一种金银花提取物及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种金银花提取物及其制备方法包括以下步骤：(1)取新鲜金银花，洗净，加入质量百分比为3％～8％乙醇水溶液，匀浆破壁，得到金银花浆液；(2)在金银花浆液中接种复合菌液，混匀后，在28

【技术实现步骤摘要】
一种金银花提取物及其制备方法


[0001]本专利技术涉及金银花深加工领域，特别涉及一种金银花提取物及其制备方法。

技术介绍

[0002]金银花，又名忍冬(学名：lonicerajaponica)。“金银花”一名出自《本草纲目》，由于忍冬花初开为白色，后转为黄色，因此得名金银花。药材金银花为忍冬科忍冬属植物忍冬及同属植物干燥花蕾或带初开的花。金银花，三月开花，五出，微香，蒂带红色，花初开则色白，经一、二日则色黄，故名金银花。又因为一蒂二花，两条花蕊探在外，成双成对，形影不离，状如雄雌相伴，又似鸳鸯对舞，故有鸳鸯藤之称。本种最明显的特征在于具有大形的叶状苞片。它在外貌上有些像华南忍冬，但那个种的苞片狭细而非叶状，萼筒密生短柔毛，小枝密生卷曲的短柔毛，与本种明显不同。这个种的形态变异非常大，无论在枝、叶的毛被、叶的形状和大小以及花冠的长度、毛被和唇瓣与筒部的长度比例等方面，都有很大的变化。但所有这些变化看来较多地同生态环境相联系，并未显示与地理分布之间的相关性。金银花自古被誉为清热解毒的良药。它性甘寒气芳香，甘寒清热而不伤胃，芳香透达又可祛邪。金银花既能宣散风热，还善清解血毒，用于各种热性病，如身热、发疹、发斑、热毒疮痈、咽喉肿痛等症，均效果显著。
[0003]金银花系忍冬科多年生植物绿灌木忍冬的花蕾。又名忍冬花、银花。藤叶亦作药用，称银花藤。味甘、性寒，归肺、胃、大肠经，具有清热解毒作用。传统主要用于治疗热毒疮痈以及外感风热、风湿初起等证。一般用量为10－15克。药理研究认为，金银花对多种致病菌有抑制作用，亦有抗炎、解热、降血脂、加强机体防御机能等作用。金银花对肺炎球菌、脑膜炎双球菌、绿脓杆菌、志贺氏痢疾杆菌、变形链球菌等有抑菌和杀菌作用，对流感病毒、孤儿病毒、疱疹病毒、钩端螺旋体均有一定的抑制作用。其中，其对H1N1病毒抑制活性不高，其药用价值未得到充分利用。

技术实现思路

[0004]鉴于此，本专利技术提出一种金银花提取物及其制备方法，有效提高金银花提取物的抑制H1N1病毒活性，进一步提高其药用价值。
[0005]本专利技术的技术方案是这样实现的：
[0006]本专利技术提供一种金银花提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0007](1)取新鲜金银花，洗净，按照料液比kg/L为1：10
‑
12，加入质量百分比为3％～8％乙醇水溶液，匀浆破壁，得到金银花浆液；本专利技术采用低浓度乙醇溶液匀浆破壁后更好提高后续复合菌发酵效果，提高其抗H1N1病毒活性成分含量以及稳定性。
[0008](2)在金银花浆液中接种复合菌液，接种量为0.5％
‑
1％，混匀后，在28
‑
35℃发酵8～10h，所述复合菌液由体积比为1.8～2.2：1纳豆芽孢杆菌液和巴氏醋杆菌液制得，收集金银花发酵液；本专利技术采用纳豆芽孢杆菌液
‑
巴氏醋杆菌复合发酵，进一步转化出更多的抑制H1N1病毒活性成分，提高其抑制H1N1病毒活性成分含量，而且进入体内稳定，能够更好发挥
抗H1N1病毒作用。
[0009](3)将金银花发酵液置于超临界二氧化碳萃取设备进行萃取，萃取温度为40～45℃，萃取压力为25～30MPa，CO2流量200～210L/h，萃取时间为3～5h，收集金银花萃取液；更加充分提取抑制H1N1病毒活性成分。
[0010](4)将金银花萃取液经硅胶键合辛基硅烷柱进行梯度洗脱，洗脱溶剂为乙醇
‑
水溶液，收集洗脱液；将洗脱液减压浓缩，真空干燥，得到目标金银花提取物。所述乙醇
‑
水溶液的洗脱梯度为v:v＝28～32：68～72，73～78：22～28，94～96：4～6。经梯度洗脱后，进一步深度纯化，去除更多非活成分以及杂质，提高提取物中抑制H1N1病毒活性含量。
[0011]采用本专利技术提取方法，有效提高抑制H1N1病毒活性成分含量，降低非活成分以及杂质，提高抗H1N1病毒作用同时提高生物安全性。
[0012]进一步的技术方案为：所述匀浆破壁为10
‑
15℃低温匀浆，匀浆转速为9000
‑
11000rpm，匀浆时间为3
‑
5min。
[0013]进一步的技术方案为：所述纳豆芽孢杆菌液和巴氏醋杆菌液的有效活菌数均为7～9
×
109cfu/mL。
[0014]进一步的技术方案为：所述超临界二氧化碳萃取，萃取温度为43℃，萃取压力为28MPa，CO2流量205L/h，萃取时间为4h。
[0015]进一步的技术方案为：所述乙醇
‑
水溶液的洗脱梯度为v:v＝30：70，75：25，95：5。
[0016]一种金银花提取物，由本专利技术任一项的制备方法制得。
[0017]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0018](1)本专利技术以新鲜金银花为原料，经低浓度乙醇溶液匀浆，通过纳豆芽孢杆菌和巴氏醋杆菌复合菌发酵，结合超临界二氧化碳萃取，最后经硅胶键合辛基硅烷柱梯度洗脱，有效提高抑制H1N1病毒活性成分含量，降低非活成分以及杂质，不但提高金银花提取物的抗H1N1病毒作用，同时提高其生物安全性。
[0019](2)本专利技术金银花提取物不但能够发挥良好的抗H1N1病毒作用，降低感染H1N1病毒后小鼠死亡数量，显著提高存活率，而且促进生长，恢复小鼠体重，继而增重。
[0020](3)金银花本身具有抗有一定抗H1N1病毒作用，采用本专利技术方法制备的金银花提取物，有效提高其抗H1N1病毒活性，降低给药量，进一步提高生物安全性，进一步提高金银花药用价值。
具体实施方式
[0021]为了更好理解本专利技术
技术实现思路
，下面提供具体实施例，对本专利技术做进一步的说明。
[0022]本专利技术实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[0023]本专利技术实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0024]实施例1
[0025]一种金银花提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0026](1)取新鲜金银花，洗净，按照料液比kg/L为1：11，加入质量百分比为5％乙醇水溶液，置于匀浆破壁机(匀浆破壁机放置在10
‑
15℃冷库中)进行匀浆破壁4min，匀浆转速为10000rpm，得到金银花浆液；
[0027](2)在金银花浆液中接种复合菌液，接种量为0.8％，混匀后，在30
‑
32℃发酵9h，所
述复合菌液由体积比为2.0：1纳豆芽孢杆菌液和巴氏醋杆菌液制得，所述纳豆芽孢杆菌液和巴氏醋杆菌液的有效活菌数均为8
×
109cfu/mL，收集金银花发酵液；
[0028](3)将金银花发酵液置于超临界二氧化碳萃取设备进行萃取，萃取温度为43℃，萃取压力为28MPa，CO2流量205L/h，萃取时间为4h，收集金银花萃取液；
[0029](4)将金银花萃取液经硅胶键合辛基本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种金银花提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取新鲜金银花，洗净，按照料液比kg/L为1：10
‑
12，加入质量百分比为3％
‑
8％乙醇水溶液，匀浆破壁，得到金银花浆液；(2)在金银花浆液中接种复合菌液，接种量为0.5％
‑
1％，混匀后，在28
‑
35℃发酵8～10h，所述复合菌液由体积比为1.8～2.2：1纳豆芽孢杆菌液和巴氏醋杆菌液制得，收集金银花发酵液；(3)将金银花发酵液置于超临界二氧化碳萃取设备进行萃取，萃取温度为40～45℃，萃取压力为25～30MPa，CO2流量200～210L/h，萃取时间为3～5h，收集金银花萃取液；(4)将金银花萃取液经硅胶键合辛基硅烷柱进行梯度洗脱，洗脱溶剂为乙醇
‑
水溶液，收集洗脱液；将洗脱液减压浓缩，真空干燥，得到目标金银花提取物。2.根据权利要求1所述的金银花提取物的制备方法，其特征在于，所述匀浆破壁为10

【专利技术属性】
技术研发人员：舒华，舒振湘，
申请(专利权)人：湖南攀丰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：