体外诱导人源脂肪干细胞分化为软骨细胞的方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种体外诱导人源脂肪干细胞分化为软骨细胞的方法及其应用，涉及生物技术领域。所述方法包括，S1：在体外分离培养人源脂肪干细胞，所述人源脂肪干细胞培养在人源脂肪干细胞培养液中；S2：将S1中的人源脂肪干细胞培养液接种到软骨诱导分化培养基中，诱导人源脂肪干细胞分化为软骨细胞；所述软骨诱导分化培养基组份包括：Basicmedium98mL，Dexamethasone10μL，AscorbicAcid300μL，Insulin

【技术实现步骤摘要】
体外诱导人源脂肪干细胞分化为软骨细胞的方法及其应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种体外诱导人源脂肪干细胞分化为软骨细胞的方法及其应用。

技术介绍

[0002]骨性关节炎(OA)主要是局限于关节的退行性疾病，也是全球重要的公共卫生问题，骨关节炎的传统治疗方法为口服非甾体类抗炎药物，如塞来昔布，萘普生，扑热息痛，布洛芬，双氯芬酸，艾托考昔及氨基葡萄糖等，注射透明质酸钠能缓解关节水肿及软骨损伤，其目的是延缓病情发展，控制和预防关节损伤。药物治疗难以修复骨关节炎造成的关节软骨的破坏，主要是由于软骨细胞的迁移受限，无法迅速聚集到损伤部位。严重骨关节炎患者采取关节镜下关节清扫术及关节置换术等，置换后的关节不能耐受患者的奔跑、跳跃等剧烈运动，且易磨损、松动和损伤。无论药物还是手术治疗骨关节炎，都费用高昂，带有高风险并发症，且无法完全治愈。基于骨关节炎目前的临床治疗现状，人们希望能够找到一种新的，简便易行的治疗方法来改善治疗困境。随着生物再生科技的发展，研究者希望在骨关节炎的早期或中期找到一种既能分化为软骨细胞，又具有一定免疫调节作用的种本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种体外诱导人源脂肪干细胞分化为软骨细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：在体外分离培养人源脂肪干细胞，所述人源脂肪干细胞培养在人源脂肪干细胞培养液中；S2：将S1中的人源脂肪干细胞培养液接种到软骨诱导分化培养基中，诱导人源脂肪干细胞分化为软骨细胞；所述软骨诱导分化培养基组份包括Basic medium 98mL，Dexamethasone 10μL，Ascorbic Acid 300μL，Insulin
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Transferrin
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Selenium Additive 1mL，Sodium Pyruvate 100μL，Proline100μL，按上述含量配置成99.51mL预混液，使用之前再额外添加TGF
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β310μL/1mL。2.根据权利要求1所述的体外诱导人源脂肪干细胞分化为软骨细胞的方法，其特征在于：步骤S1中，体外分离培养人源脂肪干细胞，采用如下方法：取产科健康产妇腹部脂肪2g，去掉筋膜，血块，PBS冲洗后，剪成糜状，用0.075％I型胶原酶37℃水浴消化50min，每隔5分钟振荡1次，1200rpm离心8分钟，去掉油层及水层，用人源脂肪干细胞培养液重悬沉淀，铺板，置于37℃、5％CO2饱和湿度的CO2细胞培养箱中培养，24h半量换液，48h全部换液，待原代hADSCs达80％汇合度状态后，进行传代。3.根据权利要求2所述的体外诱导人源脂肪干细胞分化为软骨细胞的方法，其特征在于：所述人源脂肪干细胞培养液包括：50mL FBS、5mg bFGF、5mL Penicillin/Streptomycin、500mLDMEM/F12。4.根据权利要求1所述的体外诱导人源脂肪干细胞分化为软骨细胞的方法，其特征在于：步骤S2中，诱导人源脂肪干细胞分化为软骨细胞，采用如...

【专利技术属性】
技术研发人员：王娟，梁思强，樊强，易西南，于法标，苏诗博，刘天祎，田子恒，覃祖火，马楚卿，倪盼丽，
申请(专利权)人：海南医学院，
类型：发明
国别省市：