一种地发菌及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种地发菌及应用，涉及微生物技术领域。地发菌SGZ

【技术实现步骤摘要】
一种地发菌及应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，更具体的说是涉及一种地发菌及应用。

技术介绍

[0002]铁是地壳中第四大元素，在土壤和沉积物中具有很高的丰度。土壤和沉积物中铁的还原是由微生物驱动的。铁还原微生物在厌氧条件下，微生物氧化体内的基质(电子供体)，利用外界的Fe(III)作为呼吸链末端电子受体，实现电子在呼吸链上的传递，形成跨膜的质子浓度电势梯度，进而转化为其代谢所需的能量，从而使Fe(III)还原为Fe(II)。异化铁还原是某些土壤和沉积物中有机质分解中的一个重要过程，对有机物污染降解具有重要作用，在厌氧地层的生物修复中也起到重要作用。
[0003]水稻是我国的第一大粮食作物，稻田生态系统是天然的好氧与厌氧交替的生态系统，作为一种研究氧化还原过程的模式系统一直受到研究者们的重视，其中铁的氧化还原占有重要地位。因而系统开展Fe(III)还原微生物特性的研究，对于阐明土壤中氧化铁的微生物还原机理、认识异化铁还原在稻田生态系统中的重要作用，促进水稻土中污染物的转化与修复具有重要的理论和实际意义。
[0004]地发菌属(Geothrix)是全噬菌科(Holophagaceae)下的一类严格厌氧、革兰氏阴性细菌。目前，地发菌属仅包含1个有效种，关于地发菌属资源研究报道甚少。通过对该菌株的初步探究，我们发现其具有铁还原能力。目前全球可培养微生物约为1％，而厌氧微生物纯培养物占全球可培养微生物不到0.1％，大部分厌氧微生物处于未培养状态。因此，挖掘具有铁还原功能的微生物新种是本领域技术人员亟需解决的问题。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术提供了一种地发菌及应用；
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0007]一种地发菌，所述地发菌SGZ
‑
164，分类命名为Geothrix sp.，保藏编号为GDMCC No：63128，保藏日期为2023年01月02日，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省微生物菌种保藏中心。
[0008]一种地发菌在制备铁还原生物制剂中的应用。
[0009]一种地发菌在制备土壤原位修复剂中的应用。
[0010]一种用于土壤污染修复的微生物制剂，所述微生物制剂中含有权利要求1所述的地发菌SGZ
‑
164。
[0011]一种污染土壤修复方法，包括将权利要求1所述的地发菌SGZ
‑
164接种到污染土壤中，对污染土壤进行修复。
[0012]一种降低水稻土中有机污染物残留的方法，包括将权利要求1所述的地发菌SGZ
‑
164接种到水稻土中。
[0013]经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0014]本专利技术的地发菌Geothrixsp.SGZ
‑
164可以在厌氧条件下可利用富马酸钠和三价铁为电子受体，加速有机物的降解。使用本专利技术的新菌株，可以制备得到高效的土壤原位修复微生物制剂。
[0015]此外，本专利技术的地发菌Geothrixsp.SGZ
‑
164的最佳生长温度为30℃，接种在水稻土中，可以有效去除其中的难降解有机污染物。
附图说明
[0016]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
[0017]图1为菌株Geothrixsp.SGZ
‑
164细胞的透射电镜图；
[0018]图2为本专利技术提供的采用最大似然法(Maximum Likelihood)基于16SrRNA基因的系统发育树图；
[0019]图3为本专利技术提供的细胞色素c全波长吸收光谱图；
[0020]图4为本专利技术提供的铁还原能力示意图。
具体实施方式
[0021]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0022]实施例1
[0023]一、菌株SGZ
‑
164的分离和富集培养
[0024]1)取200μL梯度稀释的新鲜土壤悬浮液(土壤取样自福建省福州市仓山区上下店路15号福建农林大学实验水稻田(26.9450N,119.3771E)，由无氧无菌水稀释得到悬浮液)，涂布于含有40mM富马酸钠的R2A平板上，30℃严格厌氧培养10d。
[0025]R2A培养基(L
‑
1)：0.25g胰蛋白胨，0.5g酸水解酪蛋白，0.5g酵母浸粉，0.5g可溶性淀粉，0.3g磷酸二氢钾，0.1g硫酸镁，0.3g丙酮酸钠，0.25g蛋白胨，0.5g葡萄糖，pH 7.0。取100μL梯度稀释的新鲜土壤悬浮液和富集液，涂布于改良的R2A(添加40mM富马酸钠)平板上，30℃严格厌氧培养10d；
[0026]2)挑取平板上菌落，采用连续划线法进行纯化，直至获得单个纯培养物。
[0027]3)重复步骤2)，直至获得纯菌SGZ
‑
164。
[0028]二、菌株SGZ
‑
164的形态特征
[0029]1)菌体的形态特征
[0030]菌株SGZ
‑
164菌体呈弧杆状，端生鞭毛。菌株SGZ
‑
164为革兰氏阴性菌。
[0031]2)菌落形态特征
[0032]菌株SGZ
‑
164经活化后，30℃厌氧条件下，在含有富马酸钠的R2A平板培养7天后形成直径为微红色、不透明的圆形菌落。
[0033]三、菌株SGZ
‑
164的分类地位
[0034]提取专利技术菌株SGZ
‑
164的基因组DNA。以提取的1μL DNA为模板，通过细菌16S rRNA基因通用引物27F和1492R进行扩增。
[0035]27F：5
′‑
GAGTTTGATCCTGGCTCAG
‑3′
，见SEQ ID No.1；
[0036]1492R：5
′‑
ACGGCTACCTTGTTACGACTT
‑3′
，见SEQ ID No.2。
[0037]PCR反应程序：94℃预变性5min；94℃变性30s，55℃退火60s，72℃延伸90s，共30个循环；最后72℃延伸10min。
[0038]取5μL PCR产物，点样于1％的琼脂糖凝胶中，以2000bp Marker作为标准分子量，5V/cm电压，电泳本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种地发菌，其特征在于，所述地发菌SGZ
‑
164，分类命名为Geothrixsp.，保藏编号为GDMCCNo：63128，保藏日期为2023年01月02日，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省微生物菌种保藏中心。2.权利要求1所述的一种地发菌在制备铁还原生物制剂中的应用。3.权利要求1所述的一种地发菌在制备土壤原位修复剂中的应用。4.一种用于土壤污染修复的...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁育勤，杨尚，张万旗，刘国红，
申请(专利权)人：厦门市园林植物园，
类型：发明
国别省市：