一种震荡浮选病理切片的方法技术

本发明专利技术提供一种震荡浮选病理切片的方法，其特征在于：它包括以下步骤：蜡块抛光、蜡块切片，调整超声仪的振动频率，以及浮选槽内的水温、将切片放入超声仪中的水浴槽中进行震荡浮选一段时间而后关闭超声仪，将切片转移至载玻片上，而后取出载玻片，HE染色后于显微镜下进行观察即可。本发明专利技术步骤简单，操作方便，确保了切片的质量，在不损伤切片形态的前提下降低了组织切片出现皱纹的概率，避免了现有技术中石蜡切片长时间在热水浴中出现组织开裂的现象，节省人力资源，提高工作效率，展片效率及稳定性高，便于科研工作者对组织各层的观察，为各种疾病的研究提供了可靠素材。种疾病的研究提供了可靠素材。种疾病的研究提供了可靠素材。

【技术实现步骤摘要】
一种震荡浮选病理切片的方法


[0001]本专利技术涉及生物医学实验仪器
，具体地说就是一种震荡浮选病理切片的方法。

技术介绍

[0002]组织切片浮选是将石蜡切片机切出的薄片放入浮选槽中，将切片上的皱纹最大程度展平。常规浮选方法是指，石蜡切片受热（50℃左右）后在水表面张力的作用下自然平整地展开的过程，操作人员只能在旁边等待结果，非常耗费时间，在长时间的浮选工作中，也易导致实验操作人员试验操作效率低下。而且切片长时间浸泡在热水浴中会使石蜡逐渐溶解、切片会出现开裂的情况，使得后续光镜下观察组织切片时观察效果较差等问题。

技术实现思路

[0003]本专利技术就是为克服现有中的不足，提供一种震荡浮选病理切片的方法。
[0004]本申请提供以下技术方案：一种震荡浮选病理切片的方法，其特征在于：它包括以下步骤：S1、蜡块剖面步骤：将预先冷冻好的蜡块放置于石蜡切片机的固定凹槽中，对蜡块进行剖面处理；S2、蜡块切片步骤：依据组织属性，均匀、缓慢的旋转切片机手柄切割蜡块，得到切片；S3、仪器调整步骤：将超声仪的震动频率调整到（33 kHz或40 kHz），将超声仪水浴槽中超纯水的温度提升至40℃
‑
45℃；S4、浮选步骤：将切片平铺放入超声仪的水浴槽内，进行震荡浮选一段时间，而后关闭超声仪；S5、切片取出步骤：手持载玻片将浮选完毕的组织切片捞起；S6、切片干燥步骤：对载玻片进行送入生物组织摊烤片机中依次进行烘片和烤片；S7、HE染色步骤：将切片经二甲苯脱蜡，梯度乙醇脱水后，用苏木素染液进行第一染色一段时间，而后再用5%伊红染液进行二次染色一段时间，经脱水、透明、封片；S8、采集图片步骤：将完成S7步骤后将载玻片放入光学显微镜下拍照。
[0005]在上述技术方案的基础上，还可以有以下进一步的技术方案：在所述S4步骤中，仪器调整步骤中震荡浮选的时间为（4
‑
5min）。
[0006]所述S7步骤中，第一染色时间为8 min，第二次染色时间为5 min.所述S6步骤中，烘片的温度为55
‑
65℃，烘片时间一般20
‑
30min，烤片温度65
‑
75℃左右，烤片时间一般20
‑
30min。
[0007]专利技术优点：本专利技术步骤简单，操作方便，确保了切片的质量，降低了组织切片出现皱纹的概率，避免了现有技术中石蜡切片长时间在热水浴中出现组织开裂的现象，节省人力资源，提
高工作效率，展片效率及稳定性高，便于科研工作者对组织各层的观察，为各种疾病的研究提供了可靠素材。
附图说明
[0008]图1是人体肠组织在现有技术浮选后的成像图；图2是小鼠肠组织在现有技术浮选后的成像图；图3是人体肠组织在采用了本专利技术提供的方法后的成像图；图4是小鼠肠组织在采用了本专利技术提供的方法后的成像图；图5是现有技术和本专利技术制备的震荡浮选病理切片出现皱纹数量对比示意图。
具体实施方式
[0009]一种震荡浮选病理切片的方法，其特征在于：它包括以下步骤：S1、蜡块抛光步骤：将预先冷冻好的蜡块放置于石蜡切片机的固定凹槽中，对蜡块进行抛光处理。
[0010]S2、蜡块切片步骤：依据组织属性，均匀、缓慢的旋转切片机手柄切割蜡块，得到5 μm厚的组织超薄切片。
[0011]S3、仪器调整步骤：将超声仪的震动频率调整到（33 kHz或40 kHz），将超声仪水浴槽中超纯水的温度提升至40℃
‑
45℃。
[0012]S4、浮选步骤：将切片平铺放入超声仪的水浴槽内，进行震荡浮选5min，而后关闭超声仪。
[0013]S5、切片取出步骤：手持载玻片将将浮选完毕的组织切片捞起。
[0014]S6、切片干燥步骤：对载玻片进行送入生物组织摊烤片机中依次进行烘片和烤片，烘片的温度为60℃，烘片时间一般25min，烤片温度70℃左右，烤片时间一般25min。
[0015]S7、HE染色步骤：将切片经二甲苯脱蜡，梯度乙醇脱水后，用苏木素染液进行第一染色8min，而后再用5%伊红染液进行二次染色5min，经脱水、透明、封片。
[0016]S8、采集图片步骤：将完成S7步骤后将载玻片放入光学显微镜下拍照。
[0017]为验证本专利技术制备的超声仪浮选的最佳频率和温度，我们设定在相同时间下（每张切片浮选时间为5 min）对比不同频率和温度的展片效果，每对参数浮选100 张切片，其中以切片皱纹数量≤1且未破损认定为合格，切片皱纹数量＞1或破损认定为不合格，统计合格率。如下表：本专利技术制备的超声仪浮选病理切片的最佳频率和温度统计表：
[0018]可见40℃
‑
45℃，33 kHz或40 kHz合格率最高。
[0019]如图1
‑
5所示，本专利技术与现有相比组织成像图中皱纹明显减少，图1和2中的箭头为皱纹。
本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种震荡浮选病理切片的方法，其特征在于：它包括以下步骤：S1、蜡块剖面步骤：将预先冷冻好的蜡块放置于石蜡切片机的固定凹槽中，对蜡块进行剖面处理；S2、蜡块切片步骤：依据组织属性，均匀、缓慢的旋转切片机手柄切割蜡块，得到切片；S3、仪器调整步骤：将超声仪的震动频率调整到（33 kHz或40 kHz），将超声仪水浴槽中超纯水的温度提升至40℃
‑
45℃；S4、浮选步骤：将切片平铺放入超声仪的水浴槽内，进行震荡浮选一段时间，而后关闭超声仪；S5、切片取出步骤：手持载玻片将浮选完毕的组织切片捞起；S6、切片干燥步骤：对载玻片进行送入生物组织摊烤片机中依次进行烘片和烤片；S7、HE染色步骤：将切片经二甲苯脱蜡，梯度乙醇脱水后，用苏木素染液进行第一染色一段时间，而后再用5%伊红染液进行二次...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋雪，左芦根，张敏，张夏婉，李文杰，王文峰，徐梦真，李静，耿志军，张小凤，王月月，王炼，
申请(专利权)人：蚌埠医学院第一附属医院蚌埠医学院附属肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：