Hsa_circRNA_100632作为暴发性1型糖尿病诊断标志物的应用制造技术

本发明专利技术涉及医药技术领域，尤其涉及Hsa_circRNA_100632作为暴发性1型糖尿病(FT1D)诊断标志物的应用。FT1D患者外周血单个核细胞(PBMC)中hsa_circRNA_100632水平显著增高，与1型糖尿病患者及正常对照具有显著性差异，临床上可以作为诊断性生物标志物用于对FT1D患者诊断及鉴别诊断。并且，上调hsa_circRNA_100632水平可以构建FT1D的模型。100632水平可以构建FT1D的模型。

【技术实现步骤摘要】
Hsa_circRNA_100632作为暴发性1型糖尿病诊断标志物的应用


[0001]本专利技术涉及医药
，尤其涉及Hsa_circRNA_100632作为暴发性1型糖尿病诊断标志物的应用。

技术介绍

[0002]暴发性1型糖尿病(FT1D)是由日本学者近年提出的1型糖尿病(T1D)的新亚型。临床主要表现为急性暴发起病、严重酮症酸中毒，伴随β细胞功能急剧衰竭。病情危重，预后凶险，是常常涉及内科、妇产科、急诊科等多临床学科的急危重症。但是目前FT1D的发病机制不清，早期诊断与预测较困难。因此，深入探讨FT1D分子标志物用于诊断与预测具有十分重要的临床意义。
[0003]环状RNA(circRNA)是一类不具有5
’
末端帽子和3
’
末端poly(A)尾巴的新型非编码RNA。由于其特殊的闭合环状结构，不易被核酸外切酶降解，稳定性好等特点使其成为疾病诊断标志物的良好选择。近年来，许多研究表明circRNA作为分子标志物在肿瘤、神经系统疾病、心血管疾病及免疫性疾病中发挥了重要的作用。但是
[0004]对circRNA在FT1D中的作用进行进一步的研究，有利于探明暴发性1型糖尿病的病因，并对该疾病的治疗指明方向。因此，进一步探讨circRNA是否可作为FT1D的早期诊断及鉴别诊断及预测的生物标志物具有重要意义。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供hsa_circRNA_100632作为暴发性1型糖尿病诊断标志物的应用。<br/>[0006]本专利技术研究发现，FT1D患者外周血单个核细胞(PBMC)中hsa_circRNA_100632水平显著增高，与1型糖尿病患者及正常对照具有显著性差异。
[0007]因此，本专利技术提供了以hsa_circRNA_100632为标志物，在制备暴发性1型糖尿病诊断产品中的应用。
[0008]本专利技术还提供了检测hsa_circRNA_100632的试剂在制备暴发性1型糖尿病诊断产品中的应用。
[0009]本专利技术中，所述的暴发性1型糖尿病诊断产品为诊断的试剂、诊断的工具和/或诊断所用的试剂盒，本专利技术对此不做限定。
[0010]本专利技术还提供了检测hsa_circRNA_100632的试剂，包括如下I)～IV)中的任意一种：
[0011]I)、hsa_circRNA_100632的检测引物；
[0012]II)、hsa_circRNA_100632的检测探针；
[0013]III)、hsa_circRNA_100632的适配体；
[0014]IV)、用于检测hsa_circRNA_100632的芯片。
[0015]本专利技术提供的检测hsa_circRNA_100632的试剂采用PCR或恒温扩增的方法对样本进行检测，所述PCR法包括普通PCR的方法，也可以为qPCR、RTPCR、数字PCR，所述恒温扩增包括LAMP、ERA、NERA、NASBA、RCA、HAD、RPA，所述PCR或恒温扩增的靶标可以为hsa_circRNA_100632，或者为hsa_circRNA_100632转录获得的产物，其可为全长，也可为部分片段，本专利技术对此不做限定。
[0016]一些实施例中，所述hsa_circRNA_100632的检测引物包括如SEQ ID NO.1～2所示的引物对。SEQ ID NO.1所示序列为：ctgtattcttgcttcgctgctt，SEQ ID NO:2所示序列为：ctcctccgctgcctttcc。
[0017]本专利技术所述用于检测hsa_circRNA_100632芯片上可以担载本专利技术所述的引物、探针或适配体，也可以担载其他可以用于检测hsa_circRNA_100632的物质，本专利技术对此不做限定。
[0018]进一步的，本专利技术还提供了一种暴发性1型糖尿病的诊断产品，其包括本专利技术所述的试剂。
[0019]本专利技术所述的诊断产品中还包括总RNA提取试剂、逆转录试剂和RT
‑
qPCR检测试剂。
[0020]本专利技术所述的总RNA提取试剂为PBMC的总RNA提取试剂，一些实施例中，所述总RNA的提取采用Trizol法。
[0021]本专利技术还提供了一种暴发性1型糖尿病的诊断方法，其包括检测样本中的hsa_circRNA_100632表达量。
[0022]本专利技术所述的检测采用RT
‑
qPCR法，根据hsa_circRNA_100632表达量判断样本是否来自于暴发性1型糖尿病患者。所述样本为PBMC。
[0023]具体的，本专利技术所述的暴发性1型糖尿病的诊断方法包括对PBMC抽提RNA，经RT
‑
qPCR检测后计算hsa_circRNA_100632的相对于Control的表达量，根据相对表达量判断是否为暴发性1型糖尿病患者。本专利技术中，所述Control为健康人群PBMC中hsa_circRNA_100632的表达量，以相对表达量1.558作为截断值，相对表达量大于1.558即说明患者可能患暴发性1型糖尿病。
[0024]暴发性1型糖尿病患者体内hsa_circRNA_100632表达量显著高于1型糖尿病患者及正常对照，因此，过表达或使hsa_circRNA_100632进一步活化，可以用于暴发性1型糖尿病模型的构建。
[0025]本专利技术提供了以hsa_circRNA_100632为靶点，在构建暴发性1型糖尿病模型中的应用。
[0026]本专利技术还提供了构建暴发性1型糖尿病模型的试剂，其包括如下i)～iii)中的任意一种：
[0027]i)、过表达hsa_circRNA_100632的试剂；
[0028]ii)、使hsa_circRNA_100632活性提高的试剂；
[0029]iii)、降低hsa_circRNA_100632抑制物的水平或活性的物质。
[0030]本专利技术还提供了构建暴发性1型糖尿病模型的方法，其以本专利技术所述的试剂处理，以提高hsa_circRNA_100632的水平或活性。
[0031]在本专利技术中，所述模型为动物模型或细胞模型。所述过表达hsa_circRNA_100632
的试剂可以为对细胞进行转染或转化的试剂，本专利技术对此不做限定，本专利技术中所述使hsa_circRNA_100632活性提高的试剂能够提高hsa_circRNA_100632的活性或者对hsa_circRNA_100632起到激活作用。而所述降低hsa_circRNA_100632抑制物的水平的物质，或者降低hsa_circRNA_100632抑制物的活性的物质，可以为小分子化合物也可通过基因工程的手段对hsa_circRNA_100632抑制物进行敲低或敲除。本专利技术对此亦不做限定。
[0032]本专利技术通过研究证明，FT1D患者PBMC中hsa_circRNA_100632水平显著增高，与1型糖尿病患本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.以hsa_circRNA_100632为标志物，在制备暴发性1型糖尿病诊断产品中的应用。2.检测hsa_circRNA_100632的试剂在制备暴发性1型糖尿病诊断产品中的应用。3.检测hsa_circRNA_100632的试剂，其特征在于，包括如下I)～IV)中的任意一种：I)、hsa_circRNA_100632的检测引物；II)、hsa_circRNA_100632的检测探针；III)、hsa_circRNA_100632的适配体；IV)、用于检测hsa_circRNA_100632的芯片。4.根据权利要求3所述的试剂，其特征在于，所述hsa_circRNA_100632的检测引物包括如SEQ ID NO.1～2所示的引物对。5.一种暴发性1型糖尿病的诊断产品，其特征在于，包括权利要求3或4所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗说明，周智广，殷文凤，李霞，谢志国，黄干，邱俊霖，
申请(专利权)人：中南大学湘雅二医院，
类型：发明
国别省市：