【技术实现步骤摘要】
一种牛源A型多杀性巴氏杆菌减毒株及其制备方法和应用
[0001]本专利技术属于生物制品
,具体涉及一种牛源A型多杀性巴氏杆菌减毒株及其制备方法和应用。
技术介绍
[0002]多杀性巴氏杆菌是一种重要的人畜共患致病菌,可导致多种家禽家畜,甚至人类患病,主要包括禽霍乱、猪的萎缩性鼻炎和肺疫、牛羊的出血性败血病和肺炎等。这给养殖业带来了巨大的经济损失,同时也威胁着人类的生命安全。
[0003]根据荚膜血清型不同,多杀性巴氏杆菌可分为A、B、D、E和F型五种血清型,A型主要引起牛肺炎。该病的防控主要以抗生素和疫苗为主,但是抗生素滥用存在耐药和环境污染等问题,疫苗防控是预防该病的主要措施。疫苗的制备一般采用减毒株制备得到。目前为止,国内尚无针对A型多杀性巴氏杆菌的有效疫苗,且不同血清型疫苗间交叉保护作用较差。
技术实现思路
[0004]有鉴于此,本专利技术的目的在于提供一种牛源A型多杀性巴氏杆菌PmCQ2Δ889
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894减毒株,通过缺失野生型多杀性巴氏杆菌基因组中889,890,891 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种牛源A型多杀性巴氏杆菌PmCQ2Δ889
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894减毒株,其特征在于,在牛源A型多杀性巴氏杆菌PmCQ2的基础上,缺失基因组中889,890,891,892,893和894基因。2.根据权利要求1所述牛源A型多杀性巴氏杆菌PmCQ2Δ889
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894减毒株,其特征在于,889基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;890基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示;891基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示;892基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示;893基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示;894基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示。3.权利要求1所述牛源A型多杀性巴氏杆菌PmCQ2Δ889
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894减毒株的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:以牛源A型多杀性巴氏杆菌PmCQ2的基因组DNA为模板,分别以引物Pm889
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894U
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F/Pm889
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894U
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R扩增Pm889
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894基因的上游同源臂,用引物Pm889
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894D
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F/Pm889
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894D
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R扩增Pm889
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894基因的下游同源臂;将所述Pm889
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894基因的上游同源臂和扩增Pm889
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894基因的下游同源臂克隆至pUC19oriKan
R
质粒中,得到缺失基因重组质粒pUC19oriKanRΔ889
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894;将所述缺失基因重组质粒pUC19oriKanRΔ889
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894转化入PmCQ2感受态细胞中,得到PmCQ2Δ889
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894。4.根据权利要求3所述牛源A型多杀性巴氏杆菌PmCQ2Δ889
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894减毒株的构建方法,其特征在于,所述引物Pm889
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894U
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