一种循环肿瘤细胞的检测及回收方法技术

本发明专利技术公开了一种循环肿瘤细胞的检测及回收方法，利用超亲水

【技术实现步骤摘要】
一种循环肿瘤细胞的检测及回收方法


[0001]本专利技术涉及一种循环肿瘤细胞的检测及回收方法，属于生物


技术介绍

[0002]循环肿瘤细胞(CTC)被定义为从原发或转移病灶中逃逸，并在外周血循环的一类肿瘤细胞，起源追溯到1869年，Thomas Ashworth首次报道乳腺癌患者外周血中发现与原发病灶相似的肿瘤细胞。如今，研究人员希望通过对CTCs的研究，改善癌症治疗格局，其中包括早期检测、实时监测治疗反应、筛选新的治疗靶点、阐明耐药性机制、提高患者的预后等。
[0003]CTC检测主要通过直接对细胞膜或细胞质抗原进行免疫染色，包括上皮、间充质、组织特异性和肿瘤相关蛋白。目前大多数CTC检测使用与FDA批准的CellSearch系统相同的鉴定步骤：用荧光标记的角蛋白抗体鉴定肿瘤细胞，而CD45染色用于白细胞排除。也可以使用前列腺特异性抗原(PSA)或乳腺特异性乳腺球蛋白(mammaglobin)对特定癌症类型CTC检测。CTC也可以使用基于核酸的策略进行检测。在mRNA或DNA水平上检测CTC需要设计PCR反应，引物用于组织特本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种循环肿瘤细胞的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、制备表面具有超亲水
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超疏水交替区域的阵列微芯片；S2、将待测样本制备成细胞悬浮液，将细胞悬浮液和探针溶液加于所述阵列微芯片表面，制备得到同时包裹细胞和探针的液滴；所述探针包含基质金属蛋白酶9特异性切割的序列，且序列两端分别修饰有荧光基团和淬灭基团；S3、孵育一段时间后，在细胞悬浮或贴壁的情况下检测阵列微芯片上的荧光变化，实现对循环肿瘤细胞的功能与活性检测。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述阵列微芯片上，超亲水区域的接触角为1
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10度。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述阵列微芯片上，超疏水区域的接触角为150
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160度。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述表面具有超亲水
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超疏水交替区域的阵列微芯片的制备方法包括以下步骤：在芯片基材表面形成蜡烛烟灰层，通过正硅酸乙酯的沉积形成碳
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二氧化硅层，经过煅烧和表面活化处理后，通过十八烷基三氯硅烷进行疏水改性得到超疏水表面，根据阵列形状设计掩膜，紫外照射后得到表面具有超亲水
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超疏水交替区域的阵列微芯片。5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：在步骤S2中，将探针溶液和细胞悬浮液分别加至阵列微芯片上滑动，得到微液滴并进行探针与细胞的混合；或将细胞悬浮液和探针溶液的混合溶液在阵列微芯片表面滑动，得到被分隔于各小单...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘坚，肖翔，缪新星，刘思迪，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：