一种忍冬叶提取物和其组合物的制备方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种忍冬叶提取物和其组合物的制备方法及应用。本发明专利技术首先采用酸水提取法制备忍冬叶提取物，然后将忍冬叶提取物与黄芩提取物进行复配，使其对金黄色葡萄球菌与大肠杆菌的MIC值显著减小，进而减少用药量，实现对忍冬叶药材资源的充分利用。上述提取物和组合物具有在弱碱性溶剂中有效物质绿原酸稳定性好、降解缓慢的优势，具有在酸性条件下有效物质黄芩苷含量稳定、不析出的优势。长期饲喂上述提取物，可有效的降低鸡的病死率，并提高机体的抗热应激能力；有效降低料肉比，提高饲料报酬，降低饲养成本。降低饲养成本。降低饲养成本。

【技术实现步骤摘要】
一种忍冬叶提取物和其组合物的制备方法及应用


[0001]本专利技术涉及一种具有抗菌作用、有效成分稳定不易降解的忍冬叶提取物和其组合物的制备方法及应用，属于中药提取物


技术介绍

[0002]忍冬(Lonicera japonica Thunb.)为忍冬科(Caprifoliaceae)忍冬属(Lonicera)多年生藤本植物，其药用部位最初为茎叶，后来演变为花。现代采用金银花作为药材，而忍冬叶尽管与金银花有效成分和临床功效相似，且有明确的本草文献记载忍冬的叶与花“功用皆同”，但现代以来忍冬叶一直作为非药用部分，造成中药资源的浪费。现代研究也表明，忍冬叶中的有效成分及药理作用不亚于金银花。忍冬叶及金银花作为我国重要的传统中药资源，均具有诸如消炎、清热、抗病毒、抑菌等多种药用功效。
[0003]黄芩(Scutellariae radix)为唇形科植物黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的干燥根，是中国传统大宗药材之一，具有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎的功效。黄芩苷是黄芩的主要活性成分，也是指标性成分，具有抗病毒、抗癌、抗氧化、抗菌等药理作用。
[0004]大肠杆菌(Escherichia coli)，又叫大肠埃希氏菌，是临床感染中最常见的革兰阴性菌之一，在一定条件下可以引起人和多种动物发生胃肠道感染或尿道等多种局部组织器官感染。研究表明，动物的大肠杆菌病可以发生在多种家畜、家禽、养殖经济动物以及其他陆生动物和某些水产动物中，其中猪和鸡是最为易感的，而且危害十分严重。金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，S.aureus)也称为“金葡菌”，是临床感染中最常见的革兰阳性菌之一，常见于皮肤表面及上呼吸道黏膜，在一定条件下能够产生肠毒素，引起食物中毒，是引起食物中毒的常见致病菌。
[0005]现代研究表明，忍冬叶提取物中存在丰富的抗菌活性物质，忍冬叶中的黄酮物质对肠道致病菌有较强的抑菌作用；黄花忍冬叶的乙酸乙酯、正丁醇提取物对大肠杆菌有较好的抑菌效果。张宁等(张宁,曹光群,林贵坤,等.金银花叶的抑菌活性和抗氧化性研究[J].香料香精化妆品,2008,(3),29
‑
32)发现忍冬叶乙醇提取物抗菌谱较广，对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑菌效果。黄芩苷具有广谱抗菌活性，对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌均具有显著的抑制作用。但王双双等发现黄芩经纯水提得到的黄芩提取物对金黄色葡萄球菌的抑制作用一般。李振等研究发现黄芩水提取对金黄色葡萄球菌的MIC为15.6mg
·
mL
‑1，对大肠杆菌的MIC为31.3mg
·
mL
‑1。

技术实现思路

[0006]针对上述问题，本专利技术提供了一种忍冬叶提取物和其组合物的制备方法及应用。本专利技术首先采用酸水提取法制备忍冬叶提取物，然后将忍冬叶提取物与黄芩提取物进行复配，使其对金黄色葡萄球菌与大肠杆菌的MIC值显著减小，进而减少用药量，实现对忍冬叶药材资源的充分利用。上述提取物和组合物具有在弱碱性溶剂中(类似于生物体肠道环境
下pH值)有效物质绿原酸稳定性好、降解缓慢的优势，具有在酸性条件下有效物质黄芩苷含量稳定不析出的优势。
[0007]本专利技术首先提供了一种忍冬叶提取物的制备方法，其特征是，忍冬叶采用pH2.0
‑
5.0的盐酸水溶液，以加热煎煮方式提取，获得忍冬叶提取物，其绿原酸含量≥3％。
[0008]上述忍冬叶提取物的制备方法具体为：采用pH2.0
‑
5.0的盐酸水溶液，以加热煎煮方式提取，第一次提取料液比为1:6～1:15(质量/体积，g/mL)，第二次提取料液比为1:5～1:15；合并提取液，浓缩至药液浓度相当于0.5～2.0g药材/mL，调节pH 3.0
‑
6.5，即得忍冬叶提取浓缩液，所得浓缩液喷雾干燥，即得忍冬叶提取物。
[0009]本专利技术还提供了一种含上述忍冬叶提取物的组合物，其特征是，该组合物至少包含忍冬叶提取物和黄芩提取物，组合物中绿原酸含量≥10.0mg/g，黄芩苷含量≥150.0mg/g。
[0010]上述组合物的制备方法具体为：将黄芩提取物溶解于忍冬叶提取浓缩液中，喷雾干燥，即得忍冬叶黄芩组合物。
[0011]上述方法制备的忍冬叶提取物，其绿原酸稳定性好，将提取物或组合物加水稀释10
‑
100倍，以氢氧化钠溶液调节pH值到8.0，所得溶液中绿原酸含量5天内降解率≤10.0％。
[0012]本专利技术还提供了上述提取物或组合物在抑制金黄色葡萄球菌与大肠杆菌方面的应用。
[0013]上述抑菌功效为：将忍冬叶提取物加水稀释10
‑
500倍，对大肠杆菌标准菌有良好的抑菌功效。忍冬叶黄芩组合物加水稀释50
‑
1000倍，对大肠杆菌标准菌有良好的抑菌功效。
[0014]本专利技术还提供了上述忍冬叶提取物在提高动物免疫力，降低料肉比方面的应用。
[0015]本专利技术的技术效果是：
[0016]1、提取物制备过程中采用弱酸性提取溶剂，可去除忍冬叶中部分杂质，并提高提取液中绿原酸的稳定性；
[0017]2、组合物制备过程中采用忍冬叶提取浓缩液和黄芩提取物共混合的方法，避免黄芩苷因为溶液呈酸性导致的析出；药效物质绿原酸和黄芩苷保留充分，提高了产品的稳定性和抑菌功效。
[0018]3、采用本专利技术方法制备的忍冬叶提取物比传统水提工艺提取的提取物，抑菌活性更高，MIC降低了3倍。与单独的忍冬叶和黄芩提取物相比，采用本专利技术方法制备的忍冬叶组合物能达到更低的MIC，实现显著的协同增效的效果。组合物具有抑菌功效独特，成本低廉的优势，可以作为中兽药应用。
[0019]4、经长期饲喂实验证明：忍冬叶提取物可有效的提高机体的免疫器官指数，降低鸡的病死率，并提高机体的抗热应激能力，还可以有效降低料肉比，提高饲料报酬，降低饲养成本。
附图说明
[0020]图1为忍冬叶提取物总离子流图，其中图1
‑
a正离子模式；图1
‑
b负离子模式；
[0021]图2为绿原酸质谱图(RT＝6.31min，[M
‑
H]＝353.08734，ppm＝8.5)；
[0022]图3为异绿原酸质谱图(RT＝8.39min，[M
‑
H]＝515.11540，ppm＝6.7)；
[0023]图4为忍冬叶提取物和水提物在弱碱性溶剂下的稳定性对比；
[0024]图5为黄芩苷、绿原酸含量检测HPLC图(图5
‑
a：忍冬叶黄芩组合物、图5
‑
b：黄芩苷对照品，图5
‑
c：绿原酸对照品)。
具体实施方式
[0025]为更好说明本专利技术的技术方案，特给出以下实施例，但本专利技术并不仅限于此。
[0026]实施例1：忍冬叶提取物的制备和LC...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种忍冬叶提取物的制备方法，其特征是，忍冬叶采用pH2.0
‑
5.0的盐酸水溶液，以加热煎煮方式提取，获得忍冬叶提取物。2.如权利要求1所述的忍冬叶提取物的制备方法，其特征是，采用pH2.0
‑
5.0的盐酸水溶液，以加热煎煮方式提取2
‑
3次；合并提取液，浓缩至药液浓度相当于0.5～2.0g药材/mL，调节pH 3.0
‑
6.5，即得忍冬叶提取浓缩液，所得浓缩液喷雾干燥，即得忍冬叶提取物。3.如权利要求2所述的忍冬叶提取物的制备方法，其特征是，加热煎煮方式提取2次，第一次忍冬叶和提取液质量体积比为1:6～1:15，第二次忍冬叶和提取液...

【专利技术属性】
技术研发人员：生立嵩，冉蓉，王林，冯静，杨艳艳，刘月月，杨世发，史万玉，
申请(专利权)人：山东省中医药研究院山东省农业科学院家禽研究所，
类型：发明
国别省市：