【技术实现步骤摘要】
降低LKB1蛋白泛素化修饰水平的方法
[0001]本专利技术属于细胞生物学和转化医学领域,尤其涉及一种降低LKB1蛋白泛素化修饰水平,并进行鉴定的方法。
技术介绍
[0002]蛋白质是生命活动的执行者,调控大多数生理过程。随着针对蛋白质表达、活性、定位、相互作用以及稳定性的研究深入进行,越来越多的证据表明,蛋白质的翻译后修饰对于蛋白质的功能有着至关重要的影响。很多蛋白质只有的发生特定的修饰之后,才能够正确执行功能,而不同的修饰作用,对蛋白质的功能可能有着截然不同的影响。随着研究的深入进行和技术手段的逐渐成熟,新的蛋白质修饰方式,修饰的调控机理和修饰的作用不断被发现,极大地丰富了蛋白质的功能,使同一种蛋白质获得了参与多种信号通路的能力,拓展了细胞蛋白调控网络,是细胞和生命体适应外界复杂多变的刺激做出精确应对的分子基础。
[0003]蛋白质的修饰方式包括磷酸化、甲基化、乙酰化、糖基化、泛素化、SUMO化、腺苷酸化、脂酰化等,发生于特定的氨基酸残基,并由特异的酶进行催化进行去修饰过程,均受到精确的调控。泛素化修饰于上世纪7
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.降低LKB1蛋白泛素化修饰水平的方法,其特征在于,在人或哺乳动物细胞中提高Midkine蛋白表达量。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,于人或哺乳动物细胞中转染带有Midkine编码基因的表达质粒,提高Midkine蛋白表达量。3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,通过提高Midkine蛋白表达水平降低LKB1蛋白泛素化修饰水平的确认过程:1)培养人或哺乳动物细胞,对其转染带有Midkine编码基因的表达质粒,对Midkine蛋白进行高表达;同时对同一种细胞培转染未带有Midkine编码基因的表达质粒,作为未高表达Midkine蛋白的对照组细胞,在对照组和Midkine高表达组细胞中,转染带有泛素(ubiquitin)蛋白编码基因的表达质粒;2)对于表达泛素蛋白的高表达Midkine细胞及其对照组细胞,使用LKB1为诱饵蛋白进行免疫共沉淀(Co
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Immunoprecipitation,Co
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IP)实验,利用We...
【专利技术属性】
技术研发人员:朴海龙,夏天,
申请(专利权)人:中国科学院大连化学物理研究所,
类型:发明
国别省市:
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