【技术实现步骤摘要】
H3K4me3在毛细胞再生中的应用及其相关小鼠模型的构建方法
[0001]本专利技术涉及生物技术中的听觉领域,具体涉及H3K4ME3在毛细胞再生中的应用及其相关小鼠模型的构建方法。
技术介绍
[0002]听觉作为一种重要的感官,是人类交流的基础。目前,约有4.66亿人遭受严重听力损失,耳蜗毛细胞(hair cells,HCs)的损伤是听觉障碍的主要原因。HCs作为听觉系统中最关键的机械感受器,可以将声波产生的机械刺激转化为耳蜗中的电信号。成年哺乳动物耳蜗HCs普遍缺乏再生能力,因此HCs损伤导致的听力损失是不可修复的。
[0003]HCS周围的支持细胞(SCs)可能是损伤后HCS再生的一个可能来源。耳蜗HC损伤后,某些类型的干细胞可以通过有丝分裂再生或直接转分化的方式增殖分化产生新的HC。此外,已发现这些干细胞在体外有助于HCS的再生。特别是在出生后早期,表达Lgr5的干细胞亚群具有一定的再生能力,可以作为HC的祖细胞。众所周知,Lgr5在胃、肠、肝等多种组织中都可以被认为是一种重要的干细胞标记物。在耳蜗中,Lgr5 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种小鼠模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:取若干出生后0
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3天的Lgr5
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EGFP
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CreERT2小鼠,取出耳蜗放入培养基中培养,消化,加入大豆胰蛋白酶抑制剂;分选出新霉素损伤的耳蜗细胞与对照耳蜗细胞;通过RNA
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seq分析新霉素损伤的耳蜗细胞中的Lgr5阳性的细胞与对照耳蜗细胞存在差异表达的基因;取小鼠耳蜗培养,抗H3K4me3抗体对剪切后的染色质进行免疫沉淀,ChIP
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Seq分析新霉素损伤的耳蜗细胞以及对照细胞的全基因组图谱和峰值图谱;构建蛋白质与蛋白质的相互作用网络;转录因子富集分析H3K4Me3组蛋...
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