促人皮肤成纤维细胞生长的组合物及其制备方法和应用技术

本申请提供一种促人皮肤成纤维细胞生长的组合物及其制备方法和应用，属于护肤品技术领域。促人皮肤成纤维细胞生长的组合物包括：干细胞外泌体和重组人源化胶原蛋白；其中，干细胞外泌体和重组人源化胶原蛋白的质量比为1:（120

【技术实现步骤摘要】
促人皮肤成纤维细胞生长的组合物及其制备方法和应用


[0001]本申请涉及护肤品
，具体而言，涉及一种促人皮肤成纤维细胞生长的组合物及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]干细胞外泌体由干细胞分泌，干细胞外泌体中含有可溶性蛋白（如生长因子、白介素、趋化因子、抗体、酶、黏附分子、受体、激素以及抗菌肽等）、游离核酸以及生物活性脂质等“有效成分”，因而具有促进细胞分裂增殖、调节机体免疫反应等作用。
[0003]研究者发现，干细胞外泌体具有在上皮组织的增殖、迁移、再生以及炎症控制和瘢痕控制等方面的作用，因此，干细胞外泌体在护肤品领域具有良好的应用前景。
[0004]但是，干细胞外泌体的成本较高，单独采用干细胞外泌体作为护肤品中的有效成分，会使得制得的护肤品基成本较高；且现有的采用干细胞外泌体制备的护肤品在护肤功效上依旧存在较大的提升瓶颈，无法兼具较佳的肤色提亮、皮肤弹性增加、皮肤屏障修复、淡斑、疤痕修复、法令纹修复、减少皮肤红血丝以及收缩毛孔等功效。

技术实现思路

[0005]本申请提供一种促人皮肤成纤维细胞生长的组合物及其制备方法和应用，其旨在提高采用干细胞外泌体制备的护肤品的护肤功效。
[0006]第一方面，本申请提供一种促人皮肤成纤维细胞生长的组合物，组合物包括：干细胞外泌体和重组人源化胶原蛋白；其中，干细胞外泌体和重组人源化胶原蛋白的质量比为1:（120
‑
350）。
[0007]本申请采用干细胞外泌体与重组人源化胶原蛋白在特定配比下复配，可实现协同促进人皮肤成纤维细胞生长（包括促进人皮肤成纤维细胞的增殖和迁移）的作用，进而有利于提高采用该组合物制备得到的护肤品的护肤效果（包括肤色提亮、皮肤弹性增加、皮肤屏障修复、淡斑、疤痕修复、法令纹修复、减少皮肤红血丝以及收缩毛孔等）。
[0008]结合第一方面，本申请可选的实施方式中，组合物为液相，干细胞外泌体在组合物中的质量浓度为15
‑
25μg/mL，重组人源化胶原蛋白在组合物中的质量浓度为3
‑
5mg/mL。
[0009]上述技术方案，可在有效降低组合物的经济成本的基础上，充分发挥组合物促进人皮肤成纤维细胞生长的功效，进而提高采用该组合物制备得到的护肤品的护肤效果。
[0010]结合第一方面，本申请可选的实施方式中，组合物还包括生理盐水。
[0011]上述技术方案，组合物中含有生理盐水，组合物较为温和，且使得组合物为液相，有利于组合物直接涂覆于待护肤的皮肤表层。
[0012]结合第一方面，本申请可选的实施方式中，组合物还包括辅料，辅料包括生长因子、免疫因子、趋化因子、氨基酸以及维生素中的至少一种。
[0013]上述技术方案，组合物中含有上述物质作为辅料，有利于进一步促进人皮肤成纤维细胞生长（包括促进人皮肤成纤维细胞的增殖和迁移），进而有利于进一步提高采用该组
合物制备得到的护肤品的护肤效果（包括肤色提亮、皮肤弹性增加、皮肤屏障修复、淡斑、疤痕修复、法令纹修复、减少皮肤红血丝以及收缩毛孔等）。
[0014]第二方面，本申请提供一种上述第一方面提供的组合物的制备方法，包括：将干细胞外泌体和重组人源化胶原蛋白按照质量比为1:（120
‑
350）进行混合。
[0015]本申请提供的制备方法通过将干细胞外泌体与重组人源化胶原蛋白在特定配比下复配，可实现协同促进人皮肤成纤维细胞生长（包括促进人皮肤成纤维细胞的增殖和迁移）的作用，进而有利于提高采用该组合物制备得到的护肤品的护肤效果（包括肤色提亮、皮肤弹性增加、皮肤屏障修复、淡斑、疤痕修复、法令纹修复、减少皮肤红血丝以及收缩毛孔等）。
[0016]结合第二方面，本申请可选的实施方式中，干细胞外泌体的制备方法包括：采用间充质干细胞培养基培养间充质干细胞，收集采用间充质干细胞培养基培养间充质干细胞时的培养上清液，得到第一上清液；从第一上清液中分离得到干细胞外泌体。其中，间充质干细胞培养基包括第二上清液以及第一培养基，第二上清液的质量占第二上清液与第一培养基的总质量的50
‑
70%；第一培养基为无血清无酚红的间充质干细胞基础培养基；第二上清液为第三上清液依次经过去除细胞处理和除菌处理后所得的液相；第三上清液为采用第二培养基培养间充质干细胞时收集的培养上清液；第二培养基含有无血清无酚红的间充质干细胞基础培养基。
[0017]在上述技术方案中，将特定的第一培养基与第二上清液（采用特定的第二培养基培养的间充质干细胞时收集的培养上清液）在特定的比例下复配，得到本申请提供的间充质干细胞培养基。相比于现有技术中的间充质干细胞完全培养基，采用本申请提供的间充质干细胞培养基培养间充质干细胞时，可使得间充质干细胞分泌的干细胞外泌体的形态更佳，更有利于干细胞外泌体在应用于护肤品时充分发挥其功效，进而有利于提高组合物的护肤效果。
[0018]结合第二方面，本申请可选的实施方式中，分离操作的温度为4
‑
10℃。
[0019]在上述技术方案中，分离得到干细胞外泌体的操作温度为4
‑
10℃，可抑制第一上清液（即待分离得到干细胞外泌体的体系）中酶的活性，有利于避免第一上清液中的酶将蛋白水解成较多的杂质小分子，进而有利于保证干细胞外泌体中有效成分的含量；也有利于避免分离得到的干细胞外泌体发生聚集，干细胞外泌体中的有效成分可以分散均匀，更有利于制得的干细胞外泌体在应用于护肤品时充分发挥其功效，进而有利于提高组合物的护肤效果。
[0020]结合第二方面，本申请可选的实施方式中，去除细胞处理的步骤包括：于300
‑
400g的离心力下对第三上清液进行离心处理，然后对离心处理后所得的液相依次进行第一过滤处理和第二过滤处理，收集第二过滤处理后的液相；其中，第一过滤处理和第二过滤处理使用的滤孔孔径分别为0.4
‑
0.6μm以及0.1
‑
0.25μm。
[0021]上述技术方案，可有效去除第三上清液中游离的完整细胞、细胞凋亡小体以及细胞碎片等物质，可使得间充质干细胞分泌的干细胞外泌体的形态较佳，有利于制得的干细胞外泌体在应用于护肤品时充分发挥其功效，进而有利于提高组合物的护肤效果。
[0022]结合第二方面，本申请可选的实施方式中，第三上清液为采用第二培养基培养间充质干细胞至细胞融合度≥90%时收集的培养上清液；或/和，第三上清液为采用第二培养
基培养间充质干细胞至P4或P5代时收集的培养上清液。
[0023]上述技术方案，可使得间充质干细胞分泌的干细胞外泌体的形态较佳，有利于制得的干细胞外泌体在应用于护肤品时充分发挥其功效，进而有利于提高组合物的护肤效果。
[0024]第三方面，本申请提供一种上述第一方面提供的组合物在用于制备护肤品中的应用。
[0025]由于本申请第一方面提供的组合物可促进人皮肤成纤维细胞生长（包括促进人皮肤成纤本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种促人皮肤成纤维细胞生长的组合物，其特征在于，所述组合物包括：干细胞外泌体和重组人源化胶原蛋白；其中，所述干细胞外泌体和所述重组人源化胶原蛋白的质量比为1:（120
‑
350）。2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物为液相，所述干细胞外泌体在所述组合物中的质量浓度为15
‑
25μg/mL，所述重组人源化胶原蛋白在所述组合物中的质量浓度为3
‑
5mg/mL。3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包括生理盐水。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包括辅料，所述辅料包括生长因子、免疫因子、趋化因子、氨基酸以及维生素中的至少一种。5.一种如权利要求1
‑
4中任一项所述的组合物的制备方法，其特征在于，包括：将所述干细胞外泌体和所述重组人源化胶原蛋白按照质量比为1:（120
‑
350）进行混合。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述干细胞外泌体的制备方法包括：采用间充质干细胞培养基培养间充质干细胞，收集采用所述间充质干细胞培养基培养间充质干细胞时的培养上清液，得到第一上清液；从所述第一上清液中分离得到所述干细胞外泌体；其中，所述间充质干细胞培养基包括第二上清液以及第一培养...

【专利技术属性】
技术研发人员：段鑫，张淼，彭娟，寇大莲，詹燕玲，
申请(专利权)人：成都康景生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：