一种密码子优化的牛病毒性腹泻病毒1型E2蛋白基因及其应用制造技术

技术编号:37854629 阅读:34 留言:0更新日期:2023-06-14 22:47
本发明专利技术实施例涉及一种密码子优化的牛病毒性腹泻病毒1型E2蛋白基因及其应用,属于生物工程领域,所述密码子优化的牛病毒性腹泻病毒1型E2蛋白基因的核苷酸序列如SEQ IDNO:1所示。本发明专利技术成功构建获得了一株稳定表达牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的CHO细胞,该细胞株表达的E2蛋白具有表达量高,免疫原性好,易于纯化和生产的特点。生产的特点。生产的特点。

【技术实现步骤摘要】
一种密码子优化的牛病毒性腹泻病毒1型E2蛋白基因及其应用


[0001]本专利技术涉及兽用生物制品领域,具体为一种密码子优化的牛病毒性腹泻病毒1型E2蛋白基因、核酸构建体、重组表达载体、表达系统细胞、牛病毒性腹泻病毒1型E2蛋白的制备方法、牛病毒性腹泻病毒1型E2蛋白、免疫原性组合物、牛病毒性腹泻病毒亚单位疫苗的制备方法、及它们在制备牛病毒性腹泻病毒的抗原、抗体、亚单位疫苗或检测试剂盒中的应用。

技术介绍

[0002]牛病毒性腹泻(Bovine viral diarrhea,BVD)又称黏膜病,是由牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)引起的以腹泻、发热、白细胞减少、口腔及消化道黏膜糜烂坏死、怀孕母牛流产及畸形胎等症状的一种接触性传染病。世界范围内广泛存在,可在牛群中持续存在和传播,严重影响牛的生产性能,导致产奶量下降、乳品质下降、生长迟缓、发育不良等。该病主要感染牛,犊牛更易感,同时也可感染绵羊、山羊、猪、鹿和其他反刍动物。怀孕母牛急性感染时,BVDV可经胎盘传染给胎儿,引起胎儿免疫耐受从而成为持续本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种密码子优化的牛病毒性腹泻病毒1型E2蛋白基因,其特征在于,所述密码子优化的牛病毒性腹泻病毒1型E2蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。2.一种核酸构建体,其包括至少一个拷贝的权利要求1所述的密码子优化的牛病毒性腹泻病毒1型E2蛋白基因;可选地,还包括位于牛病毒性腹泻病毒1型E2蛋白基因的5

端的编码信号肽的基因序列和/或Kozak序列;可选地,还包括位于牛病毒性腹泻病毒1型E2蛋白基因的5

端的Kozak序列和编码信号肽的基因序列,其含有如SEQ ID NO:3所示的序列;和/或,还包括位于牛病毒性腹泻病毒1型E2蛋白基因的3

端的编码标签的基因序列;可选地,所述标签选自Flag标签、His标签、MBP标签、HA标签、myc标签、GST标签、SUMO标签中的至少一种;优选地标签为His标签;可选地,所述核酸构建体的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。3.一种权利要求2所述的核酸构建体的重组表达载体;优选地,所述重组表达载体采用pCEP4载体。4.一种包括权利要求3所述的重组载体的表达系统细胞;优选地,所述表达系统细胞为哺乳动物细胞;进一步优选地,所述哺乳动物细胞为CHO

B10细胞。5.一种制备牛病毒性腹泻病毒1型E2蛋白的方法,其特征在于,包括如下步骤:采用权利要求4所述的表达系统细胞进行表达,表达后收集细胞上清,纯化得到牛病毒性腹泻病毒1型E2蛋白。6.一种具有免疫原性的牛病毒性腹泻病毒1型E2蛋白,可选地,其氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示,可选地,其由权利要求5所述的方法制备得到。7.一种免疫原性组合物,其包含权利要求1所述的密码子优化的牛病毒性腹...

【专利技术属性】
技术研发人员:武沛泽严永胡义彬伏显华赵卓武春霞江厚生
申请(专利权)人:北京华夏兴洋生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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