近平滑假丝酵母菌株及其应用制造技术

本发明专利技术公开了近平滑假丝酵母菌株及其应用，通过菌株对烟叶进行发酵，使得致香成分总含量相较对照组提高了25.2％；生物碱含量较对照组显著降低了25.3％；通过强化发酵可显著提升烟叶的豆香和坚果香韵，显著改善杂气和刺激性，提高成熟度和余味舒适性，烟气更绵柔细腻，提升燃烧性和凝灰。该方法具有可持续利用等优点，可在工业上推广应用。可在工业上推广应用。可在工业上推广应用。

【技术实现步骤摘要】
近平滑假丝酵母菌株及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，尤其涉及近平滑假丝酵母菌株及其应用。

技术介绍

[0002]雪茄是由烟叶经栽培、晾制、发酵和养护后制成的烟草制品。众所周知，烟叶中的生物碱具有潜在的致癌作用，并直接影响烟叶的苦味和刺激性，如尼古丁、新烟碱和可替宁，其中尼古丁占总生物碱的90％以上。通过发酵可以降解烟叶中的大分子物质(如蛋白质、淀粉、纤维素)和有害化合物(如尼古丁)，同时产生各种风味成分(如萜烯、羰基化合物)，从而形成雪茄的独特风格特征。因此，发酵是提高雪雪茄烟叶质量的一个重要过程，其主要目标是提高产品致香成分的同时尽量减少生物碱含量。雪茄发酵首先要将烟叶回潮使水分调节到30％左右，然后在自然或人工控制的温度和湿度条件下发酵。在这个过程中，需要定期对烟叶进行翻堆，以提高均匀性，避免局部过热。
[0003]通常，雪茄发酵依赖于原料和发酵环境中存在的复杂微生物群落进行发酵和酶的作用。然而，较长的生产周期(1
‑
2年)、不稳定的质量以及外部环境制约了雪茄传统发酵工业的发展。通过强化某些特殊的功能菌株在人为可控的环境条件下进行发酵，不仅可以降解尼古丁以提高安全性，还可以改善烟草产品的风味并缩短发酵周期。与其他发酵方法相比，生物强化在成本、效率和可持续性方面具有优势，产品质量相对稳定，发酵周期更短(4
‑
8周)。通过纯培养和高通量测序等技术分析雪茄发酵过程中的微生物群落，并确定特定生境中微生物群落对雪茄质量的影响，将有助于开发功能性发酵剂。因此，还需对潜在功能微生物菌株进行分离来验证其发酵性能，从而提升雪茄烟叶风味和品质，提高烟叶的可用性。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的就在于对潜在功能微生物假丝酵母菌株进行分离，通过强化假丝酵母菌株来验证其发酵性能，从而提升雪茄烟叶风味和品质，提高烟叶的可用性。本专利技术公开了近平滑假丝酵母菌株及其应用，具体涉及一种风味物质产生菌株
‑
近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis SC
‑
2)CGMCC NO.26608及其在烟草中的应用。本专利技术所述的菌株在生长过程中可以分解利用烟叶中的生物碱和总氮并产生西柏烷类降解产物和美拉德反应产物等风味物质。将该菌株的发酵液或菌体按照烟叶重量的1～5％，加入到含水量为20～40％的雪茄烟草中，发酵15～30天可以明显提升雪茄烟叶的豆香和坚果香，显著降低烟叶刺激性和杂气，提高成熟度和余味舒适性，提升燃烧性和凝灰也有所，烟气更绵柔细腻，感官质量明显改善。
[0005]本专利技术通过使用微生物强化发酵来提升雪茄烟叶风味和品质，提高烟叶的可用性。
[0006]本专利技术通过以下技术方案来实现上述目的：
[0007]一种近平滑假丝酵母菌株(Candida metapsilosis SC
‑
1)，已于2023年2月21日保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心，其保藏编号为CGMCC NO.26608。所述菌株属于隐
球酵母科隐球酵母亚科假丝酵母属，可形成假菌丝、有隔的菌丝茁芽和厚垣孢子；兼性好氧菌，最适生长温度为28
‑
30℃。
[0008]本专利技术的另一目的在于提供了上述近平滑假丝酵母菌株在制备发酵烟叶产品中的应用。
[0009]在一些实施方式中，所述所述菌株的培养方法为：
[0010](1)平板培养：蛋白胨10.0g，酵母粉5.0g，葡萄糖1.0g，琼脂15.0g，蒸馏水1.0L，pH6.8～7.0，将冷冻保存的甘油悬液接种到平板上，37℃恒温培养24h；
[0011](2)摇瓶培养：蛋白胨10.0g，酵母粉5.0g，葡萄糖1.0g，加蒸馈水1000mL，调pH值为6.8～7.0，高压蒸汽灭菌；摇瓶装液量为10～20％(v/v)，接种量为2～5％(v/v)，培养温度为28～30℃，摇床转速为150～220rpm，摇瓶培养1～2天。
[0012]在一些实施方式中，在烟叶中的发酵步骤为：
[0013](1)将近平滑假丝酵母Candida metapsilosis SC
‑
2进行发酵培养，获得发酵液及菌体；
[0014](2)将步骤(1)所得的发酵液或菌体用水、生理盐水或者缓冲液进行稀释，获得菌液；
[0015](3)准备烟叶，将烟叶加水回潮使初始水分为30％，备用；
[0016](4)将步骤(2)准备好的菌液以烟叶重量的1～5％接种至步骤(3)回潮后的烟叶上；
[0017](5)将步骤(4)接种好的烟叶装入麻布袋，放进发酵房中进行发酵发酵温度为30
‑
35℃，相对湿度为70
‑
75％，发酵时间为20
‑
30d。
[0018]在一些实施方式中，步骤(3)所述烟叶为单一产区单一品种的烟叶，或者所述烟叶为不同产区不同品种烟叶的组合。
[0019]在一些实施方式中，步骤(2)所述菌液中的菌体浓度为106～108个菌/mL。
[0020]本专利技术的又一目的在于提供了一种烟叶发酵产品，由包括上述的近平滑假丝酵母菌株的原料制成。
[0021]在一些实施方式中，所述产品中的近平滑假丝酵母菌株包括如下(1)或(2)所示的一种或两种：
[0022](1)上述的近平滑假丝酵母菌株的菌群和/或菌剂；
[0023](2)上述的近平滑假丝酵母菌株的培养物、溶胞物和/或提取物。
[0024]本专利技术的有益效果在于：
[0025]本专利技术采用近平滑假丝酵母Candida parapsilosis SC
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2强化发酵烟叶，可提高叶绿素降解产物(如植物醇、新植二烯)、类胡萝卜素降解产物(如香叶基丙酮、香叶基丙醇、二氢猕猴桃内酯、巨豆三烯酮、氧化柠檬烯、反式
‑
β
‑
香柠檬烯)含量，致香成分总含量相较对照组提高了25.2％；生物碱含量较对照组显著降低了25.3％；通过强化发酵可显著提升烟叶的豆香和坚果香韵，显著改善杂气和刺激性，提高成熟度和余味舒适性，烟气更绵柔细腻，提升燃烧性和凝灰。该方法具有可持续利用等优点，可在工业上推广应用。
附图说明
[0026]为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述
中所需要实用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0027]图1为本专利技术近平滑假丝酵母强化发酵过程中理化含量变化。
[0028](A)总糖含量；(B)还原糖含量；(C)总氮含量；(D)生物碱含量；CK代表对照组，P代表近平滑假丝酵母强化组；0～28代表发酵天数。
[0029]图2为本专利技术近平滑假丝酵母强化发酵过程中致香成分含量变化。
[0030]CK代表对照组，P代表近平滑假本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种近平滑假丝酵母菌株(Candida parapsilosis SC
‑
2)，已于2023年2月21日保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心，其保藏编号为CGMCC NO.26608。2.如权利要求1所述的近平滑假丝酵母菌株在制备发酵烟叶产品中的应用。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述所述菌株的培养方法为：(1)平板培养：蛋白胨10.0g，酵母粉5.0g，葡萄糖1.0g，琼脂15.0g，蒸馏水1.0L，pH6.8～7.0，将冷冻保存的甘油悬液接种到平板上，37℃恒温培养24h；(2)摇瓶培养：蛋白胨10.0g，酵母粉5.0g，葡萄糖1.0g，加蒸馈水1000mL，调pH值为6.8～7.0，高压蒸汽灭菌；摇瓶装液量为10～20％(v/v)，接种量为2～5％(v/v)，培养温度为28～30℃，摇床转速为150～220rpm，摇瓶培养1～2天。4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，在烟叶中的发酵步骤为：(1)将近平滑假丝酵母Candida metapsilosis SC
‑
2进行发酵培养，获得发酵液及菌体；(2)将...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾云，李东亮，蔡文，周权威，柴志顺，刘杰，范静苑，黄明月，
申请(专利权)人：四川中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：