一种用于细胞甲基化检测样本前处理试剂盒及使用方法技术

本发明专利技术公开了一种用于细胞甲基化检测样本前处理试剂盒及使用方法，试剂盒包括免提取试剂和甲基化重亚硫酸盐转化试剂，免提取试剂由chelex

【技术实现步骤摘要】
一种用于细胞甲基化检测样本前处理试剂盒及使用方法


[0001]本专利技术涉及基因检测
，具体涉及一种用于细胞甲基化检测样本前处理试剂盒及使用方法。

技术介绍

[0002]核酸是长链聚合物分子。单体或重复单元称为核苷酸，因此有时将核酸称为多核苷酸。核酸可以定义为存在于活细胞中的有机分子。核酸是遗传信息从一代传给下一代的关键因素。目前，在医学和分子生物学各个研究领域都离不开核酸的检测，因此核酸的提取纯化是分子生物学研究和临床检测的基础。
[0003]现有常用的核酸提取方法有苯酚氯仿抽提法、离心柱纯化、磁珠核酸分离技术等。其中苯酚氯仿抽提法利用酚是蛋白质的变性剂，反复抽提，而DNA易溶于水，却不溶于有机溶剂。利用萃取原理，根据蛋白核酸溶于不同的试剂层，经在不同液层抽取所需的组分，即可得到纯化核酸。但在提取过程中使用了有毒有害的有机溶剂，操作步骤繁琐，提取时间长。离心柱纯化法是利用核酸表面会覆盖一层由水分子构成的薄膜，在高盐环境下，这层亲水膜会遭到破坏从而核酸可吸附在离心柱上，而其他杂质如蛋白质、代谢产物等则会被离心沉淀与核酸分离，最后通本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于细胞甲基化检测样本前处理试剂盒，其特征在于，包括免提取试剂和甲基化重亚硫酸盐转化试剂；所述免提取试剂由chelex
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100、盐酸胍、NP40、EDTA、Tris
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Hcl、Tween类非离子型表面活性剂组成；所述甲基化重亚硫酸盐转化试剂由亚硫酸盐转化液、结合液、漂洗液、脱硫液、洗脱缓冲液、磁珠悬浮液组成，亚硫酸盐转化液由亚硫酸铵、硫代乙酸钠和磷酸钠缓冲液组成；结合液由异硫氰酸胍、盐酸胍、EDTA和Tris
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Hcl组成；漂洗液由EDTA、Tris
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Hcl和乙醇组成；脱硫液由EDTA、Tris
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Hcl、氢氧化钠和乙醇组成；洗脱缓冲液由EDTA、Tris
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Hcl组成；磁珠悬浮液由硅羟基磁珠和水组成。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，免提取试剂中，各物质终浓度为：chelex
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100 3%wt
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5%wt；盐酸胍1M
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2M；NP40 1%wt
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1.5%wt；EDTA 100 mM
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250mM；Tris
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Hcl 50mM
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100mM；Tween类非离子型表面活性剂1%wt
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1.5%wt。3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，甲基化重亚硫酸盐转化试剂中，各物质终浓度为：亚硫酸盐转化液：亚硫酸铵3M
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5M、硫代乙酸钠500mM
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1M，用0.5M磷酸钠缓冲液进行稀释；结合液：异硫氰酸胍300mM

【专利技术属性】
技术研发人员：王林海，刘沛，
申请(专利权)人：北京起源聚禾生物科技有限公司，
类型：发明
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