ssc-miR-199a-3p在促进猪胚胎着床中的应用制造技术

本发明专利技术提供了ssc

【技术实现步骤摘要】
ssc
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miR
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3p在促进猪胚胎着床中的应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及ssc
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miR
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3p在促进猪胚胎着床中的应用。

技术介绍

[0002]猪胚胎着床发生在猪妊娠第12天，胚胎着床是母体与胚胎间相互识别，囊胚的滋养层细胞与子宫内膜上皮细胞逐步建立组织和生理上的联系，使得囊胚稳定在子宫内发育的过程。在胚胎着床期间，胚胎形态会发生由管状胚胎转变为细丝状的急剧性改变以便更好地与母体接触，母体的雌激素水平也会在此时达到峰值并成为母体识别胚胎的信号并促进胚胎的着床。
[0003]胚胎成活率的高低是影响母猪的繁殖性能的主要因素之一，在猪的整个妊娠过程中，胚胎最终存活数仅占早期胚胎的60％左右，其中约有20％～30％的胚胎死亡发生在妊娠早期和中期，造成了胚胎资源的严重浪费，制约了母猪的繁殖性能。母猪繁殖性能是衡量养猪业生产技术水平和生产效率的重要指标，母猪繁殖性能的低下严重制约了养猪业总体效率的提高，直接影响到猪场的经济效益。
[0004]microRNA(miRNA)是一种大小约20
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23个核苷酸的内源性非编码RNA，可与mRNA 3'
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UTR片段结合抑制mRNA翻译或促进mRNA降解进而起到调控机体功能的作用。现有研究对于猪体内的microRNA(miRNA)主要被用作母猪妊娠的诊断，如现有技术《一种血清外泌体ssc
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5p作为母猪早期妊娠诊断分子标志物的应用》中通过判断血清外泌体ssc
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5p的含量来确定母猪的妊娠情况；再如，研究表明miR
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3p在梅山猪妊娠阶段的子宫内膜中高表达，miR
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3p可作为诊断妊娠和母猪繁殖性能的一种新型的分子标志物(Sequence analysis of microRNAs during pre
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implantation between Meishan and Yorkshire pigs)。然而胚胎着床是另一生理过程，能够用于表征诊断妊娠情况的分子，是否可以促进猪胚胎着床是不得而知的。通过调控miRNA nengfou来促进猪胚胎着床的方案还未见报道。研究对猪胚胎着床过程有直接影响的miRNA具有重要价值。

技术实现思路

[0005]本专利技术针对猪自发性胎儿丢失率高的问题，旨在提供ssc
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3p在促进猪胚胎着床中的应用，提高猪胚胎着床的成功率，提高母猪的繁殖性能，提高猪场的经济效益。
[0006]本专利技术的首要目的在于提供ssc
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3p在促进猪胚胎着床中的应用，或在制备促进猪胚胎着床的产品中的应用。
[0007]本专利技术的再一目的在于提供促进ssc
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3p表达的试剂在促进猪胚胎着床中的应用，或在制备促进猪胚胎着床产品中的应用。
[0008]本专利技术的又一目的在于提供ssc
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3p在提高猪胚胎滋养层细胞增殖/迁移能力和/或抑制胚胎滋养层细胞细胞凋亡中的应用，或在制备提高猪胚胎滋养层细胞增
殖/迁移能力和/或抑制胚胎滋养层细胞细胞凋亡的产品中的应用。
[0009]本专利技术的又一目的在于提供促进ssc
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3p表达的试剂在提高猪胚胎滋养层细胞增殖/迁移能力和/或抑制胚胎滋养层细胞细胞凋亡中的应用，或在制备提高猪胚胎滋养层细胞增殖/迁移能力和/或抑制胚胎滋养层细胞细胞凋亡的产品中的应用。
[0010]本专利技术的又一目的在于提供促进ssc
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3p表达的试剂在抑制猪ACSL4基因表达中的应用，或在制备抑制猪ACSL4基因表达的产品中的应用。
[0011]本专利技术的又一目的在于提供抑制猪ACSL4基因表达的试剂在促进猪胚胎着床中的应用，或在制备促进猪胚胎着床产品中的应用。
[0012]本专利技术的又一目的在于提供抑制猪ACSL4基因表达的试剂在提高猪胚胎滋养层细胞增殖/迁移能力和/或抑制胚胎滋养层细胞细胞凋亡中的应用，或在制备提高猪胚胎滋养层细胞增殖/迁移能力和/或抑制胚胎滋养层细胞细胞凋亡的产品中的应用。
[0013]本专利技术的又一目的在于提供一种促进猪胚胎着床的产品，或提高猪胚胎滋养层细胞增殖/迁移能力和/或抑制胚胎滋养层细胞细胞凋亡的产品，其特征在于，包含促进ssc
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3p表达的试剂，和/或抑制猪ACSL4基因表达的试剂。
[0014]本专利技术的又一目的在于提供一种促进猪胚胎着床的方法。
[0015]本专利技术通过一下技术方案实现上述专利技术目的：
[0016]本专利技术研究得出，ssc
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3p的高表达可显著促进PTr2细胞的增殖和迁移能力并抑制其凋亡，而下调ssc
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3p则会抑制PTr2细胞的增殖和迁移能力并促进其凋亡；进一步通过miRanda、RNAhybrid、PITA三种工具分析得到ACSL4是ssc
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3p的靶基因，并通过双荧光素酶报告基因、RT
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qPCR、Western Blot三重验证进一步确定了二者存在靶向关系，这表明ssc
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3p通过调控ACSL4参与猪胚胎着床过程，具体的，促进了ssc
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3p的表达抑制ACSL4基因的表达，进而促进PTr2细胞的增殖和迁移能力并抑制其凋亡，提高猪胚胎着床的成功率；抑制ssc
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3p的表达促进了ACSL4基因的表达，进而抑制了PTr2细胞的增殖和迁移能力并促进其凋亡，猪胚胎着床的成功率下降；实验结果也进一步表明，ACSL4基因是猪胚胎着床过程中的关键基因，通过抑制猪ACSL4基因的表达可以提高猪胚胎着床的成功率，促进猪ACSL4基因的表达则会降低猪本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.ssc
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3p在促进猪胚胎着床中的应用，或在制备促进猪胚胎着床的产品中的应用。2.促进ssc
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3p表达的试剂在促进猪胚胎着床中的应用，或在制备促进猪胚胎着床产品中的应用。3.ssc
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3p在提高猪胚胎滋养层细胞增殖/迁移能力和/或抑制胚胎滋养层细胞细胞凋亡中的应用，或在制备提高猪胚胎滋养层细胞增殖/迁移能力和/或抑制胚胎滋养层细胞细胞凋亡的产品中的应用。4.促进ssc
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3p表达的试剂在提高猪胚胎滋养层细胞增殖/迁移能力和/或抑制胚胎滋养层细胞细胞凋亡中的应用，或在制备提高猪胚胎滋养层细胞增殖/迁移能力和/或抑制胚胎滋养层细胞细胞凋亡的产品中的应用。5.促进ssc
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3p表达的试剂在抑制猪ACSL4基因表达中的应用，或在制备抑制猪ACSL4基因表达的产品中的应用。6.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪林君，吴珍芳，丁悦，胡群，顾婷，蔡更元，李紫聪，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：