一种羟基磷酸钙及其对RAW264.7细胞吞噬活性功能增强的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种羟基磷酸钙及其对RAW264.7细胞吞噬活性功能增强的应用，制备羟基磷酸钙时，在高压反应时，加入二乙二醇乙醚醋酸酯，所制备羟基磷酸钙呈现出球状堆积结构，得到的羟基磷酸钙粒子间相互连接堆积为环状结构，呈现出发达的孔隙，1次粒子粒径为100

【技术实现步骤摘要】
一种羟基磷酸钙及其对RAW264.7细胞吞噬活性功能增强的应用


[0001]本专利技术属于细胞生物学
，具体涉及一种羟基磷酸钙及其对RAW264.7细胞吞噬活性功能增强的应用。

技术介绍

[0002]巨噬细胞(Macrophages)是一种位于组织内的白血球，源自单核细胞，通过吞噬自体受损细胞或外源病原体在机体发育、免疫、炎症反应和多种疾病发生中发挥重要作用。巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞属于吞噬细胞，在机体免疫功能中发挥着重要的角色。巨噬细胞容易获得，便于培养，并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群，在条件适宜下可生活2
‑
3周，多用做原代培养，难以长期生存。已有的研究表明，生物机体内的巨噬细胞可以随着微环境的变化而改变它们的表型和免疫功能，不断根据自身受到的刺激来改变自己的生理状态和免疫活性，从而更好的保证生物体机体和组织的健康。不同的刺激物质包括机体自身蛋白分子、小分子物质、真菌和细菌的提取物等能够刺激并激活巨噬细胞，从而增强巨噬细胞免疫反应和吞噬能力。这也就是说，几乎每一种人类疾病都涉及巨噬细胞，巨噬细胞也是主要治疗目标，因为巨噬细胞的功能可以被加强或抑制，以改变疾病的结果。因此，提高巨噬细胞的吞噬活性有助于机体免疫水平的提高和多种疾病的治疗。
[0003]钙(calcium)是生物体内含量最丰富的矿物元素，足量钙摄入对维持动物正常的骨矿物含量、骨密度，达到高骨量峰值至关重要。此外，钙离子还参与生物体内多种生理功能，如血液凝固，维持心脏、肌肉、神经正常兴奋性，信号传导，以及膜的通透性等。
[0004]羟基磷酸钙(Ca
10
(PO4)6(OH)2)(HAP),由于具有优良的生物相容性，生物活性以及高的化学稳定性和力学性能，在生物材料、陶瓷材料和悬浮分散材料等方面都有较广泛的应用。例如在生物材料领域其可作为生物相容性能好的人体骨修复材料、具有能刺激骨细胞生长并自行同步降解等特点。羟基磷酸钙，具有优良的生物相容性和生物活性，是牙齿中比较坚硬的物质，也是骨骼的主要组成成分。在石化行业悬浮聚合中，羟基活性磷酸钙因其具有使聚合树脂粒度分布集中，反应温度、压力平稳，物料不易粘反应釜壁和搅拌器，可延长清釜周期，而且容易清洗，聚合工艺稳定，可提高产品的外观质量和透明度，明显提高了产品档次，是当今悬浮聚合所用的重要无机分散剂材料。
[0005]目前，羟基磷酸钙粉体的合成方法主要可分为液相法和高温固相法两大类。由于高温固相法烧结温度高，球磨能耗大，且很大达到微观层次的混合，所以在羟基磷酸钙的制备中应用相对较小；而液相法，包括热反应法、水解法、化学沉淀法、溶胶凝胶法、气溶胶分解法、以及微乳液法和中和反应法等是合成羟基磷酸钙的主要方法。在液相法合成羟基磷酸钙过程中，常用的钙源反应物主要有硝酸钙，石灰石、氧化钙、氢氧化钙、磷酸氢钙、氯化钙等，故在羟基磷酸钙的制造过程中会消耗大量的含钙天然矿物或高品质含钙试剂，其大量的开采和消耗不仅会造成资源枯竭同时也会造成山体和植被的破坏，且成本高，另外制
备羟基磷酸钙粉体颗粒组成和大小不均匀。常用的无机钙有石灰石粉、贝壳粉等。石灰石粉又称石粉，为天然碳酸钙(CaCO3)。天然的石灰石中，因为矿床伴生问题，铅、汞、砷、氟的含量容易超标，且石粉遇到胃酸会生产二氧化碳，容易引起打嗝反胃等。贝壳粉是各种贝类外壳(蚌壳、牡蛎壳、哈蜊壳、螺蛳壳等)经加工粉碎而成的粉状或粒状产品，多呈灰白色、灰色、灰褐色。贝壳粉内常掺杂砂石和泥土等杂质，使用时应注意检查。另外若贝肉未除尽，加之贮存不当，堆积日久易出现发霉、腐臭等情况，且贝壳粉受产地影响，运到内地的费用较高，加上需要清理再粉碎，相比石粉，贝壳粉的成本要高上不少。有机钙虽然生物利用率比无机钙高，但价格昂贵。微量元素钙的生物利用率大小与其存在的形态密切相关。传统无机微量元素钙的生物利用率一般较低，大部分不是专门生产用于饲料中，因此需要特别注意其含有的铅、砷、镉、二噁英、多氯联苯等必须严格控制在国家许可的范围内。
[0006]在大多数脊椎动物细胞中，吞噬作用是保护机体处于健康状态的措施而非摄食的手段，吞噬作用的强弱是表现巨噬细胞免疫功能强弱及活性的重要标志，通过免疫细胞的吞噬作用，可以直接研究免疫学中巨噬细胞的相关作用，并深入揭示细胞吞噬这一动态过程。目前，没有羟基磷酸钙在增强巨噬细胞吞噬活性的报道。

技术实现思路

[0007]针对现有技术中对巨噬细胞产生刺激物质比较局限，对于巨噬细胞吞噬能力的增强效果有待提高的问题，本专利技术提供了一种羟基磷酸钙及其对RAW264.7细胞吞噬活性功能增强的应用，制备得到一种羟基磷酸钙，应用到RAW264.7细胞中，可以增强RAW264.7细胞吞噬活性功能的增强。
[0008]本专利技术的目的通过以下技术方案来实现：
[0009]一种羟基磷酸钙的制备方法，包括如下步骤：
[0010]1)将钙源、含磷固体原料和去离子水混合于密闭容器中，再加入相当于去离子水质量2.0
‑
3.0％的二乙二醇乙醚醋酸酯，进行高压反应，所述钙源中的钙与所述含磷固体原料中的磷的摩尔比控制为(11
‑
13):6，所述的钙源与含磷固体原料的总质量和去离子水的质量比为1:(8
‑
10)；高压反应的压力控制在0.5
‑
0.8MPa，反应温度控制在160
‑
200℃，反应时间为1.0
‑
2.0h；
[0011]所述的钙源，选自氢氧化钙、氧化钙、氯化钙中的一种或几种，混合时为任意比例；
[0012]所述的含磷固体原料，选自磷酸氢钾、磷酸二氢钾、磷酸氢钠、磷酸二氢钠、磷酸钾、磷酸钠、焦磷酸钾、三聚磷酸钾、焦磷酸钠、三聚磷酸钠、焦磷酸一氢三钠、焦磷酸钙、六偏磷酸钾或六偏磷酸钠中的一种或几种，混合时为任意比例；
[0013]2)上步骤的高压反应完成后，将高压反应的密闭容器瞬间卸压，时间为1
‑
3s；
[0014]3)上步骤的卸压后，将得到的物料进行真空干燥，得到羟基磷酸钙，羟基磷酸钙的1次粒子粒径为100
‑
150nm，羟基磷酸钙的孔径范围在120
‑
350nm。
[0015]本专利技术中：
[0016]步骤1)所述的钙源，选自氢氧化钙或氧化钙。
[0017]步骤1)所述的含磷固体原料，选自磷酸氢钾、磷酸氢钠、磷酸二氢钠、磷酸钾、磷酸钠、焦磷酸一氢三钠中的一种或几种，混合时为任意比例。
[0018]步骤1)所述钙源中的钙与所述含磷固体原料中的磷的摩尔比控制为(12
‑
13):6，
所述的钙源与含磷固体原料的总质量和去离子水的质量比为1:(8
‑
9)。
[0019]步骤1)中所述高压反应的压力控制在0.5
‑
0.8MPa，控制适当的压力提高反应速度，同时，有利于容器中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种羟基磷酸钙的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：1)将钙源、含磷固体原料和去离子水混合于密闭容器中，再加入相当于去离子水质量2.0
‑
3.0％的二乙二醇乙醚醋酸酯，进行高压反应，所述钙源中的钙与所述含磷固体原料中的磷的摩尔比控制为(11
‑
13):6，所述的钙源与含磷固体原料的总质量和去离子水的质量比为1:(8
‑
10)；高压反应的压力控制在0.5
‑
0.8MPa，反应温度控制在160
‑
200℃，反应时间为1.0
‑
2.0h；所述的钙源，选自氢氧化钙、氧化钙、氯化钙中的一种或几种，混合时为任意比例；所述的含磷固体原料，选自磷酸氢钾、磷酸二氢钾、磷酸氢钠、磷酸二氢钠、磷酸钾、磷酸钠、焦磷酸钾、三聚磷酸钾、焦磷酸钠、三聚磷酸钠、焦磷酸一氢三钠、焦磷酸钙、六偏磷酸钾或六偏磷酸钠中的一种或几种，混合时为任意比例；2)上步骤的高压反应完成后，将高压反应的密闭容器瞬间卸压，时间为1
‑
3s；3)上步骤的卸压后，将得到的物料进行真空干燥，得到羟基磷酸钙，羟基磷酸钙的1次粒子粒径为100
‑
150nm，羟基磷酸钙的孔径范围在120
‑
350nm。2.根据权利要求1所述的羟基磷酸钙的制备方法，其特征在于：步骤1)所述的钙源...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄诗宇，周长虹，彭红星，陶建军，冯伶俐，黄逸强，
申请(专利权)人：长沙兴嘉生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：