组合物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物新材料技术领域，特别涉及组合物及其应用。本发明专利技术提供了一种新型羧基磁微粒封闭液，主要成分包括：CB缓冲液、甲氧基聚乙二醇胺、牛磺酸。此封闭液用于增强羧基磁微粒包被后亲水性，采用的CB缓冲液、甲氧基聚乙二醇胺、牛磺酸联用的封闭+清洗措施，能够有效封闭羧基磁微粒包被完成后残留的活性基团，并同时增强磁微粒水和层及带电性质，起到改善羧基磁微粒包被蛋白后的存放凝集问题，并能够减少磁微粒组分在化学发光检测过程中的非特异性吸附。性吸附。

【技术实现步骤摘要】
组合物及其应用


[0001]本专利技术涉及生物新材料
，特别涉及组合物及其应用。

技术介绍

[0002]磁微粒作为化学发光免疫检测中的主要固相载体，具有超顺磁性、比表面积高等应用优势。作为一种以聚苯乙烯为制备高分子材料，磁微粒本身具有一定的疏水性质，疏水性质导致其在应用过程中既表现出一定的优势，同时也存在缺点。其优势在于，疏水作用本身有助于蛋白吸附，能保证在包被的过程中吸附上足量的蛋白，确保检测产品足够的灵敏度。其缺点在于，疏水作用使磁微粒极易在储存过程中发生凝集，这种凝集会使磁微粒在检测过程中难以混合均匀，影响检测结果和客户感官。包被后的磁微粒如果封闭不够彻底，也会受到较大疏水作用力的影响，在检测中吸附酶结合物，导致测试结果本底严重偏高，影响检测梯度。
[0003]在常规的磁微粒包被工艺中，通常使用含蛋白(如BSA)的封闭液进行封闭和保存，但是由于蛋白体积相对较大，活化过程中产生的活性基团未必能够完全被蛋白封闭，造成检测过程酶吸附，而包被活材的疏水性结构也会造成酶吸附。
[0004]现有报道的文献或专利中，暂未发现以减少非特异性吸附及磁微粒凝集的此三种化合物联用的清洗封闭双功能处理液，因此提供此种双功能处理液具有重要的意义。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术提供的组合物及其应用，能降低磁微粒的本底发光值、减少磁微粒存放过程中产生的凝集颗粒。
[0006]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0007]本专利技术提供了组合物，包括碱性缓冲液、PEG
‑
NH2类化合物和牛磺酸；
[0008]所述碱性缓冲液包括CB缓冲液；
[0009]所述PEG
‑
NH2类化合物包括甲氧基聚乙二醇胺、聚乙二醇胺或Y型聚乙二醇胺中的一种或多种。
[0010]在本专利技术的一些具体实施方案中，上述组合物包括：
[0011]所述碱性缓冲液的浓度为0.05mol/L；和/或
[0012]所述PEG
‑
NH2类化合物的浓度为10～50mg/mL。
[0013]在本专利技术的一些具体实施方案中，上述组合物包括：
[0014]所述CB缓冲液包括1.59g/L碳酸钠和2.93g/L碳酸氢钠；和/或
[0015]所述甲氧基聚乙二醇胺的浓度为10～50mg/mL；和/或
[0016]所述牛磺酸的浓度为5～10mg/mL。
[0017]在本专利技术的一些具体实施方案中，上述组合物包括：
[0018]所述甲氧基聚乙二醇胺的分子量为2000～20000；和/或
[0019]所述聚乙二醇胺的分子量为5000；和/或
[0020]所述Y型聚乙二醇胺的分子量为15000。
[0021]本专利技术还提供了上述组合物在如下任意项中的应用：
[0022](I)、减少磁微粒表面的疏水作用；和/或
[0023](II)、减少磁微粒的非特异性吸附；和/或
[0024](III)、减少磁微粒在储存过程中凝集；和/或
[0025](IV)、降低化学发光免疫检测中的本底发光值；和/或
[0026](V)、提高化学发光免疫检测中的发光值梯度；和/或
[0027](VI)、磁微粒的封闭；和/或
[0028](VII)、磁微粒的清洗；和/或
[0029](VIII)、制备磁微粒封闭液；和/或
[0030](IX)、制备磁微粒清洗液；和/或
[0031](X)、制备磁微粒清洗封闭双功能处理液。
[0032]本专利技术提供了磁微粒的处理液，包括上述组合物，以及可接受的辅料或助剂；
[0033]所述处理液包括封闭液、清洗液或清洗封闭双功能处理液。
[0034]本专利技术还提供了上述处理液的制备方法，包括如下步骤：
[0035]步骤(1)：取1.59g碳酸钠、2.93g碳酸氢钠和1000mL水混合，获得CB缓冲液；
[0036]步骤(2)：取步骤(1)所述CB缓冲液与10g甲氧基聚乙二醇胺、5g牛磺酸混合均匀，获得所述处理液。
[0037]本专利技术还提供了磁微粒的封闭方法，包括：取封闭试剂与磁微粒混合，反应30～120min，结束封闭；
[0038]所述封闭试剂包括上述组合物、上述处理液或上述制备方法制得的处理液。
[0039]本专利技术还提供了磁微粒的清洗方法，包括：取清洗试剂与磁微粒混合，反应10min，去除上清，重复3次，结束清洗；
[0040]所述清洗试剂包括上述组合物、上述处理液或上述制备方法制得的处理液。
[0041]本专利技术的组合物有如下效果：
[0042]1、实验表明，使用新型封闭液处理过的磁微粒本底相较常规工艺降低50％以上，导致梯度提高一倍，有助于特异性的提升；
[0043]2、实验表明，常规工艺和新型封闭液包被磁微粒后进行6个月4℃静置保存后使用检测仪混匀器混匀1h，常规工艺混匀后仍存在较强的颗粒感，而新型封闭液处理后的磁微粒则无明显颗粒感，即磁微粒抗储存凝集性能有明显提升，更不易形成颗粒。
附图说明
[0044]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
[0045]图1示实施例1两种工艺储存凝集效果对比；
[0046]图2示实施例2添加甲氧基聚乙二醇胺或其他聚乙二醇类衍生物时的凝集效果对比；
[0047]图3示实施例3添加不同牛磺酸含量时的凝集效果对比；
[0048]图4示实施例4添加不同牛磺酸替代物时的凝集效果对比。
具体实施方式
[0049]本专利技术公开了组合物及其应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。
[0050]本专利技术使用CB缓冲液、甲氧基聚乙二醇胺、牛磺酸联用技术，制备了一种新型磁微粒无蛋白封闭清洗双功能处理液，其原理是利用类PEG
‑
NH2衍生物如甲氧基聚乙二醇胺的氨基，使其与磁微粒表面未参与反应的活化基团反应，产生水和合层，减少非特异性吸附；利用牛磺酸上的氨基，使其与磁微粒表面未参与反应的活化基团反应，使包被后磁微粒产生强负电荷，增强磁微粒分散性能；利用CB缓冲液碱性条件，使一部分吸附不牢固的活性材料脱落，减少非特异性吸附，三种成分联用有助于增强磁微粒水合层，增加亲水性，减少非特异性吸附，减少疏水作用引起的磁微粒存放凝集现象。此三种方式同时作用，能有效减轻因疏水非特异性吸附问题引起的磁微粒性能问题。
[0051]新型羧基磁性微粒封闭液使用方法为：将羧基磁性微粒使用PBS缓冲液清本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.组合物，其特征在于，包括碱性缓冲液、PEG
‑
NH2类化合物和牛磺酸；所述碱性缓冲液包括CB缓冲液；所述PEG
‑
NH2类化合物包括甲氧基聚乙二醇胺、聚乙二醇胺或Y型聚乙二醇胺中的一种或多种。2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，包括：所述碱性缓冲液的浓度为0.05mol/L；和/或所述PEG
‑
NH2类化合物的浓度为10～50mg/mL。3.如权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，包括：所述CB缓冲液包括1.59g/L碳酸钠和2.93g/L碳酸氢钠；和/或所述甲氧基聚乙二醇胺的浓度为10～50mg/mL；和/或所述牛磺酸的浓度为5～10mg/mL。4.如权利要求1至3任一项所述的组合物，其特征在于，包括：所述甲氧基聚乙二醇胺的分子量为2000～20000；和/或所述聚乙二醇胺的分子量为5000；和/或所述Y型聚乙二醇胺的分子量为15000。5.如权利要求1至4任一项所述的组合物在如下任意项中的应用：(I)、减少磁微粒表面的疏水作用；和/或(II)、减少磁微粒的非特异性吸附；和/或(III)、减少磁微粒在储存过程中凝集；和/或(IV)、降低化学发光免疫检测中的本底发光值；和/或(V)、提高化学发光免疫检测中的发光值梯度；和/或(VI)、磁微粒的封闭；和/或(VII)、磁微粒的清洗；和/或(VIII)、制备磁微粒封闭液；和/或(IX)、制备磁微粒清洗液；和/或(X)、制备磁微粒清洗封闭双功能处理液。6.磁微粒的处理液，其特征在于，包括如权利要求1至4任一项所...

【专利技术属性】
技术研发人员：闫淼，王玉堂，渠海，韩京羽，付光宇，吴学炜，
申请(专利权)人：郑州安图生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：