本发明专利技术涉及微藻养植技术领域，特别涉及一种提高微藻活性物质含量的促进剂及其应用，本发明专利技术以曲酸做为杜氏盐藻的生长调节剂，有效提高了杜氏盐藻的活性物质含量，经实验证实：终浓度为40μmol/L的曲酸能显著促进杜氏盐藻脂质的积累，终浓度为150μmol/L的曲酸能显著促进杜氏盐微藻胡萝卜素的积累，曲酸是一种传统酿造工业中产生的天然物质，广泛应用于酱油、豆瓣酱等日常食品中，无毒且安全性能较好，成本低廉，因此，发展曲酸作为一种生物源植物生长调节物质，研究其对微藻生长和活性物质积累的影响，对进一步开发曲酸作为一种植物生长调节剂应用于微藻的规模化生产具有重要的意义。节剂应用于微藻的规模化生产具有重要的意义。节剂应用于微藻的规模化生产具有重要的意义。
【技术实现步骤摘要】
一种提高微藻活性物质含量的促进剂及其应用
[0001]本专利技术涉及微藻种植
，特别涉及一种提高微藻活性物质含量的促进剂及其应用。
技术介绍
[0002]微藻是光合效率最高的原始植物之一，其富含脂质、蛋白质及多种生物活性物质。微藻的脂质含量高，且富含多种人体必需的多不饱和脂肪酸，使其在生物能源领域和营养健康领域都极富应用前景。近几十年来，科学界一直在通过藻种选育改良和培养条件优化的方法来提高微藻的生物量和活性物质。在培养条件方面，实验室内对于微藻培养的研究，主要将温度、光照、PH、CO2、营养盐等方面的因素作为可调控的研究对象，并且当前的研究成果己趋于稳定，主要是利用非生物胁迫的方法诱导微藻储能物质积累。如采用三相培养模式培养微拟球藻，发现在第三阶段培养温度为5℃时，EPA产量较对照组增加了96％。但传统的非生物胁迫诱导微藻储能物质积累的方法虽然能促进EPA含量的积累，但由于微藻在胁迫环境中生长受到限制，导致生物量的积累降低，从而限制了储能物质的高效积累。此外，在实际应用中还会显著增加生产成本，而且许多优化后的条件在跑道池等开放式培养模式中难以采用，因此并不适于规模化生产。
[0003]植物生长调节剂是人工合成或从生物体中提取的具有和天然植物激素相似生长发育调节作用的有机化合物，它们能够在生理代谢层面影响植物细胞，并产生一定的生物学效应，包括；生长素、细胞分裂素、脱落酸、赤霉素、乙烯、油菜素甾醇、茉莉素、水杨酸、多胺、多肽类激素及其他植物生长调节剂等。众多研究证明，植物生长调节剂(如油菜素内酯、吲哚乙酸、赤霉素、脱落酸、水杨酸等)在促进微藻生长、优化代谢产物的组成、增加抗逆性等方面有显著功效。在脂质积累方面，植物生长调节剂可以同时刺激微藻生长和促进脂质在藻细胞中的积累。如适当浓度的黄腐酸会促进单针藻的生长及油脂含量积累，吲哚
‑3‑
乙酸(IAA)能促进小球藻的油脂积累，赤霉素能增加微拟球藻细胞直径、细胞数量、叶绿素含量和脂质积累。
[0004]但是传统植物生长调节剂存在价格昂贵、有毒、使用限制多等缺点，难以在生产实践中广泛应用。因此廉价且绿色无污染的生长调节剂有待开发研究，本研究前期从微生物的粗提物中进行化合物的分离纯化，然后进行化合物普筛，以期找到能促进微藻生长和活性物质含量的一类便宜、方便、安全的生长调节剂，能提高微藻的生长和脂质的含量。
技术实现思路
[0005]在申请人的前期实验中发现，某些微生物粗提物对微藻有一定的生长调节作用，经过对粗提物的化合物进行纯化、初筛发现化合物曲酸有作为微藻生长调节剂的潜力，鉴于上述内容，有必要提供一种能促进微藻生长的一类便宜、方便、安全的生长调节剂，以期能提高微藻的活性物质含量。
[0006]为达到上述目的，本专利技术所采用的技术方案是：
[0007]一种提高微藻活性物质含量的促进剂，所述促进剂为曲酸水溶液，所述曲酸水溶液的使用终浓度为20
‑
200μmol/L。
[0008]进一步的，所述微藻为杜氏盐藻。
[0009]进一步的，所述活性物质为脂质和/或类胡萝卜素。
[0010]进一步的，所述曲酸水溶液的最佳使用终浓度为40μmol/L，所述活性物质为脂质。
[0011]进一步的，所述曲酸水溶液的最佳使用终浓度为150μmol/L，所述活性物质为类胡萝卜素。
[0012]一种应用所述提高微藻活性物质含量的促进剂使用方法，所述方法包括如下步骤：
[0013](1)将杜氏盐藻培养在含NaCl的F2液体培养基中，摇床震荡培养8
‑
10天；
[0014](2)在步骤(1)的藻液中加入曲酸，继续震荡培养、离心，收集藻体即得；
[0015]所述步骤(2)曲酸的终浓度为20
‑
200μmol/L。
[0016]进一步的，所述步骤(1)杜氏盐藻摇床震荡培养的培养温度为24
±
1℃，光照为80μmol.m
‑2.s
‑1，光周期为光照12h
‑
黑暗12h。
[0017]进一步的，所述步骤(2)的震荡培养时间为4
‑
5天，离心条件为4000rpm。
[0018]进一步的，所述步骤(2)曲酸的终浓度为40μmol/L时，显著提升杜氏盐藻脂质含量；所述步骤(2)曲酸的终浓度为150μmol/L时，显著提升杜氏盐微藻胡萝卜素含量。
[0019]本专利技术具有如下有益效果：
[0020]本专利技术以曲酸做为杜氏盐藻的生长调节剂，有效提高了杜氏盐藻的活性物质含量，经实验证实：终浓度为40μmol/L的曲酸能显著促进杜氏盐藻脂质的积累，终浓度为150μmol/L的曲酸能显著促进杜氏盐藻脂质和类胡萝卜素的积累，曲酸是一种传统酿造工业中产生的天然物质，广泛应用于酱油、豆瓣酱等日常食品中，无毒且安全性能较好，成本低廉，因此，发展曲酸作为一种生物源植物生长调节物质，研究其对微藻生长、PUFAs和类胡萝卜素积累的影响，对进一步开发曲酸作为一种植物生长调节剂应用于微藻的规模化生产具有重要的意义。
【附图说明】
[0021]图1是杜氏盐藻培养8
‑
10天后用曲酸处理对脂质含量影响的结果图；
[0022]图2是用吩嗪
‑1‑
羧酸处理杜氏盐藻对脂质含量影响的结果图；
[0023]图3是杜氏盐藻培养3
‑
4天后用曲酸处理对脂质含量影响的结果图；
[0024]图4是杜氏盐藻培养8
‑
10天后用曲酸处理对类胡萝卜素含量影响的结果图。
【具体实施方式】
[0025]为使本专利技术的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图对本专利技术的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本专利技术。但是本专利技术能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本专利技术内涵的情况下做类似改进，因此本专利技术不受下面公开的具体实施的限制。
[0026]实施例1：
[0027]在申请人的前期实验中发现，某些微生物粗提物对微藻有一定的生长调节作用，
经过对粗提物的化合物进行纯化、初筛发现化合物曲酸有作为微藻生长调节剂的潜力，在此基础上，本实施例研究不同的微生物粗提物中纯化的化合物对微藻脂肪酸含量的影响，具体如下：
[0028]一、化合物选用曲酸：
[0029](1)培养液为商业化的F2培养基，盐度为7％，配制后经121℃高压蒸汽灭菌30min，冷却后备用。杜氏盐藻培养温度为24
±
1℃，光照为80μmol.m
‑2.s
‑1，光周期(光照/黑暗)为12h/12h。
[0030](2)当杜氏盐藻培养8
‑
10天至OD
600
为0.8
‑
1.0时，取100mL藻液到三角瓶中，按照终浓度为0、20、40、本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种提高微藻活性物质含量的促进剂，其特征在于，所述促进剂为曲酸水溶液，所述曲酸水溶液的使用终浓度为20
‑
200μmol/L。2.根据权利要求1所述的一种提高微藻活性物质含量的促进剂，其特征在于，所述微藻为杜氏盐藻。3.根据权利要求1所述的一种提高微藻活性物质含量的促进剂，其特征在于，所述活性物质为脂质和/或类胡萝卜素。4.根据权利要求1所述的一种提高微藻活性物质含量的促进剂，其特征在于，所述曲酸水溶液的使用终浓度为40μmol/L，所述活性物质为脂质。5.根据权利要求1所述的一种提高微藻活性物质含量的促进剂，其特征在于，所述曲酸水溶液的使用终浓度为150μmol/L，所述活性物质为类胡萝卜素。6.一种应用如权利要求1所述提高微藻活性物质含量的促进剂使用的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)将杜氏盐藻培养在含NaCl的F2液体培养基中，摇床震荡培养8
‑
10天；(2)在步骤(1)...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄炳耀，高程海，陈显强，周毅航，陈晓倩，甘雨满，唐振洲，
申请(专利权)人：广西中医药大学，
类型：发明
国别省市：
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