疫苗制造技术

本发明专利技术涉及基因工程蛋白，其包含：能够与禽抗原呈递细胞上的细胞表面蛋白结合的至少一个结合域；和a)至少一种抗原性多肽或b)能够与至少一种抗原性多肽结合的至少一个结合域。本发明专利技术还涉及禽疫苗，其包含能够与禽抗原呈递细胞上的细胞表面蛋白结合的至少一个结合域；和a)至少一种抗原性多肽或b)能够与至少一种抗原性多肽结合的至少一个结合域，以及此类疫苗治疗和/或预防禽受试者的疾病的用途。苗治疗和/或预防禽受试者的疾病的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】疫苗
专利

[0001]本专利技术涉及用于靶向抗原递送至禽抗原呈递细胞的工程蛋白。本专利技术还涉及作为靶向抗原递送疫苗(TADV)或抗原靶向疫苗(ATV)的禽疫苗。疫苗保护禽受试者免受包含至少一种抗原的病原体的后续攻击。本专利技术还涉及此类疫苗治疗和/或预防禽受试者的疾病的用途。
[0002]专利技术背景
[0003]疫苗是减少疾病(诸如癌症或感染性疾病)对养殖动物和人的影响的主要工具。
[0004]家禽疫苗设计中采用了若干方法。 目前，实践了针对家禽疾病的三种主要疫苗配制剂。这些包括灭活疫苗、减毒活疫苗和载体疫苗。
[0005]大多数获得许可的家禽疫苗是灭活疫苗并主要在含胚鸡蛋中生产，并且在灭活后，用佐剂重构这些病毒。这些疫苗具有一些固有缺点，包括对接种疫苗的鸟类的次优保护。例如，尽管对个别鸟类施用多剂(例如，一年期间对蛋鸡施用2至5剂)，感染性病毒可能继续在接种疫苗的鸟群中传播；接种疫苗的鸟类不易通过普通血清学检测与天然感染的鸟类区分开；来自灭活疫苗的残留致病性可能导致病原体，这可能促成或加剧爆发；与制造疫苗相关的生物危害；以及当使用高致病性株作为疫苗种子病毒时，含胚鸡蛋的低产率阻碍它们的成本效益生产。
[0006]以多剂量施用的许多疫苗，诱导可能保护免受临床疾病和死亡的次优免疫，不能防止接种疫苗动物的感染性病原体的脱落。因此，疾病的地方性循环仍在继续。
[0007]近年来，已经开发各种策略来增强疫苗的免疫原性。一种此类策略是ATV或重组TADV技术。该疫苗平台将抗原选择性递送至称为抗原呈递细胞(APC)的宿主免疫细胞，这些抗原呈递细胞捕获、加工和呈递抗原以启动和维持免疫应答，从而将保护性抗原选择性递送至专职性APC，诸如树突状细胞(DC)、巨噬细胞和B细胞。这些细胞捕获、加工抗原并将其呈递至T淋巴细胞，用于启动和维持免疫应答。
[0008]以前，各种研究探索了经由内吞作用
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205(Dec205)的DC受体至哺乳动物APC的基于抗体的靶向，但收效有限。Dec205是甘露糖受体家族的C型外源凝集素内吞受体并且显示经由主要组织相容性复合物II(MHCII)途径增强抗原呈递。可用于靶向禽APC以调节家禽疫苗的免疫原性的数据有限。
[0009]需要改良的疫苗来控制疾病和/或防止疾病在禽受试者中传播。

技术实现思路

[0010]一般而言，本专利技术涉及将抗原直接递送至禽免疫细胞并增强禽疫苗的效价和功效。
[0011]在一个方面，本专利技术提供了工程蛋白，其包含：能够与禽抗原呈递细胞上的细胞表面蛋白结合的至少一个结合域；和至少一种抗原性多肽。
[0012]在一个方面，工程蛋白是基因工程蛋白。
[0013]适当地，抗原性多肽可以包含抗原的部分或全部。
[0014]适当地，抗原性多肽可以是抗原的部分或全部(例如，抗原性多肽可以包含抗原的一个或多个域或由抗原的一个或多个域组成)。
[0015]在一个方面，本专利技术提供了工程蛋白(诸如基因工程蛋白)，其包含：能够与禽抗原呈递细胞上的细胞表面蛋白结合的至少一个结合域；和能够与至少一种抗原性多肽结合的至少一个结合域。
[0016]至少一个结合域和至少一种抗原性多肽或至少两个结合域可以包含在单个重组蛋白中。
[0017]能够与细胞表面蛋白结合的至少一个结合域可以可操作地连接至至少一种抗原性多肽或能够与抗原结合的至少一个结合域。
[0018]抗原呈递细胞可以是树突状细胞、巨噬细胞、B细胞、T细胞或自然杀伤细胞中的至少一种。
[0019]禽抗原呈递细胞可以选自树突状细胞、巨噬细胞、B细胞、T细胞或自然杀伤细胞中的至少一种。
[0020]细胞表面蛋白可以选自免疫球蛋白家族蛋白、整联蛋白家族受体或C型凝集素。
[0021]细胞表面蛋白可以选自CD83、CD11c或Dec205。细胞表面蛋白可以是CD83。
[0022]至少一种抗原性多肽可以是禽流感病毒抗原性多肽，诸如血凝素抗原性多肽。
[0023]根据本专利技术的工程蛋白(诸如基因工程蛋白)可以包含信号肽。
[0024]根据本专利技术的工程蛋白(诸如基因工程蛋白)可以包含改善工程蛋白的溶解、稳定和/或折叠的域。特别地，该域可以改善抗原的溶解、稳定和/或折叠。
[0025]结合域可以基于或者可以是抗体或抗体片段的抗原结合位点，诸如单链可变片段(scFv)、Fv、F(ab
’
)或F(ab
’
)2。
[0026]在另一个方面，本专利技术提供了核酸构建体，其包含第一多核苷酸和第二多核苷酸，该第一多核苷酸编码能够与禽抗原呈递细胞上的细胞表面蛋白结合的至少一个结合域；该第二多核苷酸编码至少一种抗原性多肽或能够与至少一种抗原性多肽结合的至少一个结合域。
[0027]在另一个方面，本专利技术提供了载体，其包含根据本专利技术的核酸构建体。
[0028]在另一个方面，本专利技术提供了工程改造细胞，其表达根据本专利技术的工程改造蛋白，或包含根据本专利技术的核酸构建体，或包含根据本专利技术的载体。
[0029]在另一个方面，本专利技术提供了禽疫苗，其包含根据本专利技术的工程蛋白(诸如基因工程蛋白)、根据本专利技术的核酸构建体或根据本专利技术的载体以及药学上可接受的载剂。
[0030]在一个方面，提供了根据本专利技术的禽疫苗用于治疗和/或预防受试者的疾病。
[0031]在另一个方面，本专利技术提供了用于治疗和/或预防受试者的疾病的方法，其包括向受试者施用有效量的根据本专利技术的疫苗的步骤。
[0032]适当地，根据本专利技术的疫苗的施用可以在受试者中引发体液和/或细胞免疫应答。
[0033]适当地，根据本专利技术的疫苗的施用可以降低受试者中的攻击病原体负载(诸如病毒负载、细菌负载或寄生物负载)。
[0034]适当地，施用根据本专利技术的疫苗可以在受试者中引发交叉反应性抗体的产生。
[0035]适当地，受试者可以是禽受试者。
[0036]适当地，受试者可以是家禽，例如受试者可以选自鸡、火鸡、鸭、鹌鹑、鸽或鹅。
[0037]在另一个方面，本专利技术提供了用于制备根据本专利技术的疫苗的方法，该方法包括将根据本专利技术的基因工程蛋白、根据本专利技术的核酸构建体，和/或根据本专利技术的载体，和药学上可接受的载剂混合的步骤。
[0038]在进一步的方面，本专利技术提供了根据本专利技术的工程蛋白(诸如基因工程蛋白)、根据本专利技术的核酸构建体和/或根据本专利技术的载体在制备用于治疗和/或预防疾病的药物中的用途。
附图说明
[0039]图1显示了scFv和H9HA胞外域融合的scFv抗体表达盒的示意性代表。(A)scFv表达盒包含位于5
’
末端的启动子和黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)免疫球蛋白重链结合蛋白(BIP)分泌信号序列，接着是APC特异性mAb可变轻链(vL)、接头肽(Gly4Ser)4和可变重链(vH)。(B)表达盒包含位于5
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末端本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.工程蛋白，其包含：能够与禽抗原呈递细胞上的细胞表面蛋白结合的至少一个结合域；和a)至少一种抗原性多肽；或b)能够与至少一种抗原性多肽结合的至少一个结合域。2.根据权利要求1的工程蛋白，其中所述工程蛋白是基因工程蛋白。3.根据权利要求2的工程蛋白，其中所述能够与细胞表面蛋白结合的至少一个结合域和所述至少一种抗原性多肽包含在单个重组蛋白中；或所述能够与细胞表面蛋白结合的至少一个结合域和所述能够与至少一种抗原性多肽结合的至少一个结合域包含在单个重组蛋白中。4.根据前述权利要求中任一项的工程蛋白，其中所述能够与细胞表面蛋白结合的至少一个结合域可操作地连接至所述至少一种抗原性多肽或所述能够与抗原性多肽结合的至少一个结合域。5.根据前述权利要求中任一项的工程蛋白，其中所述抗原呈递细胞是树突状细胞、巨噬细胞、B细胞或自然杀伤细胞中的至少一种。6.根据前述权利要求中任一项的工程蛋白，其中所述细胞表面蛋白选自免疫球蛋白家族蛋白、整联蛋白家族受体或C型凝集素。7.根据前述权利要求中任一项的工程蛋白，其中所述细胞表面蛋白选自CD83、CD11c或Dec205。8.根据前述权利要求中任一项的工程蛋白，其中所述细胞表面蛋白是CD83。9.根据前述权利要求中任一项的工程蛋白，其中所述至少一种抗原性多肽是禽流感病毒抗原性多肽，诸如血凝素。10.根据前述权利要求中任一项的工程蛋白，其中所述结合域是基于抗体或抗体片段诸如单链可变片段(scFv)、Fv、F(ab
’
)或F(ab
’
)2的抗原结合位点。11.核酸构建体，其包含第一多核苷酸和第二多核苷酸，所述第一多核苷酸编码如权利要求1至10中任一项所定义的能够与禽抗原呈递细胞上的细胞表面蛋白结合的...

【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：皮尔布莱特研究所，
类型：发明
国别省市：