一种脊髓小胶质细胞的培养方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种脊髓小胶质细胞的培养方法及应用。所述培养方法包括：提供脊髓组织混合胶质细胞，采用机械破碎和细胞消化液对所述脊髓组织混合胶质细胞进行处理，获得混合胶质单细胞；对所述混合胶质单细胞进行培养，采用轻柔摇动法对培养后的混合胶质单细胞进行第一次纯化和第二次纯化，得到高纯度的脊髓小胶质细胞。本发明专利技术建立了一种优化的脊髓小胶质细胞的培养方法，采取经过适当时间的扩增后手摇移走未贴壁细胞进行二次纯化，简单易操作，减少了对细胞的损伤，保证了细胞活性。最后得到了高纯度、高产量和可增殖的人脊髓小胶质细胞，为体外研究其功能、在脊髓损伤中的作用以及筛选治疗药物提供了条件。及筛选治疗药物提供了条件。及筛选治疗药物提供了条件。

【技术实现步骤摘要】
一种脊髓小胶质细胞的培养方法及应用


[0001]本专利技术涉及一种细胞的培养方法，具体涉及一种脊髓小胶质细胞的培养方法及其应用，属于细胞培养


技术介绍

[0002]小胶质细胞是中枢神经系统中的巨噬细胞，它在神经系统正常发育以及病理情况下都起着最重要的作用，是中枢神经系统中的第一道也是最主要的一道免疫防线。同时作为神经胶质细胞中的一员，小胶质细胞具有支持、营养、保护和修复神经元等重要功能。小胶质细胞由于具有双重身份和发挥双重作用而得到越来越多的重视。随着现代生活节奏的不断加快，交通日益高速化，高处坠落和交通事故使当前脊髓损伤的发生率、致残率逐年增高。脊髓损伤治疗一直是临床研究的重点和难点。近期有报道指出小胶质细胞能够协调脊髓损伤的新生小鼠实现无疤痕伤口愈合和自发性轴突再生，但其在脊髓损伤的临床患者的损伤修复过程中所能起的作用及其机制尚不清楚。因此，体外分离和培养人脊髓的小胶质细胞是对其进行深入研究以充分发挥其有利作用的关键，并对体外评估药物疗效和毒性至关重要。迄今为止，仅有报道的人脑小胶质细胞的培养方法，但人脑小胶质细胞通常与体内自然发本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脊髓小胶质细胞的培养方法，其特征在于包括：提供脊髓组织混合胶质细胞；采用机械破碎和细胞消化液对所述脊髓组织混合胶质细胞进行处理，获得混合胶质单细胞；对所述混合胶质单细胞进行培养；采用轻柔摇动法对培养后的混合胶质单细胞进行第一次纯化和第二次纯化，得到高纯度的脊髓小胶质细胞。2.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于：所述细胞消化液包括蛋白水解酶和胶原溶解酶的混合液。3.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于：对所述混合胶质单细胞进行培养后，所述混合胶质细胞的接种密度为1.5～2
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107个。4.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，包括：在温度为35～39℃、3～7％CO2条件下对所述混合胶质单细胞进行培养5～7天，细胞出现分层现象。5.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于，具体包括：采用轻柔摇动法对培养后的混合胶质单细...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴建武，范彩霞，陈艳艳，
申请(专利权)人：中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所，
类型：发明
国别省市：