一种β-淀粉样蛋白寡聚体检测传感器及检测方法技术

本发明专利技术涉及一种β

【技术实现步骤摘要】
一种
β
‑
淀粉样蛋白寡聚体检测传感器及检测方法


[0001]本专利技术属于生物分析
，涉及一种β
‑
淀粉样蛋白寡聚体检测传感器及检测方法。

技术介绍

[0002]本专利技术
技术介绍
中公开的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]阿尔茨海默病(AD)是一种不可逆的神经退行性疾病，其特征为记忆丧失、认知能力下降和行为障碍。神经病理学研究证实，AD的特征性病变是淀粉样蛋白斑块的脑内沉积。最初，研究人员认为构成斑块的淀粉样蛋白
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β(Aβ)具有神经毒性。然而，细胞培养和转基因动物模型实验表明，Aβ聚集形成寡聚体(AβO)是人脑脊液中最具神经毒性的物质。它与细胞膜和膜受体相互作用，损害细胞内信号通路，导致神经元凋亡和突触变性。通常，AβO在AD的早期阶段积累，比临床发作早10
‑
15年，这被用作AD诊断的第一个指标。因此，有效监测AβO对于预测AD早期阶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种β
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淀粉样蛋白寡聚体检测传感器，其特征在于，所述AβO检测传感器包括：DNA
‑
转化酶共轭物、链霉亲和素包被的磁珠、生物素化引物、H1、H2、适体链、Bst DNA聚合酶、dNTP、MgSO4溶液、NaCl溶液；其中，所述DNA
‑
转化酶共轭物为TCEP活性Thiol
‑
DNA和转化酶反应得到。2.根据权利要求1所述AβO检测传感器，其特征在于，H1的序列为：AATAAGAGACCCGGTTTTCCGGGTCTCTTATTACCCGCCCCAAC
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InvdT，如SEQ ID NO.1所示；H2的序列为：AATAAGAGACCCGGTTTTCCGGGTCTCTTATTTCTCTTATT
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InvdT，如SEQ ID NO.2所示；适体链为GCCTGTGGTGTTGGGGCGGGTGCGTTT，如SEQ ID NO.3所示；所述生物素化引物为Biotin
‑
AAAAAGGGGCGG，如SEQ ID NO.4所示；Thiol
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DNA的序列为：SH C6
‑
TCTCTTATTTCTCTTATT，如SEQ ID NO.5所示。3.一种β
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淀粉样蛋白寡聚体检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)采用TCEP对Thiol
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DNA进行活化；将TCEP活性Thiol
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DNA和纯化后的转化酶溶液进行混合，得到DNA
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转化酶共轭物；(2)将生物素化引物和链霉亲和素包被的磁珠进行反应，得到P
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MBs；(3)将H1和适体链混合后加热得到H1
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适体链，将H2加热形成稳定的发夹结构；将H1
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适体链、P
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MBs、H2、Bst DNA聚合酶、dNTP、MgSO4溶液、NaCl溶液、AβO和水混合反应；(5)将DNA
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转化酶共轭物与步骤(4)得到的反应混合物孵育；然后，分离磁珠并加入蔗糖溶液反应；取最终溶液用血糖仪进行测试。4.根据权利要求3所述β
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淀粉样蛋白寡聚体检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中，将Thiol
‑
DNA溶解在TE buffer中，取20μL ...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜玮，安亚云，张楠，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：