一株非洲绿猴肾细胞克隆株及其在鸡新城疫病毒检测上的应用制造技术

本发明专利技术公开了一株非洲绿猴肾细胞克隆株及其在鸡新城疫病毒检测上的应用，具体涉及生物制品检测技术领域。检测方法具体包括以下步骤：(1)细胞铺板：取出已制备好的VERO

【技术实现步骤摘要】
一株非洲绿猴肾细胞克隆株及其在鸡新城疫病毒检测上的应用


[0001]本专利技术涉及生物制品检测
，具体涉及一株非洲绿猴肾细胞克隆株及其在鸡新城疫病毒检测上的应用。

技术介绍

[0002]在生物制品检测领域，病毒含量检测是一项非常重要的工艺，为了得到更优异的检测方法，病毒培养的宿主选择也是至关重要的，不同的病毒对应不同的宿主，而同一种病毒可以感染多种宿主，使用最佳宿主来检测病毒，结果准确性高。
[0003]根据《中华人民共和国兽用生物制品规程》2000年版和《中华人民共和国兽药典》2020版3部，鸡新城疫病毒含量和效力检验都采用鸡胚法检测。
[0004]原检测方法主要内容：将鸡新城疫病毒液用灭菌生理盐水做10倍系列稀释，取3个适宜稀释度，分别尿囊腔接种10日龄SPF鸡胚5枚，每胚0.1ml，置37℃继续孵育120小时。48小时内死亡的鸡胚弃去不计，在48～120小时内死亡的鸡胚，随时取出，收获鸡胚尿囊液，将同一稀释度的鸡胚尿囊液等量混合，分别测定红细胞凝集价。至120小时，取出所有活胚，逐个收获鸡胚尿囊液，分别测定红细胞凝集本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株非洲绿猴肾细胞克隆株VERO
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K6，其特征在于，该克隆株VERO
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K6已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC NO：C2022312，保藏日期：2023年3月2日。2.一种如权利要求1所述的非洲绿猴肾细胞克隆株VERO
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K6在鸡新城疫病毒检测上的应用。3.一种检测鸡新城疫病毒含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)细胞铺板：取出已制备好的VERO
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K6细胞悬液，取一定量至平皿中，再用排枪加入到细胞培养板的孔板内，将细胞培养板放入培养箱中，培养至长成致密单层细胞；(2)样品稀释：取一定数量的EP管于离心架上，按顺序对EP管进行标号，向每支EP管中加入等量的含胰酶的DMEM无血清稀释液；取一定量的鸡新城疫病毒液加入到第一支EP管中振荡混匀，从该EP管中抽取等量的鸡新城疫病毒液加入到第二支EP管中振荡混匀，依此类推，对剩余EP管进行同样操作；(3)加样：取出步骤(1)已长成致密单层VERO
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K6细胞的细胞培养板，弃去细胞培养液，用PBS溶液洗涤；从步骤(2)的EP管中取出稀释后的鸡新城疫病毒液，接种至细胞培养板中；(4)培养检测：将细胞培养板放入培养...

【专利技术属性】
技术研发人员：许冬，张辰羽，虞慎义，魏磊，侯丹丹，张肖玲，曹锋，郑玉芳，赵文艳，黄浩，张维维，苏明慧，
申请(专利权)人：安徽东方帝维生物制品股份有限公司，
类型：发明
国别省市：