一种高密度脂蛋白的纯化方法技术

技术编号:38210536 阅读:18 留言:0更新日期:2023-07-21 17:01
本发明专利技术通过在使用聚乙二醇6000在水溶液中沉淀高密度脂蛋白时,加入设定浓度的氯化钠,促使HDL完全沉淀。且在分离过程中,利用浓盐水的高密度与高密度脂蛋白的相对低密度之间的较大差别,只需要采用低速离心法,就可将固形物沉淀聚集并分离,离心停止后,沉淀漂浮在液面上,方便挑出以获得纯化后的高密度脂蛋白。本发明专利技术的高密度脂蛋白纯化分离方法,操作简单,对各方面条件要求都很低,且试剂成本低廉,将给科研和大规模生产都带来极大便利和效益。益。益。

【技术实现步骤摘要】
一种高密度脂蛋白的纯化方法


[0001]本专利技术属于生物分离
,具体涉及一种高密度脂蛋白的纯化方法。

技术介绍

[0002]脂蛋白(lipoproteins)是由脂质和蛋白质组成的复合物,包括由脂类组成的疏水性内核,和由蛋白质、磷脂、胆固醇等组成的外壳,形成球状微粒, 在血液中转运脂类。在运载脂类时,脂类与脂蛋白的蛋白质外壳之间并非共价键结合,多数是通过脂质的非极性部分与蛋白质组份之间以疏水键相互作用而结合在一起。
[0003]根据脂蛋白颗粒的大小及其密度分类,即根据在特定的盐密度内的漂浮行为,用超速离心技术可把血浆脂蛋白分成四大族:乳糜微粒(chylomicron,CM):d<0.95g/ml;极低密度脂蛋白(very low density lipoproteins, VLDL):d=0.95~1.006g/ml;低密度脂蛋白(low density lipoproteins, LDL):d=1.006~1.063g/ml;高密度脂蛋白(high density lipoproteins, HDL):d=1.0本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高密度脂蛋白的纯化方法,其特征在于,包括步骤:a. 提供高密度脂蛋白粗提物沉淀,加水溶解,取上清液I;b. 上清液I中加入聚乙二醇6000至浓度I;c. 加入氯化钠至第一浓度;d. 低速离心分离后收集沉淀I;所述沉淀I为高密度脂蛋白。2.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述步骤d后,还包括步骤:e. 沉淀I加水溶解;f. 加入聚乙二醇6000至浓度II;g. 加入氯化钠至第二浓度;h. 低速离心分离后收集沉淀II;所述沉淀II为高密度脂蛋白。3.根据权利要求2所述的纯化方法,其特征在于,所述步骤e

h重复至少一次。4.根据权利要求1或2或3所述的纯化方法,其特征在于,还包括步骤:i. 所述沉淀I或所述沉淀II加入纯水后低速离心,收集上清液II;所述上清液II为高密度脂蛋白溶液。5.根据权利要求1或2或3所述的纯化方法,其特征在于,步骤a之前,还包括步骤:a1: 提供血浆;a2: 加入聚乙二醇6000至质量...

【专利技术属性】
技术研发人员:孙臣忠周军韩碧芸黄学记陈虹陈英王沂黄任强李景新
申请(专利权)人:上海乐合生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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