基于固态纳米孔检测NCL构象及其G4复合物的方法技术

本发明专利技术属于分子检测技术领域，具体涉及一种基于固态纳米孔检测NCL构象及其G4复合物的方法。该方法为：利用固态纳米孔，在纳米孔两侧施加偏压，在外加偏压的条件下测试待测样本通过纳米孔的易位信号，通过易位信号对待测样本中的核仁素进行定性和/或定量分析。通过分析偏压下NCL及其G4复合物进入纳米孔通道所产生的阻塞电流幅值与易位时间，可以得到NCL及其G4复合物的尺寸、带电性等信息。本发明专利技术通过对不同浓度的NCL进行检测，在大大降低测试成本的同时，又能对NCL进行高灵敏、快速的痕量检测。本发明专利技术通过对NCL和NCL

【技术实现步骤摘要】
基于固态纳米孔检测NCL构象及其G4复合物的方法


[0001]本专利技术属于分子检测
，具体涉及一种基于固态纳米孔检测NCL构象及其G4复合物的方法。

技术介绍

[0002]核仁素(Nucleolin，NCL/C23)是核仁中最丰富的磷酸蛋白之一。NCL能与细胞中其他蛋白质进行不同的相互作用，进而参与许多细胞内部的生物学过程，例如：DNA修复、重塑以及基因组稳定等，并且可以通过调节细胞的增殖、存活或凋亡来控制细胞的稳态。DNA/RNA的四链体(简称G4)可用于抑制肿瘤的增殖和细胞生命周期；同时G4与多种蛋白存在特异性相互作用，可用于调控某些疾病的发生发展机制，所以研究G4与蛋白的相互作用具有非常重要的生物学意义。
[0003]现有研究表明，G4 AS1411与pre
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miRNA
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149(简称RNA149)已被用于靶向NCL，而且对转移性肾细胞癌等癌症显示出明显活性，此外这些序列形成的G
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四链体结构也被用作生物传感器来选择性地检测NCL。因此，快速灵敏地检测NCL及其与G4本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.基于固态纳米孔检测核仁素蛋白构象的方法，其特征在于，利用固态纳米孔，在外加偏压的条件下测试待测样本通过纳米孔的易位信号，通过易位信号对待测样本中的核仁素进行定性和/或定量分析；所述待测样本为由核仁素与缓冲溶液组成的复合溶液。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述缓冲溶液为1M KCl、10mM Tris、1mM EDTA，pH 7.4。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测样本中，核仁素的浓度为1nM～10nM。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述固态纳米孔以氮化硅薄膜为载体；所述固态纳米孔的直径为8.5nm～15.5nm。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述固态纳米孔的制备方法为：采用食人鱼溶液清洗所述氮化硅薄膜，将清洗后的硅基氮化硅薄膜装配在测试池flowcell中，在flowcell中添加电导液；采用介电击穿的方式制备所述固态纳米孔；所述电导液为1M KCl、10mM Tris、1mM EDTA，pH 8。6.NCL
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G4复合物的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)配置NCL
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G4复合物样品；(2)利用权利要求1
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5任一项所述的方法，基于固态纳米孔对所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁丽媛，王忠，秦富鹏，李荣洁，奇国栋，
申请(专利权)人：中国科学院重庆绿色智能技术研究院，
类型：发明
国别省市：