、LncRNA芯片相关实验
[0030]RNA测序样品的准备和步骤
[0031]1.使用TRIzol(Invitrogen)试剂提取总RNA，并使用QIAGEN RNeasy进行纯化。
[0032]2.总共250ng纯化的总RNA被用于标记和扩增。
[0033]3.使用PromoterPrimer和Affinity本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种初发2型糖尿病的诊断引物，其特征在于，所述诊断引物由上游引物SEQ ID NO:12和下游引物SEQ ID NO:13组成。2.一种初发2型糖尿病的诊断试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1所述的诊断引物。3.根据权利要求2所述的诊断试剂盒，其特征在于，所述诊断试剂盒还包括作为阳性对照的LncRNA标志物，所述LncRNA标志物为序列如SEQ ID NO:1所示的LncRNASNHG...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡小磊，黄琳娟，刘含双，张肖肖，金国玺，
申请(专利权)人：蚌埠医学院第一附属医院蚌埠医学院附属肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：