一种基于质谱仪快速分析兽药残留的检测方法技术

本发明专利技术涉及食品检测技术领域，其目的在于提供了一种基于质谱仪快速分析兽药残留的检测方法，包括以下步骤：1)试样制备及前处理；2)称取及浸提；3)除脂净化及上机检测；4)标准溶液配制；5)化合物优化。本发明专利技术通过建立不同类别动物源性食品中恩诺沙星残留量测定方法，样品前处理手段简单且易于控制，不仅有效解决了EDTA

【技术实现步骤摘要】
一种基于质谱仪快速分析兽药残留的检测方法


[0001]本专利技术属于食品检测
，具体涉及一种基于质谱仪快速分析兽药残留的检测方法。

技术介绍

[0002]恩诺沙星作为第三代喹诺酮类药物，具有广谱的抗菌性和较强的杀菌性，毒副作用小等特点，通过恩诺沙星药效学和药代动力学表明，其具有较好的应用前景，能够广泛应用于陆生和水生动物等疾病的治疗，且效果较好，但恩诺沙星及代谢产物环丙沙星在动物体内的残留量，如果将其作为人类动物源性食品，对人类具有潜在的危害。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的在于提供一种基于质谱仪快速分析兽药残留的检测方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0004]为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是：
[0005]一种基于质谱仪快速分析兽药残留的检测方法，包括如下步骤：
[0006]1)试样制备及前处理
[0007]选取一种动物源性食品作为样品，经不锈钢高速多功能粉碎机均匀捣碎，采用四分法，取其中一份样品装入干净的塑封袋中备用；
[0008]2)称取及浸提
[0009]称取处理好的试样5.0g，放置在50mL聚丙烯离心管中并准确加入20.0mL2％甲酸乙腈溶液，在冰浴环境下高速均质，以转速为20000～25000r/min浸提3～5min，将离心管取出后，在冷冻离心机中以转速为8000～10000r/min离心2～3min，重复上述操作一次，合并上清液，再准确加入10.0mL2％甲酸乙腈溶液，提取一次，合并上清液；
>[0010]3)除脂净化及上机检测
[0011]移取40.0～60.0mL正己烷和10.0～20.0mL乙腈转移至分液漏斗中，两种溶剂混合，剧烈震荡，静置5～10min至分层，取上层液体为乙腈饱和的正己烷；
[0012]将步骤2)中得到的上清液倒入装有乙腈饱和的正己烷分液漏斗中，剧烈摇晃，定时脱气，防止漏液，去除油脂，静置5～10min至分层，收集下层溶液，并将收集的下层溶液放置到氮吹仪中，45℃吹至近干，0.5～1.0mL一级水定容，0.22μm有机滤头过滤，上机检测；
[0013]其中液相色谱条件如下：
[0014]色谱柱：Syncronis C18，规格为100
×
2.1mm，1.7μm；
[0015]进样量：10μL；
[0016]柱温：35℃；
[0017]流速：0.25min/mL；
[0018]流动相：A相为含有100％乙腈的有机相；D相为含有0.1％甲酸水的水相；梯度洗脱条件为：
[0019]时间/minA相/％D相/％0.0010900.5010902.6090104.0090105.0010906.001090
[0020]4)标准溶液配制
[0021]储备液制备：取浓度为100μg/mL恩诺沙星原标准溶液，用甲醇稀释配制成10.0μg/mL的储备液；
[0022]基质加标标准工作曲线的制备：称取与试样基质相应的不含有待测物的阴性样品5.0g，分别加入不同体积浓度为10.0μg/mL恩诺沙星的储备液，与试样同时进行提取和净化，氮吹完毕后，用一级水定容，分别配制成5.0ng/mL、10.0ng/mL、50.0ng/mL、100.0ng/mL、500.0ng/mL、1000.0ng/mL的含有相应基质的标准系列溶液；
[0023]5)化合物优化
[0024]标准溶液配制：将浓度为10μg/mL恩诺沙星中间储备液，用色谱级别的甲醇进行稀释，配置成浓度为1μg/mL的标准溶液进行质谱条件的优化；
[0025]质谱条件优化：通过调整包括喷雾电压(V)、鞘气压力(Arb)、辅助气压力(Arb)、毛细管温度(℃)、雾化器温度(℃)等离子源参数，使该物质的母离子和子离子碎片能够达到最大程度的响应，提高恩诺沙星检测的灵敏度；
[0026]液相条件优化：通过调整流动相的流速、液相有机相和水相的比例，以及梯度洗脱条件等，提高恩诺沙星的响应值及灵敏度。
[0027]所述步骤3)中的质谱条件如下：
[0028]离子源：电喷雾电离ESI；
[0029]扫描方式：正离子扫描ESI+；
[0030]检测方式：多反应监测MRM。
[0031]综上所述，由于采用了上述技术方案，本专利技术的有益效果是：
[0032]1)本专利技术通过建立不同类别动物源性食品中恩诺沙星残留量测定方法，样品前处理手段简单且易于控制，不仅有效解决了EDTA
‑
Mcllvaine作为缓冲液对动物源性样品提取后经过HLB固相萃取小柱净化过程中严重堵柱的情况，还利用高效液相色谱
‑
串联质谱仪，快速测定其含量测定；
[0033]2)本专利技术的灵敏度高、选择性好、线性范围宽、适用范围广，能够快速的测定不同类别的动物源性食品中恩诺沙星残留量，具有抗基质干扰能力强等优点，结合前处理和仪器检测的优势，能够准确测定动物源性食品中恩诺沙星残留量，对人体和环境危害程度的确定提供相应的参考价值。
具体实施方式
[0034]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全
部的实施例。
[0035]因此，以下对提供的本专利技术的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本专利技术的范围，而是仅仅表示本专利技术的选定实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0036]实施例1
[0037]本专利技术所述的一种基于质谱仪快速分析兽药残留的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
[0038]1)试样制备及前处理
[0039]选取一种动物源性食品作为样品，经不锈钢高速多功能粉碎机均匀捣碎，采用四分法，取其中一份样品装入干净的塑封袋中备用；
[0040]2)称取及浸提
[0041]称取处理好的试样5.0g，放置在50mL聚丙烯离心管中并准确加入20.0mL2％甲酸乙腈溶液，在冰浴环境下高速均质，以转速为20000～25000r/min浸提3～5min，将离心管取出后，在冷冻离心机中以转速为8000～10000r/min离心2～3min，重复上述操作一次，合并上清液，再准确加入10.0mL2％甲酸乙腈溶液，提取一次，合并上清液；
[0042]3)除脂净化及上机检测
[0043]移取40.0～60.0mL正己烷和10.0～20.0mL乙腈转移至分液漏斗中，两种溶剂混合，剧烈震荡，静置5～10min至分层，取上层液体为乙腈饱和的正己烷；
[0044]将步骤2)中得到的上清液倒入装有乙腈饱和的正己烷分液漏斗中，剧烈摇晃，定时脱气，防止漏液，去除油脂，静置5～10min至分层，收集下层溶液，并将收集的下层溶液放置到氮吹仪中，45℃吹至近干，0.本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于质谱仪快速分析兽药残留的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：1)试样制备及前处理选取一种动物源性食品作为样品，经不锈钢高速多功能粉碎机均匀捣碎，采用四分法，取其中一份样品装入干净的塑封袋中备用；2)称取及浸提称取处理好的试样5.0g，放置在50mL聚丙烯离心管中并准确加入20.0mL2％甲酸乙腈溶液，在冰浴环境下高速均质，以转速为20000～25000r/min浸提3～5min，将离心管取出后，在冷冻离心机中以转速为8000～10000r/min离心2～3min，重复上述操作一次，合并上清液，再准确加入10.0mL2％甲酸乙腈溶液，提取一次，合并上清液；3)除脂净化及上机检测移取40.0～60.0mL正己烷和10.0～20.0mL乙腈转移至分液漏斗中，两种溶剂混合，剧烈震荡，静置5～10min至分层，取上层液体为乙腈饱和的正己烷；将步骤2)中得到的上清液倒入装有乙腈饱和的正己烷分液漏斗中，剧烈摇晃，定时脱气，防止漏液，去除油脂，静置5～10min至分层，收集下层溶液，并将收集的下层溶液放置到氮吹仪中，45℃吹至近干，0.5～1.0mL一级水定容，0.22μm有机滤头过滤，上机检测；其中液相色谱条件如下：色谱柱：Syncronis C18，规格为100
×
2.1mm，1.7μm；进样量：10μL；柱温：35℃；流速：0.25min/mL；流动相：A相为含有100％乙腈的有机相；D相为含有0.1％甲酸水的水相...

【专利技术属性】
技术研发人员：张妍楠，常诚，赵康平，常青，张永国，
申请(专利权)人：甘肃国信润达分析测试中心，
类型：发明
国别省市：