东亚钳蝎蝎毒素ＡＧＡＰ的生产方法技术

本发明专利技术属于医药生物技术领域，具体涉及一种说重组蝎毒蛋白ＡＧＡＰ的生产方法。该方法是先利用重叠ＰＣＲ技术获得带有Ｈｉｓ６标签的ＳＵＭＯ－ＡＧＡＰ融合基因；然后构建含ＳＵＭＯ－ＡＧＡＰ基因的重组表达载体；再将构建的表达载体转入宿主细胞进行表达；最后用物理方法或化学试剂裂解细胞，抽提重组融合蛋白质，Ｈｉｓ纯化融合蛋白，得到纯的ＳＵＭＯ－ＡＧＡＰ融合蛋白，进行酶切反应，释放出ＡＧＡＰ，经过一步纯化得到纯净的ＡＧＡＰ蛋白质。该方法大大提高了产率，节省成本，操作简便，且利用该方法生产的ＡＧＡＰ具有广泛的生物学活性，可以抑制多种肿瘤细胞的增殖，同时具有镇痛效应。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种东亚钳蝎蝎毒素ＡＧＡＰ的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：　１）利用重叠ＰＣＲ技术获得带有Ｈｉｓ６标签的ＳＵＭＯ－ＡＧＡＰ融合基因；　２）构建含ＳＵＭＯ－ＡＧＡＰ基因的重组表达载体；　３）将步骤２）中的表达载体转入宿主细胞进行表达；　４）用物理方法或化学试剂裂解细胞，抽提重组融合蛋白质，Ｈｉｓ纯化融合蛋白，得到纯的ＳＵＭＯ－ＡＧＡＰ融合蛋白，进行酶切反应，释放出ＡＧＡＰ，经过一步纯化得到纯净的ＡＧＡＰ蛋白质。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：曹鹏，卢悟广，王志刚，于杰淼，
申请(专利权)人：江苏省中医药研究院，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]