一种去激素胎牛血清和新生牛血清的制备工艺制造技术

本发明专利技术涉及牛血清技术领域，具体公开了一种去激素胎牛血清和新生牛血清的制备工艺，去激素血清的制备工艺如下：S1：取预混合的牛血清加入离心管中，离心管底含有预处理的活性炭；S2：对离心管内的牛血清进行震荡处理；S3：对震荡均匀的牛血清进行水浴处理，水浴期间定期震荡；S4：水浴后的牛血清进行离心处理；S5：重复S2

【技术实现步骤摘要】
一种去激素胎牛血清和新生牛血清的制备工艺


[0001]本专利技术涉及牛血清
，具体涉及一种去激素胎牛血清和新生牛血清的制备工艺。

技术介绍

[0002]血液中包含血浆和血细胞，血液去除血细胞和纤维蛋白后即为血清，血清的主要作用是运载血细胞，运输维持人体生命活动所需的物质和体内产生的废物等，血清相当于结缔组织的细胞间质，血清是血液的重要组成部分，呈淡黄色液体(因含有胆红素)，血清的化学成分中，水分占90％至92％，其他10％以溶质血浆蛋白为主，新生牛血清约有3.5
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5％的蛋白。血清中还有离子、营养素、酶类、激素类、胆固醇和其他重要组成部分。
[0003]牛血清是生物医药生产、生命科学细胞研究和诊断试剂中一个重要的原材料。牛血清的稳定生产、供应涉及到生物医药生产的安全、稳定；支持了生命科学细胞研究、诊断试剂结果的重现性。细胞培养体系包括细胞、牛血清、培养基、培养方式，牛血清是细胞培养体系中的重要组成部分。在生命科学研究中，一些细胞系对牛血清中激素敏感，需要将这些激素去掉(或者说降低到一定水平以下)，血清和培养基配合才能培养好这类细胞。
[0004]目前在科研及制药企业研究乳腺癌等肿瘤时，需要培养对雌激素敏感及不敏感的肿瘤细胞系或原代肿瘤细胞做一些药物筛选、机理研究。去激素胎牛血清或新生牛血清在这些研究肿瘤细胞的过程中就非常重要，需要血清生产企业能够生产激素背景极低的胎牛血清或新生牛血清。
[0005]胎牛血清的激素含量本底很低，胎牛通过六联袋封闭采血，凝血后离心，上清为牛血清。每袋牛血清标记好来源、采血时间和操作人员。送到生产工厂后，取出采血管中牛血清进行质检，先进行病毒、抗体等多个指标的筛选。筛选合格的原料，通常用100头胎牛的原料血清进行预混合，低温充分混合后，原料低温(10
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15℃)放置过夜。预混合后的血清，取部分血清过滤质检。本专利技术提供的工艺用活性碳吸附牛血清中的激素，吸附掉激素的牛血清，去掉活性炭，牛血清再经过辐照、过滤、分装、再次辐照后得到胎牛血清或新生牛成品。
[0006]我们用胎牛血清原料生产的去激素胎牛血清用乳腺癌细胞增殖和连续传代跟进口去激素胎牛血清进行比较，用本专利技术专利方法生产的去激素胎牛血清优于进口去激素胎牛血清。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于提供一种去激素牛血清的制备及生产方法，能够生产激素背景极低的胎牛血清或新生牛血清；
[0008]为达到上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：
[0009]本专利技术第一个方面公开了一种去激素胎牛血清和新生牛血清的制备工艺，制备工艺的具体步骤如下：
[0010]S1：取预混合的牛血清加入离心管中，离心管底含有预处理的活性炭；
[0011]S2：对离心管内的牛血清进行震荡处理；
[0012]S3：对震荡均匀的牛血清进行水浴处理，水浴期间定期震荡；
[0013]S4：水浴后的牛血清进行离心处理；
[0014]S5：重复S2
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S4的步骤一次；
[0015]S6：使用微米滤器过滤S5处理后的牛血清，得到去激素血清。
[0016]优选地，S1中加入500ml预混合的牛血清。
[0017]优选地，S3中牛血清在25℃水浴2小时或56℃水浴30min。
[0018]优选地，S4中离心管在3000rpm下进行离心15min。
[0019]优选地，S6中使用的为0.1微米过滤器。
[0020]本专利技术第二个方面公开了预混合的牛血清的制备方法，制备步骤如下：通过将新生牛或胎牛的血液离心后取上清得到血清，将多头新生牛或胎牛血清进行混合得到预混合的牛血清；
[0021]优选地，对新生牛或胎牛采血，采集的血液离心后取上清即为血清，将100头左右的新生牛或胎牛血清原料发送到生产工厂进行混合，得到预混合的牛血清。
[0022]本专利技术第三个方面公开了活性碳的预处理方法，具体步骤如下：
[0023]A1：在离心管内加入质量比为40:1的纯水和活性碳；
[0024]A2：离心管内的纯水和活性炭在50℃下，在摇床上进行震荡处理；
[0025]A3：震荡处理后，离心管在3000rpm下进行离心处理，离心处理后弃上清，离心管底得到预处理的活性炭。
[0026]优选地，在A2震荡处理过程中，可以在较低温度摇时间长一点；
[0027]通过本专利技术的技术方案，本专利技术通过活性炭吸附结合相关工艺，能够将胎牛血清中的激素降到极低的水平，跟进口的去激素胎牛血清达到一致的水平，填补了国内去激素胎牛血清和新生牛血清的空白。在细胞培养验证中，用本专利技术专利的方法生产的去激素胎牛血清优于进口去激素胎牛血清。
附图说明
[0028]图1A为Gibco去激素胎牛血清培养细胞连续传代4次24小时后的显微图；图1B为未去激素胎牛血清培养细胞连续传代4次24小时后的显微图；图1C为去激素胎牛血清培养细胞连续传代4次24小时后的显微图；
[0029]图2A为Gibco去激素胎牛血清培养细胞连续传代4次48小时后的显微图；图2B为未去激素胎牛血清培养细胞连续传代4次48小时后的显微图；图2C为去激素胎牛血清培养细胞连续传代4次48小时后的显微图；
[0030]图3A为Gibco去激素胎牛血清培养细胞连续传代4次72小时后的显微图；图3B为未去激素胎牛血清培养细胞连续传代4次72小时后的显微图；图3C为去激素胎牛血清培养细胞连续传代4次72小时后的显微图；
[0031]图4A为Gibco去激素胎牛血清培养细胞连续传代4次96小时后的显微图；图4B为未去激素胎牛血清培养细胞连续传代4次96小时后的显微图；图4C为去激素胎牛血清培养细胞连续传代4次96小时后的显微图。
具体实施方式
[0032]下面结合附图和实施例对本专利技术的技术方案进行详细描述，但并不因此将本专利技术限制在所述的实施例范围之中。
[0033]本申请实施例中未注明的工艺参数，均可依照常规方法进行，所用原料均可通过商业渠道获得。
[0034]实施例1：
[0035]通过以下步骤制备得到去激素胎牛血清
[0036]1、去激素血清生产步骤：
[0037]2、胎牛采血；
[0038]3、离心后取上清即为血清；
[0039]4、100头左右的胎牛血清原料发送到生产工厂；
[0040]5、血清原料预混合；
[0041]6、取多个1000毫升离心管，加入400毫升纯水，10克活性炭；
[0042]7、震荡，50℃摇床30分钟；
[0043]8、在3000rpm条件下离心15分钟，弃上清，管底留下固体的活性碳；
[0044]9、离心管加入500毫升预混合的新生牛或胎牛血清，震荡混匀；
[0045]10、将震荡后的离心管25℃水浴2小时，期间定期震荡；
[0046]11、再将离心管在3000rpm条本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种去激素胎牛血清和新生牛血清的制备工艺，其特征在于，去激素血清的制备工艺如下：S1：取预混合的牛血清加入离心管中，离心管底含有预处理的活性炭；S2：对离心管内的牛血清进行震荡处理；S3：对震荡均匀的牛血清进行水浴处理，水浴期间定期震荡；S4：水浴后的牛血清进行离心处理；S5：重复S2
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S4的步骤一次；S6：使用微米滤器过滤S5处理后的牛血清，得到去激素血清。2.根据权利要求1所述的一种去激素胎牛血清和新生牛血清的制备工艺，其特征在于，S1中加入500ml预混合的牛血清。3.根据权利要求2所述的一种去激素胎牛血清和新生牛血清的制备工艺，其特征在于，S3中牛血清在25℃水浴2小时或56℃水浴30min。4.根据权利要求3所述的一种去激素胎牛血清和新生牛血清的制备工艺...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈亮，任志斌，陈强，王元，
申请(专利权)人：兰州荣晔生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：