一种同时检测养阴清肺丸中七种有效成分的方法技术

本发明专利技术公开了一种同时检测养阴清肺丸中七种有效成分的方法，属于化学检测技术领域。本发明专利技术所述的同时检测养阴清肺丸中七种有效成分的方法，步骤如下：将养阴清肺丸样品溶液注入液相色谱仪中，采用分段变换波长法，进行色谱检测，以实现七种有效成分的定性和定量检测。本发明专利技术通过采用UPLC分段变换波长法，实现了养阴清肺丸中哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚和甘草酸的含量的同时测定，七种有效成分均能实现良好的分离，无其他成分干扰。且各成分均在各自的线性范围内线性关系良好，加样回收率在95～105％之间。本发明专利技术的检测方法简便、准确、有效，从而可用于养阴清肺丸的质量控制和整体质量评价。清肺丸的质量控制和整体质量评价。清肺丸的质量控制和整体质量评价。

【技术实现步骤摘要】
一种同时检测养阴清肺丸中七种有效成分的方法


[0001]本专利技术属于化学检测
，具体涉及一种同时检测养阴清肺丸中七种有效成分的方法。

技术介绍

[0002]养阴清肺丸由地黄、麦冬、玄参、川贝母、白芍、牡丹皮、甘草、薄荷八味药味组成，具有养阴润燥、清肺利咽的功效，临床上主要用于阴虚肺燥、咽喉干痛、干咳少痰或痰中带血。该制剂现收载于《中国药典》2020年版一部中，有大蜜丸、小蜜丸、水蜜丸、水丸4种规格。在【含量测定】项中，仅对丹皮酚进行控制，不能很好地满足质量控制需求。现有关于养阴清肺丸的研究中，均仅对芍药苷进行了考察和研究。中药复方制剂中包含的药味多，含有的化学成分种类复杂，仅以单一成分作为指标对其进行考察并不能实现全面、客观评价其质量的目的。因此，建立一种能够同时测定养阴清肺丸中哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚和甘草酸7种指标成分的方法，对养阴清肺丸中白芍、地黄、玄参、甘草、牡丹皮5味药味的投料情况进行考察和研究，能为提高养阴清肺丸的质控标准提供一定的理论依据和技术支撑。

技术实现思路

[0003]本专利技术采用分段变换波长法，旨在建立一种能够同时测定养阴清肺丸中哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚和甘草酸7种指标成分的方法，从而能够对养阴清肺丸中白芍、地黄、玄参、甘草、牡丹皮等5味中药的投料情况进行检测。
[0004]本专利技术的技术方案如下：
[0005]一种同时检测养阴清肺丸中七种有效成分的方法，步骤如下：将养阴清肺丸样品溶液注入液相色谱仪中，采用分段变换波长法，进行色谱检测，以实现七种有效成分的定性和定量检测。
[0006]上述色谱检测选自如下色谱条件：
[0007]采用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱，梯度洗脱选自如下洗脱条件：0～3min，3％A；3～16min，3～16％A；16～20min，16％A；20～26min，16～25％A；26～31min，25～30％A；31～33min，30～37％A；33～38min，37～42％A；38～40min，42～45％A；40～45min，45～100％A；柱温为30℃；进样量为4μL；流速为1.0mL/min。
[0008]上述分段变换波长法选自如下条件：
[0009]0～8min，波长210nm，测定哈巴苷；8～18min，波长230nm，测定芍药苷；18～21min，波长278nm，测定甘草苷；21～27min，波长332nm，测定毛蕊花糖苷；27～33min，波长278nm，测定哈巴俄苷、丹皮酚；33～45min，波长252nm，测定甘草酸。
[0010]上述检测方法中，所述七种有效成分为哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚和甘草酸。
[0011]本专利技术提供了上述方法在检测养阴清肺丸中的中药投料情况中的应用。
[0012]上述应用中，所述中药为白芍、地黄、玄参、甘草和牡丹皮。
[0013]本专利技术提供了上述方法在养阴清肺丸质量控制和评价中的应用。
[0014]在上述质量控制和评价应用中，所述养阴清肺丸中各有效成分的含量标准为：
[0015]以哈巴苷和哈巴俄苷总量计，拟定限度为：大蜜丸应不少于0.30mg/g，小蜜丸应不少于0.30mg/g，水蜜丸应不少于0.35mg/g，水丸应不少于0.50mg/g；拟定甘草苷限度为：大蜜丸应不少于70μg/g，小蜜丸应不少于70μg/g，水蜜丸应不少于130μg/g，水丸应不少于150μg/g；拟定甘草酸限度为：大蜜丸应不少于0.30mg/g，小蜜丸应不少于0.30mg/g，水蜜丸应不少于0.35mg/g，水丸应不少于0.40mg/g；拟定芍药苷限度为：大蜜丸应不少于0.60mg/g，小蜜丸应不少于0.60mg/g，水蜜丸应不少于0.85mg/g，水丸应不少于1.0mg/g；拟定丹皮酚限度为：大蜜丸应不少于0.50mg/g，小蜜丸应不少于0.50mg/g，水蜜丸应不少于0.60mg/g，水丸应不少于0.70mg/g。
[0016]本专利技术的有益效果为：
[0017]本专利技术通过采用UPLC分段变换波长法，实现了养阴清肺丸中哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚和甘草酸的含量的同时测定，七种有效成分均能实现良好的分离，无其他成分干扰。且各成分均在各自的线性范围内线性关系良好，加样回收率在95～105％之间。本专利技术的检测方法简便、准确、有效，从而可用于养阴清肺丸的质量控制和整体质量评价。
附图说明
[0018]图1为混合对照品的UPLC色谱图；其中，1为哈巴苷，2为芍药苷，3为甘草苷，4为毛蕊花糖苷，5为哈巴俄苷，6为丹皮酚，7为甘草酸铵；
[0019]图2为水蜜丸供试品的UPLC色谱图；
[0020]图3为大蜜丸供试品的UPLC色谱图；
[0021]图4为缺白芍牡丹皮阴性的UPLC色谱图；
[0022]图5为缺玄参地黄阴性的UPLC色谱图；
[0023]图6为缺甘草阴性的UPLC色谱图；
[0024]图7为缺玄参阴性的UPLC色谱图；
[0025]图8为缺白芍阴性的UPLC色谱图。
具体实施方式
[0026]本专利技术所采用的试验仪器及原料如下：
[0027]Agilent 1290Infinity快速高分离液相色谱仪；ME204T/02型梅特勒天平；AS10200BT型超声波清洗器(AUTO SCIENCE)。色谱柱：Agilent SB
‑
C18(4.6mm
×
100mm，2.7μm)。
[0028]哈巴苷(批号：111729
‑
201707，纯度：96.8％)、芍药苷(批号：110736
‑
201943，纯度：100％)、甘草苷(批号：111610
‑
201908，纯度：95.0％)、毛蕊花糖苷(批号：111530
‑
201914，纯度：95.2％)、哈巴俄苷(批号：111730
‑
201709，纯度：95.9％)、丹皮酚(批号：110708
‑
201407，纯度：99.9％)、甘草酸铵(批号：110731
‑
201720，纯度：97.7％)，上述对照
品均购自中国食品药品检定研究院。
[0029]经UV光谱检测，哈巴苷、哈巴俄苷、芍药苷、毛蕊花糖苷、丹皮酚、甘草苷、甘草酸的λ
max
(最大吸收波长)分别为210、282、230、332、274、278、252nm，选择在最大吸收波长处进行检测，该成分在仪器上的响应因子最高，因此考虑使每一成分都处在最佳的检测波长下，采用分段变换波长法进行测定，因丹皮酚与哈巴俄苷色谱峰保留时间接近，最大波长也相近，故采用278nm对丹皮酚与哈巴俄苷进行测定。
[0030本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时检测养阴清肺丸中七种有效成分的方法，其特征在于，步骤如下：将养阴清肺丸样品溶液注入液相色谱仪中，采用分段变换波长法，进行色谱检测，以实现七种有效成分的定性和定量检测。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述色谱检测选自如下色谱条件：采用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱，梯度洗脱选自如下洗脱条件：0～3min，3％A；3～16min，3～16％A；16～20min，16％A；20～26min，16～25％A；26～31min，25～30％A；31～33min，30～37％A；33～38min，37～42％A；38～40min，42～45％A；40～45min，45～100％A；柱温为30℃；进样量为4μL；流速为1.0mL/min。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述分段变换波长法选自如下条件：0～8min，波长210nm，测定哈巴苷；8～18min，波长230nm，测定芍药苷；18～21min，波长278nm，测定甘草苷；21～27min，波长332nm，测定毛蕊花糖苷；27～33min，波长278nm，测定哈巴俄苷、丹皮酚；33～45min，波长252nm，测定甘草酸。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁航，陈正伟，尹丽华，卢京光，殷世宁，钟建青，陈安珍，
申请(专利权)人：青岛市食品药品检验研究院青岛市药品不良反应监测中心，青岛市实验动物和动物实验中心，
类型：发明
国别省市：