鱼粉中罗非鱼源性成分鉴定的荧光定量PCR方法技术

本发明专利技术公开了一种鱼粉中罗非鱼源性成分鉴定的荧光定量PCR方法，属于饲料原料检测技术领域。本发明专利技术根据罗非鱼特有的基因KPL4，设计了荧光定量PCR引物，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1

【技术实现步骤摘要】
鱼粉中罗非鱼源性成分鉴定的荧光定量PCR方法


[0001]本专利技术涉及饲料原料检测
，特别是涉及鱼粉中罗非鱼源性成分鉴定的荧光定量PCR方法。

技术介绍

[0002]鱼粉是饲料工业中不可或缺的、优质的动物性饲料原料。由于鱼粉价格昂贵，市场上掺假鱼粉泛滥，包括在鱼粉中掺入各种动、植物原料，从而降低了鱼粉的营养价值，也给鱼粉质量的判断造成了严重困扰。目前，鱼粉掺假的鉴定仍以镜检法为主，即通过在显微镜下寻找疑似掺假物的组织，依据组织特征对掺假物进行粗略识别，有时需通过物理和化学方法对识别结果进行补充判定，存在着漏检率高、灵敏度低、重复性差、无法定量，且依赖个人经验等问题。近年来，近红外光谱技术被开发用于识别与标准物有明显差异的物质，来鉴别掺假物，但需先建立鱼粉等原料的近红外定标模型。同时，近红外光谱的识别结果易受到如仪器类型、测量环境和装样方式等测样条件以及样品状态等因素的影响，从而影响所建模型的效果及其适用性，尚不具有普遍适用性。因此，亟需寻求一种简便、快捷、灵敏、准确的掺假鉴定方法。
[0003]应用实时荧光定量PCR检测技术，通本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用荧光定量PCR方法鉴定鱼粉中罗非鱼源性成分的引物组合，其特征在于，包括如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的上游引物和如SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的下游引物。2.一种鱼粉中罗非鱼源性成分鉴定的荧光定量PCR方法，其特征在于，以权利要求1所述的引物组和对待测鱼粉DNA进行荧光定量PCR扩增，根据荧光定量检测曲线判定待测鱼粉中罗非鱼源性成分的含量。3.根据权利要求2所述的定性和定量鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制作荧光定量标准曲线；(2)以待测鱼粉DNA为模板，进行荧光定量PCR扩增；(3)根据荧光定量PCR扩增曲线定性鉴定待测鱼粉中罗非鱼源性成分；若出现荧光扩增曲线且Ct值≤34，则判定待测鱼粉中含有罗非鱼源性成分；若无荧光扩增曲线或Ct值≥34，判定待测鱼粉中不含罗非鱼源性成分；(4)根据步骤(1)制作的荧光定量标准曲线计算含有待测鱼粉中罗非鱼源性成...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁日深，周萌，何浩斌，陈玉佩，叶嘉文，黄燕华，
申请(专利权)人：仲恺农业工程学院，
类型：发明
国别省市：