一种提高重组人源化胶原蛋白表达水平的发酵工艺制造技术

本发明专利技术涉及发酵工程技术领域，尤其涉及一种提高重组人源化胶原蛋白表达水平的发酵工艺，包括以下步骤：S1：配制含第一诱导剂和第二诱导剂的TB培养基；所述第一诱导剂为卵磷脂；所述第二诱导剂由泛酸、延胡索酸按1:(0.1

【技术实现步骤摘要】
一种提高重组人源化胶原蛋白表达水平的发酵工艺


[0001]本专利技术涉及发酵工程
，尤其涉及一种提高重组人源化胶原蛋白表达水平的发酵工艺。

技术介绍

[0002]胶原蛋白是哺乳动物体内含量最多的功能性结构蛋白，广泛存在于机体内的皮肤、肌腱、血管、牙齿、骨骼等结缔组织的细胞外基质中，在伤口愈合、细胞修复、皮肤抗衰老、细胞免疫等方面具有重要的应用价值。胶原蛋白由3条α链的多肽链亚基组成，α链自身构型为左手螺旋，三条α链又互相缠绕成右手螺旋结构，即胶原蛋白的“胶原域”，其肽链通式为(Gly
‑
X
‑
Y)n，其中X一般为Pro（脯氨酸），Y一般为Hyp（羟脯氨酸）。目前，胶原蛋白主要分为I型、II型、III型等类型，I型胶原蛋白分子组成为[α1(I)]2α2(I)，主要分布于骨骼中；II型胶原蛋白由[α1(II)]3组成，主要由软骨细胞产生；III型胶原蛋白分子组成为[α1(III)]3，由于半胱氨酸的存在，肽链间能形成二硫键，可构成细纤维，主要存在于表皮层和真皮层之间的微胶原层，是维持肌肤高弹饱满的关键。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高重组人源化胶原蛋白表达水平的发酵工艺，其特征在于，包括以下步骤：S1：配制TB培养基：胰蛋白胨20
‑
30g/L、酵母提取物40
‑
60g/L、K2HPO470
‑
75mM、KH2PO415
‑
20mM、第一诱导剂0.8
‑
1.2mM、第二诱导剂0.05
‑
0.1g/L、蛋白保护剂0.5
‑
1g/L、甘油3
‑
5g/L、余量为水；所述第一诱导剂为卵磷脂；所述第二诱导剂由泛酸、延胡索酸按1:(0.1
‑
0.3)的质量比混合而成；S2：一级种子培养：将大肠杆菌生产种子接种至LB培养基，于温度为36
‑
38℃、摇床转速为180
‑
220r/min的条件下，震荡过夜培养；S3：发酵培养：将S2所得一级种子接种至含有TB培养基的发酵罐内，36
‑
38℃发酵培养12
‑
18h；S4：诱导表达：当发酵罐内发酵体系的光密度OD值达到3
‑
5时，调整诱导温度设置为15
‑
20℃，低温诱导20
‑
28h。2.根据权利要求1所述的一种提高重组人源化胶原蛋白表达水平的发酵工艺，其特征在于，所述大肠杆菌生产种子占LB培养基的质量百分比为0.2
‑
0.3%。3.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：张进，李书文，张涛，路宝，钱强，
申请(专利权)人：江苏亨瑞生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：