人造细胞生物传感系统及其制备方法和应用技术方案

本发明专利技术公开了人造细胞生物传感系统及其制备方法和应用，所述生物传感系统为采用压力微流体装置在PDMS芯片内制备DOPC人造脂质体细胞，细胞内包裹有W1、W2、SUB三种核酸链，Mg

【技术实现步骤摘要】
人造细胞生物传感系统及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于生物分析化学
，涉及一种针对结肠癌或胃癌早期诊断的人造细胞模型，具体为人造细胞生物传感系统及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]金属离子不仅在体内代谢活动、体内平衡、生物化学催化反应和细胞信号转导过程中具有不可或缺的重要性，还可以作为酶的辅助因子，在细胞内的各种生物活动中发挥着重要作用。镁离子(Mg
2+
)作为微量元素，生理浓度为0.5～3mM。与此同时，miRNAs的异常表达与各种疾病的发展程度密切相关。因此，准确、灵敏地检测miRNAs可以实现对疾病的早期诊断和及时治疗。Let
‑
7的miRNA家族有12个成员(从let
‑
7a到let
‑
7i)，其中let
‑
7a的异常表达可导致胃癌、前列腺癌、宫颈癌等多种侵袭性癌症的发生。目前，人们开发了具有扩增速度快、检测准确、灵敏度高等优点的等温扩增技术，例如杂交链式反应(HCR)、链置换扩增、双特异性核酸酶扩增、金属离子依赖性DNA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.人造细胞生物传感系统，其特征在于，所述生物传感系统为采用压力微流体装置在PDMS芯片内制备DOPC人造脂质体细胞，细胞内包裹有W1、序列为SEQ ID NO.1，W2、序列为SEQ ID NO.2，SUB、序列为SEQ ID NO.3的三种核酸链，Mg
2+
和THT荧光染料，细胞膜上插有CNTs；所述DOPC人造脂质体细胞与目标物脂质体相互融合后，引发Mg
2+
特异性核酸酶的切割循环反应，实现荧光信号放大。2.权利要求1所述的人造细胞生物传感系统的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：S1、CNTs的纯化和切割将CNTs置于马弗炉中400～500℃煅烧除杂，然后溶于PBS溶液中形成碳纳米管溶液，再倒入表面附着有一层干燥DOPC的离心管中，涡旋震荡后37℃孵育，使DOPC均匀包裹在CNTs表面；然后转入PBS溶液中，超声波细胞破碎仪切割处理、高速离心得到CNTs溶液；S2、制备微流体装置中的油相将DOPC溶解于CHCl3中，然后采用氮吹方式将氯仿吹干，干燥过夜后在离心管内壁形成干燥的单层DOPC膜，向离心管内加入正辛醇，涡旋震荡使DOPC均匀混合在正辛醇中；S3、制备微流体装置外水相配制质量分数为2％的PVA溶液，向其中加入质量分数为1％的P188溶液，从而增加人造脂质体细胞的分散性，防止脂质体细胞的聚集；S4、制备微流体装置内水相将质量分数为2％的PVA溶液用PBS溶液稀释成质量分数为0.5％的PVA溶液，然后将W1、W2、SUB三种核酸链、氯化镁和THT荧光染料溶解在0.5％的PVA溶液中，涡旋...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈薇，曾学民，王丽娜，唐盛，张景慧，马紫玉，苗紫昀，
申请(专利权)人：江苏科技大学，
类型：发明
国别省市：