一种有效改善水体底质环境的微生物菌剂生产方法技术

本发明专利技术属于改善水体底质环境技术领域，具体涉及一种复合微生物菌剂的制备方法。本发明专利技术由一株枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、一株胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）和一株丁酸梭菌（Clostridium butyricum）的液态发酵产物复配造粒而成，其中枯草芽孢杆菌的有效活菌数≥2

【技术实现步骤摘要】
一种有效改善水体底质环境的微生物菌剂生产方法


[0001]本专利技术属于改善水体底质环境
，具体涉及一种复合微生物菌剂的制备方法。

技术介绍

[0002]随着水产养殖规模的扩大和产量的不断增加养殖户在在水体中投放的营养越来越多，当然不是营养多水产动物就能全部吸收，那这些营养元素将会落入水底导致水体富营养化，已严重影响了水产养殖业的可持续发展，若不经过相应处理，将对环境造成危害。利用复合微生物菌剂直击水底改善水体底质环境从而改善水体水质，一来，可以改善水体，二来，通过微生物方式可以保护水体动物肠道，并且可大大减少养殖户经济损失，因此配套的微生物菌剂生产成为重中之重。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是克服现有技术中存在的不足，提供一种复合微生物菌剂，可适应水体中各种环境，在水体中繁殖来分解水底底质，对微生物的选用翻看大量书籍进行多种实验，在菌剂生产复配时需要对配比进行不断的调试，同时还需要达到资源节约目的。
[0004]为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案是：一种复合微生物菌剂，所述复合微生物菌剂由枯草芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌和丁酸梭菌的液态发酵混配造粒而成，其中枯草芽孢杆菌的有效活菌数≥2
×
10
9 cfu/g，胶冻样芽孢杆菌的有效活菌数≥5
×
10
7 cfu/g，丁酸梭菌的有效活菌数≥5
×
10
7 cfu/g。
[0005]所述复合微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：（1）液态发酵：将枯草芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌和丁酸梭菌分别进行液态发酵，得到大量的微生物菌体；（2）菌液混配：对发酵后的产物加入辅料进行混合复配；（3）滚筒造粒：将枯草芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌和丁酸梭菌混合复配的产物进行滚筒造粒；（4）低温烘干：将枯草芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌和丁酸梭菌的造粒产物进行低温烘干处理，烘干后枯草芽孢杆菌的有效活菌数≥2
×
10
9 cfu/g，胶冻样芽孢杆菌的有效活菌数≥5
×
10
7 cfu/g，丁酸梭菌的有效活菌数≥5
×
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7 cfu/g。
[0006]所述枯草芽孢杆菌液态发酵的制备采用以下步骤：将枯草芽孢杆菌菌株从斜面接种至一级种子培养基中培养2
‑
3 d，挑选培养基茁壮的菌落，挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养，重复此步骤2
‑
3次，从而得到生长良好的菌落，挑选其中部分菌落接种到摇瓶培养基中培养得到菌液，将菌液接入发酵罐中继续培养，获得枯草芽孢杆菌的液态发酵产物；所述种子培养基相同，配方为0.5%酵母提取物，1%胰蛋白胨，1%氯化钠，琼脂1.5%
‑
2%，pH为7.0
‑
7.5；摇瓶培养基配方为0.5%酵母提取物，1%胰蛋白胨，1%氯化钠。
[0007]所述发酵条件为温度为37
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37.5℃。
[0008]所述发酵罐培养基的配方为玉米淀粉1.8kg，牛肉膏0.18kg，蛋白胨0.8kg， 酵母粉0.64kg，磷酸二氢钾0.24kg，磷酸氢二钾0.12kg，硫酸镁0.032kg，乙酸钠0.2kg，柠檬酸钠0.16kg，碳酸钙0.24kg，硫酸锰8g，硫酸亚铁16g，消泡剂0.24kg，pH 7.0
‑
7.5，发酵条件温度为37.0
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37.5℃。
[0009]所述胶冻样芽孢杆菌液态发酵的制备采用以下步骤：将胶冻样芽孢杆菌菌株从斜面分别接种至培养基中培养2
‑
3 d，挑选培养基茁壮的菌落，挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养，重复此步骤2
‑
3次，从而得到生长良好的菌落，挑选其中部分菌落接种到摇瓶培养基中培养得到菌液,将菌液接入发酵罐中继续培养，获得枯草芽孢杆菌的液态发酵产物；所述种子培养基相同，配方为0.5%酵母提取物，1%胰蛋白胨，1%氯化钠，琼脂1.5%
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2%，pH为7.0
‑
7.5；摇瓶培养基配方为蔗糖20（g/L），尿素0.1（g/L），氯化钠0.2（g/L）磷酸氢二钾0.2（g/L）硫酸锰0.2（g/L）碳酸钙5（g/L）pH7.0
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7.2。
[0010]所述发酵罐培养基配方为玉米淀粉10（g/L），黄豆粉5（g/L），蔗糖2（g/L），硫酸铵1.8（g/L），磷酸氢二钾2（g/L），硫酸镁0.6（g/L），酵母粉1.5（g/L），蛋白胨1（g/L），牛肉膏1（g/L），碳酸钙5（g/L），pH7.0
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7.2，发酵温度为30
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30.5℃。
[0011]所述丁酸梭菌的液态发酵制备采用以下步骤：将丁酸梭菌菌株从斜面分别接种至培养基中培养2
‑
3 d，挑选培养基茁壮的菌落，挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养，重复此步骤2
‑
3次，从而得到生长良好的菌落，挑选其中部分菌落接种到摇瓶培养基中培养得到菌液,将菌液接入发酵罐中继续培养，获得枯草芽孢杆菌的液态发酵产物；所述种子培养基和摇瓶相同，面粉20（g/L），半胱氨酸0.75（g/L），乙酸钠1.8（g/L），磷酸氢二钾2.2（g/L），硫酸锰0.1（g/L），磷酸二氢钾2（g/L），硫酸镁0.4（g/L），酵母粉15（g/L），蛋白胨10（g/L），吐温1（g/L），柠檬酸钠1（g/L），碳酸钙2（g/L）pH6.8，发酵条件为温度为37
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37.5℃，其中斜面培养基中需要加琼脂1.5%
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2%。
[0012]所述发酵罐培养基配方为面粉20（g/L），牛肉膏5（g/L），硫酸亚铁0.15（g/L），半胱氨酸0.75（g/L），乙酸钠1.8（g/L），磷酸氢二钾2.2（g/L），硫酸锰0.1（g/L），磷酸二氢钾2（g/L），硫酸镁0.4（g/L），酵母粉15（g/L），蛋白胨10（g/L），吐温1（g/L），柠檬酸钠1（g/L），碳酸钙2（g/L），消泡剂0.1（g/L），pH6.8，发酵条件为温度为37
‑
37.5℃。
[0013]本专利技术具有以下优点：本专利技术所述复合微生物菌剂由枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）和丁酸梭菌（Clostridium butyricum）的液态发酵产物复配造粒而成，本专利技术能够有效改善水体底质环境中、保护水体动物肠道、易存储、易运输，达到保护环境的目的。
附图说明
[0014]图1为本专利技术所述复合微生物菌剂的制备方法流程图。
具体实施方式
[0015]下面结合具体附图和实施例对本专利技术作进一步说明。
[0016]实施例1以上所述，仅是本专利技术的较佳实施例，并非对本专利技术作任何限制。凡是根据本专利技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、变更以本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种有效改善水体底质环境的微生物菌剂生产方法，其特征在于，所述复合微生物菌剂由枯草芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆和丁酸梭菌的液态发酵产物复配造粒而成，其中枯草芽孢杆菌的有效活菌数≥2
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10
9 cfu/g，胶冻样芽孢杆菌的有效活菌数≥5
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10
7 cfu/g，丁酸梭菌的有效活菌数≥5
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7 cfu/g。2.权利要求1所述复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）液态发酵：将枯草芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌和丁酸梭菌分别进行液态发酵，得到大量的微生物菌体；（2）菌液混配：对发酵后的产物加入辅料进行混合复配；（3）滚筒造粒：将枯草芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌和丁酸梭菌混合复配的产物进行滚筒造粒；（4）低温烘干：将枯草芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌和丁酸梭菌的造粒产物进行低温烘干处理，烘干后枯草芽孢杆菌的有效活菌数≥2
×
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9 cfu/g，胶冻样芽孢杆菌的有效活菌数≥5
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7 cfu/g，丁酸梭菌的有效活菌数≥5
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7 cfu/g。3.如权利要求2所述复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌液态发酵的制备采用以下步骤：将枯草芽孢杆菌菌株从斜面接种至一级种子培养基中培养2
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3 d，挑选培养基茁壮的菌落，挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养，重复此步骤2
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3次，从而得到生长良好的菌落，挑选其中部分菌落接种到摇瓶培养基中培养得到菌液，将菌液接入发酵罐中继续培养，获得枯草芽孢杆菌的液态发酵产物；所述种子培养基相同，配方为0.5%酵母提取物，1%胰蛋白胨，1%氯化钠，琼脂1.5%
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2%，pH为7.0
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7.5；摇瓶培养基配方为0.5%酵母提取物，1%胰蛋白胨，1%氯化钠；所述发酵条件为温度为37
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37.5℃；所述发酵罐培养基的配方为玉米淀粉1.8kg，牛肉膏0.18kg，蛋白胨0.8kg， 酵母粉0.64kg，磷酸二氢钾0.24kg，磷酸氢二钾0.12kg，硫酸镁0.032kg，乙酸钠0.2kg，柠檬酸钠0.16kg，碳酸钙0.24kg，硫酸锰8g，硫酸亚铁16g，消泡剂0.24kg，pH 7.0
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7.5，发酵条件温度为37.0
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【专利技术属性】
技术研发人员：张六六，朱选，陆沙，
申请(专利权)人：江苏纳克生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：