实时成像检测β-淀粉样蛋白的铂纳米酶及制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种实时成像检测β

【技术实现步骤摘要】
实时成像检测
β
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淀粉样蛋白的铂纳米酶及制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及纳米材料生物检测领域，具体为一种实时成像检测Aβ的铂纳米酶以及其在体外和细胞内的Aβ成像检测上的应用。

技术介绍

[0002]阿兹海默病是最常见的一种神经退行性疾病，临床表现为记忆和其他认知能力的逐渐丧失，全世界约有5000万人受其影响。阿兹海默病的一个重要的病理特征是细胞外老年斑沉积。β
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淀粉样蛋白(Aβ)是老年斑块中主要成分，由39
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43个氨基酸组成，来源于其淀粉样前体蛋白的裂解，pH7.4时Aβ表面带有弱负电性。成熟的Aβ纤维直径约20nm，长度在微米级别。越来越多的证据表明，Aβ的聚集是阿兹海默病最显著的病理特征。然而，成熟Aβ纤维的形成通常会经历一个复杂的多步骤过程，且伴随着神经毒性。因此，可视化Aβ聚集体的结构细节对于阿兹海默症的早期诊断至关重要。
[0003]目前，荧光显微成像已成为监测Aβ聚集体的高效手段，成像实验前往往需要用有机荧光团标记Aβ聚集体。然而，溶液中过多的荧光本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种实时成像检测β
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淀粉样蛋白的铂纳米酶的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)将氯铂酸类化合物与阳离子配体的水溶液混合均匀，得到均相的阳离子包裹氯铂酸溶液；(2)将还原剂加入到阳离子包裹氯铂酸溶液中并混合均匀；然后静置进行还原反应，直至溶液颜色趋于稳定，不再变化后反应结束，得到铂纳米酶溶液；(3)将铂纳米酶溶液通过离心去除未反应物质，得到铂纳米酶储备液。2.根据权利要求1所述的实时成像检测β
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淀粉样蛋白的铂纳米酶的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，氯铂酸类化合物为氯铂酸或氯铂酸盐，氯铂酸采用六水合氯铂酸，氯铂酸盐为氯铂酸钾或氯铂酸钠；阳离子配体为CTAB、CTAC或壳聚糖；氯铂酸与阳离子配体的摩尔比为2～6:9；氯铂酸类化合物的浓度为1～10mM。3.根据权利要求1所述的实时成像检测β
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淀粉样蛋白的铂纳米酶的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，还原剂为硼氢化钠或抗坏血酸，浓度为5～50mM；还原剂逐滴加入阳离子包裹氯铂酸溶液中；还原反应温度为25～32℃，时间为20～60min。4.根据权利要求1所述的实时成像检测β
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淀粉样蛋白的铂纳米酶的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，离心工艺在超滤离心管中进行，超滤离心管的规格为10kD，离心转速为10000～15000rpm，离心时间为8～15min。5.一种权利要求1
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4任一所述实时成像检测β
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淀粉样蛋白的铂纳米酶的制备方法制备得到的铂纳米酶。6.一种权利要求5所述铂纳米酶的应用，其特征在于，将铂纳米酶催化产生的荧光探针用于β
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淀粉样蛋白的成像检测；成像检测包括体外成像检测和细胞内成像检测。7.根据权利要求5所述的铂纳米酶的应用，其特征在于，体外成像检测的步骤如下：A1、将铂纳米酶储备液进行稀释，得到铂纳米酶稀释液；将Aβ粉末溶解在氨水中，得到Aβ单体溶液；然后将Aβ单体溶液用磷酸盐缓冲溶液稀释，得到Aβ生长液；将Aβ生长液进行孵育，得到Aβ纤维；A2、将Aβ纤维吸附在流通池的底部，再将流通池置于荧光显微成像系统中；然后依次向流通池中通入铂纳米酶稀释液、树脂天青以及还原剂盐酸羟胺，再激发产物荧光，利用铂纳米酶...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖乐辉，王晓，李庆楠，王星文，
申请(专利权)人：南开大学，
类型：发明
国别省市：