一种单萜吲哚类生物碱及其制备方法、用途技术

本发明专利技术提供一种单萜吲哚类生物碱及其制备方法、用途，属于天然产物提取技术领域。该单萜吲哚类生物碱提取分离自马钱子，其化学结构式如式Ⅰ所示。经鉴定，该化合物为protostrychnine型生物碱，分子式为C

【技术实现步骤摘要】
一种单萜吲哚类生物碱及其制备方法、用途


[0001]本专利技术涉及天然产物提取
，具体涉及一种单萜吲哚类生物碱及其制备方法、用途。

技术介绍

[0002]马钱子，是马钱科马钱属植物马钱(Strychnos nux
‑
vomica L.)的干燥种子，又名番木鳖、苦实等。主产于印度、越南、缅甸等国，我国的云南、广东、广西等地为主要栽培区。其药用部位为马钱的干燥种子，即药用马钱子，马钱子作为中药始载于《本草纲目》，谓之“状似马之连钱，故名马钱”。马钱子性寒、味苦、有剧毒，具有通筋活络、祛风除湿、散结消肿等疗效。现代临床常以马钱子治疗类风湿性关节炎、中风偏瘫、神经麻痹、多发性神经炎等疾病，是具有较大开发潜力的中药，尤其在治疗恶性肿瘤方面，效果明显且没有其它抗癌药常有的骨髓抑制、免疫抑制等不良反应，因而具有非常广阔的开发前景。
[0003]现代医学研究证明马钱子中发挥药理作用的为其结构特定的单萜吲哚类生物碱，但对马钱子中的单萜吲哚类生物碱的定向分离却没有形成一个完整的体系，且大量关于药理作用、制剂及临床应用的研究仍停留在马钱子总生物碱的水准上。因此，对马钱子中单萜吲哚类生物碱成分的深入研究是十分必要的。

技术实现思路

[0004]为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种从马钱子中提取分离得到的新单萜吲哚类生物碱及制备方法，该化合物结构新颖、抗炎活性佳，且其制备方法成本低廉，操作简单，能够分离得到较高纯度的化合物。
[0005]为实现上述目的，本专利技术的技术方案如下：<br/>[0006]本专利技术提供一种单萜吲哚类生物碱，其化学结构式如式Ⅰ所示：
[0007][0008]本专利技术还提供一种所述单萜吲哚类生物碱的制备方法，包括以下步骤：
[0009]S1、将马钱子用体积分数为80～95％乙醇溶液回流提取，收集提取液；
[0010]S2、将所述提取液调pH至1～3，用氯仿萃取，收集酸水液；
[0011]S3、将所述酸水液调pH至9～12，依次用氯仿和正丁醇萃取，得到正丁醇萃取物；
[0012]S4、将所述正丁醇萃取物溶解后，用二氯甲烷
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甲醇
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二乙胺洗脱系统经硅胶柱梯度洗脱，对流出液进行薄层色谱检测，合并主斑点相同的馏分，得到四个馏分，分别为Fr.A、Fr.B、Fr.C、Fr.D；
[0013]S5、将所述Fr.B溶解后，用甲醇
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水洗脱系统经ODS柱进行梯度洗脱，对流出液进行薄层色谱检测，合并主斑点相同的馏分，得到三个馏分，分别为Fr.B1、Fr.B2、Fr.B3；
[0014]S6、将所述Fr.B3溶解后，用二氯甲烷
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甲醇
‑
二乙胺经正向硅胶柱进行等度洗脱，对流出液用薄层色谱法检测，合并主斑点相同的馏分，得到四个馏分，分别为Fr.B3‑1、Fr.B3‑2、Fr.B3‑3、Fr.B3‑4；
[0015]S7、将所述Fr.B3‑1溶解后，过滤，用甲醇
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水
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氨水洗脱系统经高效液相色谱柱进行等度洗脱，收集含有单萜吲哚类生物碱的流出液，即得所述单萜吲哚类生物碱。
[0016]优选地，S1中，马钱子与乙醇溶液的用量比为1g：6～10mL。
[0017]优选地，S1中，所述提取液的具体制备过程为：将马钱子用体积分数为80～95％乙醇溶液回流提取1～3次，每次1～2h，对提取得到的溶液进行过滤，滤液回收至无醇味，再用40～55℃的水混悬，过滤，得到所述提取液。
[0018]优选地，S4中，二氯甲烷
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甲醇
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二乙胺洗脱系统中，用二氯甲烷和甲醇依次以体积比12∶1、8∶1、5∶1、3∶1、1∶1、0∶1进行梯度洗脱，且每个洗脱梯度中二氯甲烷和甲醇的总体积与二乙胺的体积比均为100∶0.3。
[0019]优选地，S4中，所述主斑点相同的馏分是二氯甲烷与甲醇的体积比为8∶1及5∶1的洗脱馏分。
[0020]优选地，S5中，所述甲醇
‑
水洗脱系统中，用水和甲醇依次以体积比1∶0、9∶1、4∶1、7∶3、3∶2、1∶1、2∶3、3∶7、0∶1进行梯度洗脱。
[0021]优选地，S5中，所述主斑点相同的馏分是水和甲醇体积比为1∶1的洗脱馏分。
[0022]优选地，S7中，所述甲醇
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水
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氨水洗脱系统中，氨水的质量浓度为25～28％，甲醇、水与氨水的体积比为50∶50∶0.2。
[0023]本专利技术还提供一种单萜吲哚类生物碱在制备抗炎药物中的用途。
[0024]对比现有技术，本专利技术的有益效果为：
[0025]1、本专利技术提供一种单萜吲哚类生物碱，该化合物是从马钱子中提取分离得到。经细胞实验证明，该化合物能够降低LPS诱导RAW264.7细胞上清液中炎症因子的含量，提示该化合物具有一定的抗炎活性，对炎症性疾病具有潜在的治疗效果。
[0026]2、本专利技术利用酸提碱沉法并采用不同极性的有机溶剂将马钱子提取液分为酸性氯仿层、碱性氯仿层及碱性正丁醇层，再将正丁醇层依次经硅胶柱、ODS反相柱、凝胶柱洗脱，收集的相同馏分经HPLC色谱柱等度洗脱，分离得到本专利技术提供的单萜吲哚类生物，命名为protostrychnine A。
[0027]3、本专利技术在第一次硅胶柱分离时使用含二乙胺的二氯甲烷
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甲醇系统为流动相，该流动相体系成本低廉，简单易得；其中，在流动相中加入二乙胺，可以克服硅胶的酸性，防止硅胶与生物碱成分吸附过紧而导致的拖尾甚至不足以洗脱。
[0028]4、本专利技术在最后高效液相色谱分离时使用含氨水的甲醇
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水系统为流动相，在流动相中加入氨水，不仅能够提高分离效率，而且氨水可以通过减压蒸馏除去，避免对化合物图谱信号干扰，便于解析出正确的结构，有利于后续补充图谱。
[0029]5、本专利技术提供的方法，操作简便，原料成本低，且分离后的化合物纯度高，利于药物研发后进行大规模推广使用。
附图说明
[0030]图1为本专利技术分离得到的化合物的高分辨质谱图谱；
[0031]图2为本专利技术分离得到的化合物的紫外图谱；
[0032]图3为本专利技术分离得到的化合物的红外图谱；
[0033]图4为本专利技术分离得到的化合物的1H
‑
NMR图谱(600MHz)；
[0034]图5为本专利技术分离得到的化合物的
13
C
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NMR图谱(150MHz)；
[0035]图6为本专利技术分离得到的化合物的DEPT图谱；
[0036]图7为本专利技术分离得到的化合物的HSQC图谱；
[0037]图8为本专利技术分离得到的化合物的HMBC图谱；
[0038]图9为本专利技术分离得到的化合物的1H
‑1H COSY图谱；
[0039]图10为本专利技术分离得到本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种单萜吲哚类生物碱，其特征在于，其化学结构式如式Ⅰ所示：2.一种权利要求1所述的单萜吲哚类生物碱的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、将马钱子用体积分数为80～95％乙醇溶液回流提取，收集提取液；S2、将所述提取液调pH至1～3，用氯仿萃取，收集酸水液；S3、将所述酸水液调pH至9～12，依次用氯仿和正丁醇萃取，得到正丁醇萃取物；S4、将所述正丁醇萃取物溶解后，用二氯甲烷
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甲醇
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二乙胺洗脱系统经硅胶柱进行梯度洗脱，对流出液进行薄层色谱检测，合并主斑点相同的馏分，得到四个馏分，分别为Fr.A、Fr.B、Fr.C、Fr.D；S5、将所述Fr.B溶解后，用甲醇
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水洗脱系统经ODS柱进行梯度洗脱，对流出液进行薄层色谱检测，合并主斑点相同的馏分，得到三个馏分，分别为Fr.B1、Fr.B2、Fr.B3；S6、将所述Fr.B3溶解后，用二氯甲烷
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甲醇
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二乙胺经正向硅胶柱进行等度洗脱，对流出液用薄层色谱法检测，合并主斑点相同的馏分，得到四个馏分，分别为Fr.B3‑1、Fr.B3‑2、Fr.B3‑3、Fr.B3‑4；S7、将所述Fr.B3‑1溶解后，过滤，用甲醇
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水
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氨水洗脱系统经高效液相色谱柱进行等度洗脱，收集含有单萜吲哚类生物碱的流出液，即得所述单萜吲哚类生物碱。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，S1...

【专利技术属性】
技术研发人员：张新新，张钰，郑海荣，郭玉婷，吴清清，辛赛赛，刘哲佟，郭增军，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：